DETERMINAZIONE DELLO STATO DI HER-2
NEL CARCINOMA MAMMARIO. TECNICHE A
CONFRONTO.
RISULTATI PRELIMINARI.
D Reghellin, V Rucco, MG Zorzi, A Brighenti, M
Lestani
U.O.C. di Anatomia Patologica
ULSS 5 “Ovest-Vicentino”
Introduzione
• la determinazione dello stato di HER2 nel
carcinoma della mammella ha un significato sia
prognostico che predittivo di risposta alla terapia
con Trastuzumab
• requisito indispensabile per la somministrazione
di tale farmaco è la dimostrazione di
un'iperespressione della proteina HER2 e/o di
un’amplificazione del gene HER2
• lo stato di HER2 può essere attualmente
indagato studiando:
a) la presenza di iperespressione della
proteina HER2 con:
ICH (immunoistochimica)
b) la presenza di un’amplificazione del gene
HER2 con:
FISH (Ibridazione In Situ Fluorescente)
CISH (Ibridazione In Situ Cromogenica)
SISH (Ibridazione In Situ Argentica)
Metodi
• descriviamo i risultati ottenuti paragonando su
casistica di routine i risultati ottenuti con ICH,
SISH e FISH
• sono stati selezionati 30 casi di carcinoma
mammario infiltrante (27 carcinomi duttali, 2
carcinomi mucinosi e 1 carcinoma midollare),
pervenuti fissati in formalina tamponata al 10%,
inclusi in paraffina
• tutti i casi sono stati analizzati in sistema
robotizzato secondo protocollo ICH standard
(RE; RP; Ki67; ERB2) (PATHWAY®, Ventana)
• la valutazione dell’amplificazione del gene HER2
è stata eseguita utilizzando la metodica SISH
(INFORM®, Ventana)
• in 10/30 casi (33%) è stata eseguita anche
analisi FISH
Valutazione colorazione ICH
• I casi con score ICH 3+ sono stati considerati
positivi, i casi con score 0 e 1+ negativi ed i casi
con score 2+ come dubbi (sec. ASCO 2007)
Valutazione SISH
• la metodica SISH è stata valutata con metodo
semiquantitativo
• in presenza di isoforme del Chr17 l’analisi è
stata ripetuta scegliendo un diverso campo o
prelievo
• nei casi con ratio HER2/Cr17 compresa tra 1.4 e
4, si è proceduto ad una seconda valutazione
con metodo quantitativo (sec. Ventana 2007)
HER2
Chr17
SISH per gene HER2 positiva con clusters di segnali nei nuclei delle cellule
neoplastiche e SISH per cromosoma 17 (Chr17) con uno, due o tre segnali per
ogni nucleo di cellula neoplastica (40x)
Risultati
SISH + SISH -
SISH
SISH
Totale
incerta non valutabile
ICH pos (3+)
4
1
0
3
8
ICH neg (0, 1+)
0
4
0
0
4
ICH incerta (2+)
2
10
1
4
17
ICH non
valutabile
0
1
0
0
1
Totale
6
16
1
7
30
Commenti alla tabella:
Dei casi con ICH 3+ e SISH valutabile (n=5):
• 4/5 (80%) sono positivi con SISH
• 1/5 (20%) è negativo con SISH
Dei casi con ICH 2+ e SISH valutabile (n=13):
• 2/13 (15%) sono positivi con SISH
• 10/13 (77%) sono negativi con SISH
• 1/13 (8%) è incerto con SISH
Tutti i casi con ICH negativa (n=4) si confermano
negativi con SISH
SISH vs FISH:
In 10 casi è disponibile il dato FISH:
• tra i casi positivi alla FISH (n=6), la SISH è
valutabile in 3: 2/3 sono SISH-positivi ed
1/3 SISH-negativi
• tutti i casi negativi alla FISH (n=4) sono
risultati negativi anche alla SISH
Conclusioni
• I dati preliminari confermano la buona
concordanza tra ICH e SISH (singolo caso
discordante)
• Il 15% dei casi con ICH 2+ (incerta) ha una
SISH positiva, confermando la necessità di un
approfondimento dello studio dello stato di
HER2 con metodiche di ibridazione in situ
• La SISH si propone come una valida metodica di
analisi dello stato del gene HER2
Bibliografia:
• Wolff AC et al. American Society of Clinical
Oncology/College of American
Pathologists guidelines recommendations
for Human Epidermal Growth Factor
Receptor 2 testing in breast cancer. J Clin
Oncol 2007; 25(1): 118-145
• Grogan TM et al. Interpretative guide for
Ventana INFORM® HER2 DNA Probe
staining of breast carcinoma. Ventana
2007