Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © Assemblaggio del ribosoma I costituenti macromolecolari di E.coli Componente Parete Membrana DNA % massa secca 10 10 1.5 molecole / cell 1 2 1 tipi copie di diversi ciascun tipo 1 2 1 1 1 1 mRNA tRNA rRNA Prot. ribosomali 1 3 16 9 1,500 200,000 38,000 106 600 60 2 52 2-3 >3000 20,000 20,000 Prot. solubili Piccole molecole 46 3 2 x 106 8 x 106 1800 800 >1000 num. ribosomi / cellula E.coli Cellule animali: Cellula somatica Oocita di Xenopus 20,000 106 1012 I poliribosomi Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 La traduzione (sintesi proteica) Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 I tre stadi della traduzione: - inizio - allungamento - terminazione Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Inizio della traduzione nei procarioti Fattori di inzio in E.coli: •IF1 •IF2 •IF3 (IF = Initiation Factor) Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 formile Met A C C A C A G C C G G C G C S G CC G G C C U A A G A CC GAC G A G G U C G G U T C C G C U C Y G GG D A U A U A GG C G G C G C G C C A U A CAU Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Sequenza di Shine-Dalgarno Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Traduzione degli mRNA policistronici nei procarioti 5' 5' Inizio della traduzione negli eucarioti Initiation Factors prokaryotes Activity eukaryotes IF3 eIF-1 Fidelity of AUG codon recognition IF1 eIF-1A Facilitate Met-tRNAiMet binding to small subunit eIF-2 Ternary complex formation eIF-2B (GEF) GTP/GDP exchange during eIF-2 recycling eIF-3 (12 subunits) Ribosome antiassociation, binding to 40S eIF-4F (4E, 4A, 4G) mRNA binding to 40S, RNA helicase activity IF2 eIF-4A ATPase-dependent RNA helicase eIF-4E 5' cap recognition eIF-4G Scaffold for of eIF-4E and -4A eIF-4B Stimulates helicase, binds with eIF-4F eIF-4H Similar to eIF4B eIF-5 Release of eIF-2 and eIF-3, GTPase eIF5B Subunit joining eIF-6 Ribosome subunit antiassociation