COMPOSTI BIOATTIVI DEL SIERO E DELLA SCOTTA DA LATTE OVINO Prof. Luigi Bonizzi Università degli Studi di Milano LATTE E DERIVATI IL LATTE È DOTATO DI PROPRIETÀ ‘EXTRANUTRIZIONALI’ ‘SALUTISTICHE’ PER IL CONTENUTO IN “MOLECOLE BIOATTIVE’ E (a) PROTEICHE (b) LIPIDICHE L A T T E “MOLECOLE BIOATTIVE” (c) GLUCIDICHE (d) VITAMINICHE 2 LATTE E DERIVATI MOLECOLE BIATTIVE DI NATURA ‘PROTEICA’ AZIONE: LATTOFERRINA PEPTIDI CASEINICI PEPTIDI DEL SIERO ¾ IMMUNO-STIMOLANTE ¾ ANTINFIAMMATORIA ¾ ANTIPERTENSIVA E LIMITANTE LO STATO DI STRESS AMMINOACIDI (ARGININA NEI FORMAGGI) 3 LATTE E DERIVATI MOLECOLE BIOATTIVE DI NATURA ‘LIPIDICA’ FUNZIONE: FOSFOLIPIDI SFINGOMIELINA ¾ ANTIOSSIDANTE [GRAZIE ALLA CAPACITA’ DI CHELARE (SEQUESTRARE) IL FERRO] ¾ ANTICOLESTEROLEMICA FAVORENDO LA FORMAZIONE DI LIPOPROTEINE AD ALTA DENSITÀ (HDL, HIGH DENSITY LIPOPROTEINS) “COLESTEROLO BUONO”’ ¾ ANTICANCEROGENA 4 LATTE E DERIVATI MOLECOLE BIOATTIVE DI NATURA ‘OLIGOSACCARIDICA’ AZIONE: ¾ PRO-IMMUNITARIA ¾ ANTIVIRALE ¾ ANTINFIAMMATORIA CONTENUTO IN ANTIOSSIDANTI ‘OLIGOSACCARIDICI’ : < LATTE OVINO LATTE BOVINO 5 LATTE E DERIVATI MOLECOLE BIOATTIVE DI NATURA ‘VITAMINICA’ FUNZIONE : VITAMINA A (ESCLUSIVA DEL LATTE BOVINO) ALFA -TOCOFEROLO ¾ ANTICANCEROGENA ¾ ANTIOSSIDANTE NEI CONFRONTI DEL COLESTEROLO F O R M A G G I A PA S TA C R U D A > F O R M A G G I A PA S TA C O T TA CONTENUTO IN ALFA - TOCOFEROLO TALE EVIDENZA POTREBBE CONTRIBUIRE ALLA VALORIZZAZIONE DI QUEI PRODOTTI ‘TIPICI’ E/O ‘TRADIZIONALI’ OTTENUTI CON DIAGRAMMI DI FLUSSO CHE NON PREVEDONO IL RISCALDAMENTO DELLA CAGLIATA, QUALE A ESEMPIO, IL FORMAGGIO PECORINO ‘’ 6 LATTE E DERIVATI CONTENUTO IN ALFA-TOCOFEROLO < CAPRA AL PASCOLO CAPRA ALLEVATA CON STABULAZIONE ‘FISSA’ 7 Ludwig Feuerbach: “der Mensch ist was er isst” SIAMO CIÒ CHE MANGIAMO 8 PEPTIDI BIOATTIVI BIOLOGICAMENTE ‘INATTIVE’ QUANDO PRESENTI NELLA SEQUENZA DELLA PROTEINA ‘NATIVA’ DA CUI DERIVANO ASSUMONO FUNZIONE ‘EXTRANUTRIZIONALE’ E ‘SALUTISTICA’ QUANDO VENGONO LIBERATI DALLA PROTEINA ‘NATIVA’ DA CUI DERIVANO 9 “SIERO VERGINE” Composizione variabile a seconda del tipo di lavorazione da cui residua SIERO VERGINE, FRESCO: VALORI MEDI S ostanze presenti S o lidi sospesi totali (% ) L attosio (% ) P rotein e (% ) G rassi (% ) C eneri (% ) V itam ine m g/l pH V alore M edio 6.5 4.4 0.75 0.06 0.5 12 5.8 SCOTTA È il liquido che residua dalla produzione della Ricotta. Composizione variabile a seconda del tipo di tecnologia impiegato. Basso contenuto in proteine e alta concentrazione in sali ed acidi organici pH 5.6 - 6.2 Grasso 0.15 – 0.30 Proteina totale 0.10 – 0.15 Lattosio 4.0 – 4.6 Sali 0.9 – 1.1 Acidi organici 0.20 – 0.25 Principali bioattivita’ evidenziate per peptidi isolati da proteine del latte • Oppioide (agonista