ISTRUZIONE OPERATIVA
CAMPIONAMENTO DEGLI
EMOCOMPONENTI PER I
CONTROLLI DI QUALITA’
Dipartimento di Patologia e
Medicina di Laboratorio
U.O. di Immunoematologia e
Medicina Trasfusionale
Codice I.O11L26A
REDAZIONE, RESPONSABILE I.O., VERIFICA, APPROVAZIONE
REDAZIONE
Claudia Ferocino TSLB;
VERIFICA
Dott.ssa Francesca Tanzi Responsabile Accreditamento
Servizio Immunoematologia e Medicina Trasfusionale
APPROVAZIONE
Dott.ssa Giuseppina Portararo Dirigente Biologo
EMISSIONE
Dott.ssa Francesca Tanzi Responsabile Accreditamento
Servizio Immunoematologia e Medicina Trasfusionale
STATO DELLE REVISIONI
REV. N.
SEZIONI REVISIONATE
0
Prima stesura
MOTIVAZIONE DELLA
REVISIONE
DATA
31/01/2013
ELENCO ALLEGATI
ALL. N.
Codice
DESCRIZIONE ALLEGATO
REV. N.
Data 31/01/2013
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SOMMARIO
REDAZIONE, RESPONSABILE I.O., VERIFICA, APPROVAZIONE ......................................... 1
ISTRUZIONE OPERATIVA ............................................................................................................. 1
CAMPIONAMENTO EMAZIE-PLASMA-PIASTRINE PER L'ESECUZIONE DEI CQ .............. 1
1. SCOPO/OBIETTIVO ....................................................................................................................... 3
2. CAMPO DI APPLICAZIONE .......................................................................................................... 3
3. LUOGO DI APPLICAZIONE ......................................................................................................... 3
4. RIFERIMENTI NORMATIVI E DOCUMENTALI ........................................................................... 3
5. ABBREVIAZIONI, DEFINIZIONI E TERMINOLOGIA .................................................................. 4
6. MODALITA' OPERATIVE .............................................................................................................. 5
6.1 EMAZIE CONCENTRATE CON RIMOZIONE DI BUFFY-COAT IN SAG-MANNITOLO ........ 5
6.2 CONCENTRATI PIASTRINICI DA POOL DI BUFFY-COAT E DA AFERESI: ......................... 5
6.2.1 Concentrati piastrinici da Pool di b.c. …...................................................................................5
6.2.2 Concentrati piastrinici da Aferesi …...........................................................................................6
6.3 DETERMINAZIONE DEL FVIIIC NEL PLASMA FRESCO CONGELATO ….......................7
6.4 CONTROLLI DI STERILITA' ....................................................................................................... 7
Data 31/01/2013
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1. SCOPO/OBIETTIVO
Lo scopo del campionamento è di uniformare e pianificare le modalità operative per l'esecuzione
dei controlli di qualità
2. CAMPO DI APPLICAZIONE
Il campionamento è applicabile agli emocomponenti che devono essere sottoposti al controllo di
qualita’
3. LUOGO DI APPLICAZIONE
OSPEDALE /DIPARTIMENTO/U.O./SERVIZIO
AZIENDA OSPEDALIERO-UNIVERSITARIA DI PARMA
PATOLOGIA E MEDICINA DI LABORATORIO
IMMUNOEMATOLOGIA E MEDICINA TRASFUSIONALE
LAVORAZIONE EMOCOMPONENTI (stanza 007)
4. RIFERIMENTI NORMATIVI E DOCUMENTALI
Autore
D.M
D.M
R(95)15
European Directorate for
the quality of medicines
and Healt Care of the
council of Europe
SIMTI
SIMTI
Titolo
Protocolli per l’accertamento della idoneità del donatore di sangue e di
emocomponenti
Caratteristiche e modalità per la donazione del sangue e di
emocomponenti
Preparazione, uso e garanzia di qualità degli emocomponenti
Guide to the preparation, use and qualità assurance of blood
components. R(95)15
Standard di medicina trasfusionale 2^ Ed.
