DETERMINAZIONE DELLO STATO DI HER2 E
VALIDAZIONE METODICA SISH IN CARCINOMI
MAMMARI, OVARICI, PROSTATICI, POLMONARI
E COLICI: STUDIO PRELIMINARE
MT Ramieri, R Murari, E Pica, PL Alò
UOC Anatomia Patologica
ASL Frosinone
Introduzione
Gli studi sullo stato di HER2 nei carcinomi non mammari
riportano dati molto variabili e ancora di scarso rilievo clinico,
anche data la variabilità e la mancanza di standardizzazione
delle metodiche utilizzate
• Il nostro studio ha valutato lo stato di HER2 tramite metodica
SISH su casi di neoplasie mammarie, ovariche, polmonari,
prostatiche e coliche, con due finalità:
– a) validazione della metodica nella UOC di Anatomia Patologica
di Frosinone
– b) valutazione diagnostica della sovraespressione di HER2 in
neoplasie non mammarie, in prospettiva di studi prognostici e
terapeutici
Materiali e metodi
• 50 casi di carcinomi mammari, ovarici, polmonari, prostatici
e colici, 10 consecutivi per ciascun organo; dai campioni,
tutti fissati in formalina per più di 6 ore e meno di 48 ed
inclusi in paraffina, sono state allestite sezioni consecutive
per lo studio morfologico, immunoistochimico (IHC) e per
la SISH.
• Per lo studio IHC è stato utilizzato l’ anticorpo HER2 clone
4B5 (Ventana) e per lo studio SISH il KitINFORM
HER2/Neu (Ventana).
Criteri di valutazione
e algoritmi
• IHC Sono stati applicati i seguenti criteri: negativo per
score 0 e 1+: assenza o debole, incompleta, colorazione
di membrana; equivoco, score 2+: colorazione di
membrana completa, debole o non uniforme, in almeno
il 10% delle cellule neoplastiche; positivo, score 3+:
uniforme ed intensa colorazione di membrana in più del
30% delle cellule neoplastiche.
• SISH Sono stati applicati i seguenti criteri: non
amplificato con ratio HER2/Chr17 < a 1.8; equivoco con
ratio HER2/Chr17 compresa tra 1.8 e 2.2; amplificato
con ratio superiore a 2.2.
Mammella
Polmone
EE
EE
IHC: Score 0
IHC: Score 0
Mammella
Polmone
SISH HER2: non amplificato
SISH HER2: non amplificato
SISH Chr 17
SISH Chr 17
Prostata
Colon
EE
EE
IHC: Score 1
IHC: Score 1
Prostata
Colon
SISH HER2: non amplificato
SISH HER2: non amplificato
SISH Chr 17
SISH Chr 17
Colon
Polmone
EE
EE
IHC: Score 2
IHC: Score 2
Colon
Polmone
SISH HER2: non amplificato
SISH HER2: non amplificato
SISH Chr 17
SISH Chr 17
Mammella
Ovaio
EE
EE
IHC: Score 3
IHC: Score 3
Mammella
Ovaio
SISH HER2: amplificato
SISH HER2: amplificato
SISH Chr 17
SISH Chr 17
Risultati
SISH
amplificato
IHC
equivoco
non amplificato
m
p
o
pr
c
m
p
o
pr
c
m
p
o
pr
c
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
2
6
5
6
5
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
2
2
4
2
1
2
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
2
1
0
0
2
3
4
0
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
m: mammella; p: polmone; o: ovaio; pr: prostata; c: colon
Conclusioni
Nel nostro studio è stata rilevata una concordanza tra
immunoistochimica e SISH pari al 100% nei casi con
score 3+ e al 97,14% nei casi con score 0 e 1+
La SISH potrebbe sostituire, vista la facilità di esecuzione e
la concordanza dei risultati, la FISH e la CISH
E’ inoltre auspicabile che la standardizzazione delle
metodiche su ampie casistiche possa consentire di
conoscere il reale impatto prognostico e predittivo di
HER2 anche in neoplasia non mammarie
Bibliografia
Dietel M et al. Comparison of automated silver enhanced in situ hybridisation
(SISH) and fluorescence ISH (FISH) for the validation of HER2 gene status in
breast carcinoma according to the guidelines of the American Society of
Clinical Oncology and the College of American Pathologists. Virchows Arch
2007;451(1):19-25
Ménard S et al. HER2 overexpression in various tumor types, focussing on its
relationship to the development of invasive breast cancer. Ann Oncol 2001;
12(Suppl.1): S15-S19
Wolff AC et al. American Society of Clinical Oncology/College of American
Pathologists guideline recommendations for human epidermal growth factor
receptor 2 testing in breast cancer. J Clin Oncol 2007;25(1):118-45