Gli allergeni nelle mele
Espressione della famiglia multigenica Mal d 1
Valentina Cova – Pietro Delfino
Thomas Letschka
Laboratorio di Biologia Molecolare
17 Dicembre 2015
L’allergia alle mele
La mela può essere usata come modello di
studio delle allergie ai frutti:
le mele sono coltivate in tutto il
mondo nei climi temperati e sono
conservabili per lungo tempo
molto consigliate per una dieta
sana e bilanciata (basso indice
glicemico)
la sequenza del genoma del melo è
stata decodificata recentemente
(Velasco et al., 2010)
alcune informazioni sugli allergeni
del melo sono già disponibili
2
Bet v 1 è
l’allergene
maggiore simile
del polline
in betulla
Mal d 1 è
l’allergene
maggiore
della mela
Allergia incrociata ad altra frutta della famiglia delle Rosaceae, verdure e frutta secca
affligge principalmente le popolazioni di Nord e Centro Europa (4%)
+
+
In Svezia fino al 90% di pazienti allergici al polline di betulla sono
allergici
mele!
> evitare
> DIETAalle
SBILANCIATA
!
sindrome orale allergica (OAS): sintomi prevalentemente leggeri (dolore
o pizzicore di lingua e gola, problemi digestivi, prurito)
allergeni Bet v 1-like in tutti i frutti delle Rosaceae
3
Studio delle famiglie di allergeni di melo per cercare di
capire la possibile implicazione dei singoli geni
nell’allergenicità
(allergene)
Approccio genomico
Studio della
composizione e
organizzazione della
famiglia genica Mal d 1
(31)
UNIBO
(Pagliarani et al., 2013)
Approccio trascrizionale
Studio delle differenze
nell’espressione genica dei singoli
membri della famiglia Mal d 1
family in diverse cvs
Laimburg
Approccio proteomico
Quantificazione
della quantità
totale di proteine
Mal d 1
UNIPD
Diverse varietà di melo hanno un diverso grado di
allergenicità
Nella letteratura scientifica Golden delicious risulta essere una
delle mele più allergeniche
mentre Santana è commercializzata come mela
ipoallergenica dal 2009
Lista delle varietà analizzate
Varietà a polpa rossa
(7)
Vecchie varietà
(7)
Varietà resistenti a ticchiolatura (Vf+)
(6)
Varietà commerciali di riferimento
(5)
6
Mele a polpa rossa:
rossa
mai analizzate prima
per il loro grado di
allergenicità
7
Preparazione dei campioni di buccia e polpa
BUCCIA
POLPA
Estrazione RNA,
quantificazione,
sintesi cDNA
8
Analisi di laboratorio e raccolta dati
Grande quantità di
dati raccolti
Analisi dei dati
qPCR realtime
CFX384 Biorad
9
Risultati
10
Risultati
11
Contributo dei 31 geni Mal d 1 alla quantità totale di mRNA
(i.e. Golden Delicious Buccia+polpa)
Gli mRNA dei
31 geni sono
presenti in
quantità molto
diverse nella
stessa varietà
Mal d 1.02 è il più espresso:
75% del totale in Golden, 92%
in Pink Lady
Storage effect
Effetto della conservazione
35000,0
30000,0
25000,0
Flesh
20000,0
A.U.
Peel
15000,0
10000,0
5000,0
0,0
Golden D harvest time
Golden D 11d CS+3d SL
Santana harvest time
Santana 11d CS+3d SL
Golden Delicious e Santana
Mele appena raccolte vs. conservate (11 g 2ºC + 3 g 20ºC)
Per eventuali approfondimenti:
[email protected]
Ringraziamenti:
Walter Guerra, Pietro Delfino, Giulia Eccher,
Alessandro Botton, Mara Vegro, Giulia Pagliarani e
Thomas Letschka