Il punto di vista
dell'anatomo patologo
Anna Sapino
2011 HER2 Diagnostica AP
Quando farlo?
1. La determinazione dello stato di HER2 deve
essere effettuata sempre al momento della
diagnosi sul tumore primario.
2. In presenza di progressione di malattia la
determinazione va effettuata sulla lesione
metastatica, se disponibile, o sul tumore
primario (se non precedentemente effettuata
secondo gli attuali standard).
2011 HER2 Diagnostica AP
Quando farlo?
1. La determinazione dello stato di HER2 deve
essere effettuata sempre al momento della
diagnosi sul tumore primario.
2. In presenza di progressione di malattia la
determinazione va effettuata sulla lesione
metastatica, se disponibile, o sul tumore
primario (se non precedentemente effettuata
secondo gli attuali standard).
Lesione secondaria non sempre = alla lesione
primaria (eterogeneità tumorale)
Annals of Oncology 21 (Supplement 7): vii112–vii119, 2010
2 CLONI DISTINTI
1 CLONE 100% score 3+
1 CLONE 100% SCORE 0/1+
=
1 CLONE
2% SCORE 3+
30% SCORE 2+
68% SCORE 0
SELEZIONE DI CLONI RESISTENTI??
2011 HER2 Diagnostica AP
Quando farlo?
1. La determinazione dello stato di HER2 deve
essere effettuata sempre al momento della
diagnosi sul tumore primario.
2. In presenza di progressione di malattia la
determinazione va effettuata sulla lesione
metastatica, se disponibile, o sul tumore
primario (se non precedentemente effettuata
secondo gli attuali standard).
3. Occorre rivalutare lo stato di HER2 su malattia
residua post-chemioterapia neoadiuvante e
trastuzumab?
2011 HER2 Diagnostica AP
Quando farlo?
Loss of HER2 Amplification Following Trastuzumab
Based Neoadjuvant Systemic Therapy and Survival
Outcomes
Clin Cancer Res 2009;15(23)
32.0% posttreatment tumors were found to be HER2
negative by fluorescence in situ hybridization
2011 HER2 Diagnostica AP
Quando farlo?
Clin Cancer Res 2009;15(23)
1. If conversion of HER2 status reflects
response to therapy, such that only HER2
negative clones remain, the need to complete
1 year of trastuzumab in the adjuvant setting
comes into question.
2. Furthermore, all patients with early-stage
HER2-positive disease who relapse
after adjuvant or neoadjuvant trastuzumab
therapy should have biopsies of their recurrent
disease and reassessment of their marker
status, as we have shown that a change in
marker status correlates with outcome in
patients who develop metastatic disease
2011 HER2 Diagnostica AP
Come farlo?
L’immunoistochimica è la metodica più comunemente
utilizzata come valutazione di primo livello.
Le metodiche ISH vengono prevalentemente utilizzate
per l’accertamento dell’eleggibilità alla terapia con
trastuzumab nei casi con immunoreattività 2+, e/o
quando richiesto dal curante nell’appropriato contesto
clinico.
•Necessità di controllo nelle fasi pre-analitiche
(fissazione etc).
•L’immunoistochimica è AUTOMATIZZATA, è
controllabile, è ripetibile.
•Le metodiche ISH alcune automatizzate (SISH).
2011 HER2 Diagnostica AP
Come interpretarlo?
2011 HER2 Diagnostica AP
Come interpretarlo?
Effects of the change in cutoff values for human epidermal
growth factor receptor 2 status by immunohistochemistry
and fluorescence in situ hybridization: a study comparing
conventional brightfield microscopy, image analysis-assisted
microscopy, and interobserver variation.
Arch Pathol Lab Med. 2011 Aug;135(8):1010-6.
• 150 patients with breast cancer scored by 7 pathologists using
conventional microscopy, with a cutoff of both 10% and 30%
IHC-stained cells, and using automated microscopy with
image analysis.
• The IHC results were compared individually and to HER2
status as determined by FISH, using both the approved cutoff
of 2.0 and the recently introduced cutoff of 2.2.
Effects of the change in cutoff values for human epidermal
growth factor receptor 2 status by immunohistochemistry
and fluorescence in situ hybridization: a study comparing
conventional brightfield microscopy, image analysis-assisted
microscopy, and interobserver variation.
Arch Pathol Lab Med. 2011 Aug;135(8):1010-6.
High concordance was found in IHC scoring among the 7 pathologists.
The 30% cutoff led to slightly fewer positive IHC observations.
Introduction of a FISH equivocal zone affected 4% of the FISH scores.
If cutoff for FISH is kept at 2.0, no difference in patient selection is found between
the 10% and the 30% IHC cutoff.
Among the 150 breast cancer samples, the new 30% IHC and 2.2 FISH cutoff
levels resulted in one case without a firm diagnosis because both IHC and FISH
were equivocal.
Automated microscopy and image analysis-assisted IHC led to significantly
better interobserver agreement among the 7 pathologists, with an increase in
mean scoring time of only about 30 seconds per slide.
2011 HER2 Diagnostica AP
Come interpretarlo?
IHC
L’uso sporadico delle procedure e/o la valutazione
di un limitato numero di casi/ anno deve indurre a
considerare la centralizzazione dei test presso un
laboratorio di riferimento.
E’ opportuna l’adesione a programmi di VEQ per
IIC su base regionale, nazionale o sovra-nazionale.
ISH
La limitata esperienza nelle procedure e/o la
valutazione di un esiguo numero di casi/anno
deve indurre a considerare la centralizzazione dei
test presso un laboratorio di riferimento.
Controllo dei controllori
CQ FISH NAZIONALE
Concordanza
casi dal 19 al 26 2009/2010
casi dal 19 al 26 2009/2010
• 2009-2010
25%
concordi
concordi
38%
discordi
discordi
non valutabili
non valutabili
38%
casi dal 27A al 34A 2010/2011
• 2010-2011
dati dal 27B al 34B 2010/2011
25%
38%
concordi
A
concordi
discordi
75%
discordi
63%
B
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Prospettive future?
Validazione di sistemi
Pre-analisi:
• sistema sottovuoto
• formalina a 4°C
Plos one 2011
2011 HER2 Diagnostica AP
Prospettive future?
Sistemi automatizzati di analisi di immagine
• per immunoistochimica
• per ISH