Raccomandazioni SIMTI sul corretto utilizzo degli emocomponenti e
dei plasmaderivati
Data
3 marzo 2005
3 marzo 2005
12/10/1995
2010
Giugno 2010
Settembre 2008
Data 31/01/2013
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5. ABBREVIAZIONI, DEFINIZIONI E TERMINOLOGIA
TSLB
CQ
BC
K2 EDTA
Ht
Hb
ABBREVIAZIONI
Tecnico Sanitario di Laboratorio Biomedico
Controllo Qualità
Buffy Coat
DEFINIZIONI E TERMINOLOGIA
Dipotassium Ethylenediaminetetracetato
Ematocrito
Emoglobina
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6 MODALITA' OPERATIVE
6.1 EMAZIE CONCENTRATE CON RIMOZIONE DI BUFFY-COAT IN SAGMANNITOLO
Si applica a concentrati eritrocitari privi di buffy coat in Sag-M a scadenza.
 Connettere sterilmente una sacca transfer da 300 ml con la sacca di eritrociti da campionare
mediante apparecchio TSCD ;
 trasferire una piccola aliquota e saldare nel punto di connessione;
il campionamento va effettuato dalla sacca transfer, previo stripping ripetuto del tubo utilizzato per
il prelievo in modo da miscelarne il contenuto ;
 tagliare con le forbici l’estremita’ ed eliminare la prima parte del liquido fuoriuscito, quindi
 riempire adeguatamente una provetta per emocromo con K2EDTA .
La provetta va identificata indicando il numero di donazione o il numero di accesso :
 la provetta, verra’ utilizzata per l'esecuzione dell'esame emocromocitometrico,
 sulla stessa effettuare la misurazione dell’Hb extra globulare (emolisi) presente nel
sovranatante; va pertanto centrifugata a 3500 rpm per 5 min. il sovranatante separato in
un'altra provetta e ricentrifugato a 3500 rpm per 5 min., viene raccolto in una provetta dove
sara' possibile attribuire il grado di emolisi confrontandola con il comparatore di colore
fornito dalla ditta Kedrion.
La misurazione della concentrazione di emoglobina totale ed Ht viene effettuata con normale
analizzatore ematologico di laboratorio (contaglobuli).
L’emoglobina va espressa in g/L e l’ematocrito in percentuale (%).
Per le emazie filtrate e lavate eseguire la stessa procedura.
6.2 CONCENTRATI PIASTRINICI DA POOL DI BUFFY-COAT E DA AFERESI:
6.2.1 Concentrati piastrinici da Pool di B.C. :
Al termine della filtrazione:
 estrarre l'aria
mantenere il segmento collegato al filtro il più lungo possibile
 saldare
 lasciare riposare almeno 15 minuti
 pesare la sacca di pool con tara 45
 strippare (almeno 5 volte) ed eseguire la tecnica di miscelazione
 saldare il segmento contenente il concentrato piastrinico
 tagliare con le forbici l’estremita’ ed eliminare la prima parte del liquido fuoriuscito, quindi
riempire adeguatamente una provetta per emocromo
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La provetta va identificata indicando il numero del pool e utilizzata per la misurazione della
concentrazione piastrinica totale.
La misurazione della conta piastrinica viene effettuata con normale analizzatore ematologico di
laboratorio (contaglobuli).
Formula per il Calcolo del Contenuto Piastrinico:
volume in ml =
peso netto (gr)
1,03 (fattore di conversione per le piastrine)
Contenuto piastrinico
=
volume (ml) x conta piastrinica x 103µl
100000
Ottenuta la Conta Piastrinica:
 Aprire cartella Trasfusionale sul PC degli emoderivati
 Aprire “REGISTRO CONTA PLT”: foglio xls composto da due pagine (CP da POOL e CP
da AFERESI)
Inserire in CP da pool:
> N° del pool
>Volume espresso in gr (spostandosi con TAB aggiorna il volume in ml)
>Conta Piastrinica (spostandosi con il TAB aggiorna il contenuto piastrinico).
Dal computer in distribuzione o nel settore prove di compatibilità si devono preparare le etichette da
apporre sulle sacche, con indicato il n° del POOL e il contenuto piastrinico.
La domenica, le provette di campionamento, vanno poste su un ripiano dell’incubatore orizzontale,
in agitazione continua, e utilizzate il lunedì mattina per la conta.
