Colorazione di Gram
1a. Da brodocoltura: 1 o 2 ansate, strisciate su vetrino pulito.
1b. Da piastra: Deporre una goccia di acqua, e stemperarvi un ago caricato
sulla colonia, fino a formare un sottile velo
2. Asciugare all’aria; fissare al calore; far raffreddare
3. Coprire con Cristal Violetto per un minuto. Sciacquare con acqua.
4. Coprire con la soluzione iodo-iodurata per 1 minuto. Sciacquare con
acqua
5. Decolorare per 3 secondi con l’alcool, e sciacquare immediatamente con
acqua
6. Per il contrasto, coprire con Safranina per 30 secondi; sciacquare con
acqua.
7. Asciugare con carta bibula..
Schema dei passi
nella colorazione
di Gram
Fasi nella colorazione di Gram
Gram Positive
Gram Negative
GRAM POSITIVE
Lipoteichoic acid
Peptidoglycan-teichoic acid
Cytoplasmic membrane
Cytoplasm
GRAM NEGATIVE
Porin
Outer Membrane
Braun lipoprotein
Inner (cytoplasmic) membrane
Cytoplasm
Lipopolysaccharide
Confronto
delle
superfici
GRAM STAIN