ed antagonista) • Citomodulatoria • Anti-trombotica • Anti-ipertensiva • Immuno-stimolante • Antimicrobica • Mineral carrier 12 Caratteristiche strutturali: nella maggior parte dei casi simili a Peptidi “oppioidi” endorfine (sostanze regolatrici endogene), per la presenza di tyr (Y) all’estremità N-terminale e di tyr o phe (F) in 3° o 4° posizione Agonisti (es.: casomorfine e lattorfine) Antagonisti (es.: casoxine) Legame con recettori cellulari (μ, δ e Κ) 9 effetti analgesici 9 stimolazione secrezione insulina e somatostatina 9 prolungamento del tempo di transito gastro-intestinale 9comportamento 9 blocco della risposta cellulare ad una sostanza opioido-agonista Applicazioni: alimentazione del bestiame per aumentarne l’efficienza produttiva (grazie all’influenza 13 positiva sull’assorbimento dei nutritivi) Peptidi citomodulatori Influenza sul metabolismo cellulare (replicazione) Cellula in presenza del peptide 9Inibizione proliferazione 9Induzione della apoptosi 9promozione della divisione cellulare 9 casomorfina 7 e CPP -CN (1-25) inibizione proliferazione cellule leucemiche 9 caseine + batteri lattici dello yogurt influenza su cellule Caco-2 9 LF bovina (79-93) e -CN (177-183) stimolano la sintesi del DNA (cellule di ratto) 14 Peptidi immunostimolanti 9Casochinina 10 (f 193-209 della -CN) e -Casomorfina 7 a basse concentrazioni ad alte concentrazioni soppressione della proliferazione linfocitaria incremento della proliferazione linfocitaria 9S1-CN (194-199), -CN (63-68), -CN (191-193) fagocitosi + effetto protettivo contro Klebsiella pneumoniae 9CPP stimolano la produzione di IgG da parte delle cellule della milza di ratto 9Lattoferricina f(17-41) Attivazione leucociti neutrofili (rilascio interleuchina-8) 15 Peptidi con capacita’ legante gli ioni (“mineral carrier”) Grado di fosforilazione e capacità di legare ioni: relazione diretta α s2 > α s1 > β > κ Nella maggior parte dei CPP cluster di fosfoserina Ser-ser-ser-glu-glu Possibili applicazioni 9 stati di carenza nutrizionale (Fe2+, Zn2+ e Mg2+) 9 rachitismo (aumento biodisponibilità Ca2+) 9 prevenzione della demineralizzazione smalto dentale 16 Peptidi antimicrobici derivati da proteine del latte 9largo spettro d’azione 9vantaggi rispetto agli antibiotici 9generalmente alterano la permeabilità della membrana cellulare 9importante componente dei sistemi innati di difesa 9inattivazione patogeni 9modulazione risposte infiammatorie ¾ lattoferricine (lattoferrina) ¾ casocidina f(150-188) as2-CN ¾ isracidina f(1-23) as1-CN ¾ f(184-210) b-CN umana ¾ kappacina f(106-169) k-CN ¾ f ( 6 3 - 11 7 ) k - c a s e i n 17 Peptidi antitrombotici trombina Coagulazione sangue I- fibrinogeno fibrina (coagulo insolubile) II- agglomerazione ed adesione