6.2.2 Concentrati piastrinici da Aferesi :
La sacca da AFERESI è già collegata ad una sacca transfer.







Agitare la sacca
Aprire il circuito e far defluire un’aliquota di campione all’interno della sacca transfer.
Saldare il budello di connessione
Tagliare l’estremità del budello
Riempire con il concentrato PLT una provetta per emocromo
Identificare la provetta: riportando il n° dell’AFERESI
Eseguire l'esame emocromocitometrico: per ottenere la conta piastrinica.
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 Pesare la sacca di aferesi con tara 45
 Aprire cartella Trasfusionale sul pc degli emoderivati
 Aprire “REGISTRO CONTA PLT”: foglio xls composto da due pagine (CP da POOL e CP
da AFERESI)
Inserire in CP da Aferesi:
>N° dell'aferesi
>Volume espresso in gr ( spostandosi con TAB aggiorna il volume in ml)
>Conta piastrinica (spostandosi con il TAB aggiorna il contenuto piastrinico).
Dal computer in distribuzione o nel settore prove di compatibilità si devono preparare le etichette da
apporre sulle sacche, con indicato il n° dell’aferesi e il contenuto piastrinico.
Metodica per la misurazione del pH dei concentrati piastrinici
La determinazione del pH viene eseguita o sacrificando l’intera sacca se a scadenza o trasferendo
(salvaguardando la sterilità della sacca) un’aliquota di concentrato piastrinico in una sacca transfer
da 300 ml , da quest'ultima raccogliere la quantità necessaria, (~ 1 ml) per effettuare la valutazione
del Ph, mediante siringa sterile BD Preset da 3 ml.
La misurazione viene fatta a temperatura ambiente, inviando il prelievo accompagnato dalla
richiesta al Laboratorio di Diagnostica Ematochimica.
6.3 DETERMINAZIONE DEL FVIIIC NEL PLASMA FRESCO CONGELATO
All’unità di plasma fresco appena prodotta connettere sterilmente una sacca transfer da 300 ml
1. prelevare da quest'ultima 2 aliquote (~ 6 mL) in idonee provette (tappo celeste) con superficie
non attivante.
2. consegnare una provetta al Laboratorio di Coagulazione per il dosaggio del FVIIIC secondo
proprie metodiche accompagnata da scheda debitamente compilata.
3. eseguire sulla seconda provetta l'esame emocromocitometrico e poi congelare con la stessa
procedura con cui si congelano le unità di plasma; la provetta congelata viene conservata nel
medesimo congelatore ove vengono normalmente conservate le unità di plasma sia esse destinate
all'utilizzo clinico che all'industria.
Il dosaggio del FVIIIC va effettuato sulla seconda provetta dopo 6 mesi di conservazione,
consegnando la provetta congelata al Laboratorio di Coagulazione.
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6.4 CONTROLLI DI STERILITA'
Ogni sacca selezionata per i test di sterilità deve essere accompagnata da una scheda multicolor
debitamente compilata, indicando:










DATA DEL PRELIEVO
REPARTO
CODICE REPARTO
COGNOME: N° DONAZIONE
NOME DEL RICHIEDENTE
ORA DEL PRELIEVO
MOTIVAZIONE DELLA PRESCRIZIONE: CONTROLLO DI STERILITA’
MATERIALE: SANGUE o CONC. PIASTRINICO
BATTERIOLOGIA:GENERICA BATTERI e BATTERI ANAEROBI
MICOLOGIA:GENERICA MICETI
Sacca e scheda vanno messe in un contenitore idoneo di tipo rigido e inviate presso il
DIPARTIMENTO DI PATOLOGIA E MEDICINA DI LABORATORIO U.O. di
MICROBIOLOGIA.
Le sacche inviate a questo scopo vanno movimentate informaticamente nel modo seguente







MOVIMENTAZIONE
ELIMINAZIONE
Selezionare CONTROLLO QUALITA’
Bippare il barcode dell'unità
In STATO SACCA immettere il CODICE ELIMINAZIONE: 23 (CONTROLLO
QUALITA’)
cliccare su ELIMINAZIONE E CONFERMA
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