delle piastrine alle maglie di fibrina 9Interazione tra le sequenze 400-411 (catena del fibrinogeno) e 572-575 ed i recettori piastrinici 9Stati patologici: formazione di “trombi” (coaguli) frequente nell’arteriosclerosi farmaci anticoagulanti 9Affinità strutturale e funzionale tra fibrinogeno (400-411) e la CASOPLATELINA (k-CN f 106-116) 9 Casoplatelina recettore piastrinico inibizione dell’aggregazione piastrinica 9Altri peptidi: CN ovina (112-116) e LF ovina (39-42) 18 Peptidi ACE-inibitori nei formaggi * ACE: ENZIMA CONVERTITORE DELL'ANGIOTENSINA 1 IN ANGIOTENSINA 2 E, PERTANTO, RESPONSABILE DI INNALZAMENTO DELLA PRESSIONE ARTERIOSA 9Starter e tempo di maturazione (indice di ACE inibizione di formaggi a media maturazione > di quello a lunga maturazione) 9Peptide derivato dall’ as1-CN isolato da formaggi stagionati di 6 mesi, ma non dopo 15 mesi di maturazione 9Peptidi a basso P.M. (es.: b-CN f58-72) identificati in diversi formaggi , compresi alcuni formaggi con tempo di maturazione breve e medio 19 A differenza dei peptidi bioattivi endogeni, molti peptidi derivati da proteine del latte presentano proprietà multi-funzionali Determinate regioni della struttura primaria delle caseine contengono sequenze peptidiche sovrapposte che esercitano diversi effetti biologici Tali regioni, considerate “strategiche”, sono parzialmente protette da un’ulteriore degradazione proteolitica Sebbene la liberazione di peptidi bioattivi da proteine alimentari sia stata studiata a fondo negli ultimi decenni, soltanto pochi studi hanno considerato le potenzialità dei batteri lattici in tal senso 20 I BATTERI LATTICI, O ENZIMI DA ESSI DERIVATI, COME MEZZO PER PRODURRE PEPTIDI BIOATTIVI? I risultati sono controversi e non è possibile generalizzare, poiché occorre considerare vari fattori: ¾ Materia prima ¾ Tecnologia ¾ Tipo di prodotto ¾ Starter impiegato (variabilità inter- ed intra-specifica del corredo enzimatico) 21 LATTE E DERIVATI PEPTIDI BIOATTIVI PRINCIPALI PEPTIDI CON FUNZIONE PEPTIDE LATTOPROTEINA 'PRECURSORE' ALFA-CASOCHININA BETA-CASOCHININA ALFA-CASOMORFINA BETA-CASOMORFINA ALFA-LATTORFINA BETA-LATTORFINA CASOPLATELINE ALFA S1-CASEINA BETA-CASEINA ALFA S1-CASEINA BETA-CASEINA ALFA-LATTOALBUMINA BETA -LATTOALBUMINA KAPPA-CASEINA CASOSSINE KAPPA-CASEINA CASEINOFOSFOPEPTIDI ALFA S1- CASEINA 'EXTRANUTRIZIONALE‘ ATTIVITA' BIOLOGICA INIBITRICE ACE ( IPOTENSIVA) AGONISTA OPPIOIDI (ANALGESICA E MODULATRICE DEL COMPORTAMENTO) ANTITROMBOTICA ANTAGONISTA OPPIOIDI (AZIONE PARTICOLARE SULLA MUSCOLATURA LISCIA) FAVORENTE ASSORBIMENTO CALCIO BETA -CASEINA LATTOFERRICINA LATTOFERRINA PEPTIDI IMMUNOMODULANTI ALFA S1- CASEINA ANTIMICROBICA ATTIVATRICE SISTEMA IMMUNITARIO BETA -CASEINA . 22 Grazie per l’attenzione….. 23