MEN 2 (AD)
MEN 2A: 95%
carcinoma midollare della tiroide
50% feocromocitoma
15-30% iperparatiroidismo (iperplasia,
adenoma)
raramente
lichen amiloidosico interscapolare
malatia di Hirschsprung
nervi corneali prominenti
MEN 2
MEN 2A - 1 : MTC + pheo + HPT
MEN 2A - 2 : MTC + pheo
MEN 2A - 3 : MTC + HPT
FMTC :
almeno 4-8 casi di MTC in famiglia
parenti affetti viventi con sorveglianza clinica
negativa per pheo e HPT
MEN 2B :
insorgenza precoce di MTC con o senza pheo
dismorfismi facciali, neuromi delle mucose (labbra)
habitus marfanoide, cifoscoliosi
ganglioneuromatosi intestinale
pectus excavatum, pes cavus
MEN2
MEN1
Carcinoma
Midollare della
Tiroide
Iperplasia
paratiroidi
feocromocitoma
Tumori endocrini
pancreatici
Adenoma ipofisi
gastrinomi duodenali
carcinoidi
ecc.
Angiomatosi retinica
Emangioblastoma SNC
Carcinoma renale (CC)
SDHB-C-D
VHL
PGLs
gene MEN2
recettore RET
mappatura nel 1986 sul cromosoma 10, quindi in 10q11.2
identificazione delle mutazioni germinali RET nel 1993
21 esoni distribuiti in una regione di circa 60 kb
1
2
3
4
5
6
7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
RET: recettore tirosino-chinasico di membrana
espresso dai derivati delle creste neurali,
paratiroidi, rene embrionale, SNC
proto-oncogene RET (10q11.2)
RTK
(receptor tyrosine kinase)
Ligandi : fattori neurotrofici della famiglia del
transforming growth factor b :
GDNF, Neurturina, Persefina, Artemina
cadherine-like
cys-rich region
trans-membrane
tyrosine kinase
domain
3 isoforms:
- 1072 (ex 19)
- 1114 (ex 20)
- 1106 (ex 21)
Co-recettori :
Proteine legate al glicosil-fosfatidil-inositolo
GFRa1, GFRa2, GFRa3, GFRa4
Mutazioni “germinali” in proto-oncogeni
• RET : neoplasie endocrine multiple tipo 2
• MET : carcinoma renale ereditario papillare
• KIT- PDGFRa : GIST (gastro-intestinal stromal tumors)
famigliari
“Key features” :
- predisposizioni al cancro AD
- pattern limitato di espressione dei geni
- origine dei tumori dalle cellule che li esprimono
- possible presenza di difetti di sviluppo
Protein chinasi (~520) :
2% del genoma codificante
385 serina-treonina chinasi
90 tirosina-chinasi -> 58 RTKs
43 tirosina-chinasi like
Polymophisms
Mutations
Gly533
1597 GGC Cys TGC
Lys603
Cys609
Cys611
Cys618
Cys620
1807
1825
1831
1852
1858
Cys630
Asp631
Cys634
1888 TGC
1891 GAC Tyr TAC
1900 TGC all detectable by
digestion
Glu768
Asn777
Leu790
Tyr791
2302
2331
2368
2371
Val804
Arg844
2410 GTG Leu CTG Met ATG
2530 CGG Leu CTG
Ala883
Ser891
2647 GCT Phe TTT
2671 TCG Ala GCG
dig. DdeI
dig. BstuI
Met918
2752 ATG Thr ACG
dig. NaeI
ex 8
ex 10
Ile647
(ATC>ATT)
Gly691Ser (GGT>AGT)
BanI
Leu769
TaqI
Ser836
AluI
Ser904
RsaI
(CTT>CTG)
(AGC/AGT)
(TCC>TCG)
ex 11
ex 13
ex 14
ex 15
ex 16
AAA Gln CAA
TGC
TGC
TGC
TGC
GAG
AAC
TTG
TAT
Asp GAT, GAC
Ser AGC
Phe TTT, TTC
Phe TTT
dig. AluI
Mutazioni RET extra-cellulari (livello di rischio 2, 3)
ex 10
Cys609 #
Cys611
Cys618 #
Cys620 #
12 bp dup
(634-635)
cys-rich region
trans-membrane
tyrosine kinase
domain
ex 11
MEN2A-1: 8%
MEN2A-2: 31%
MEN2A-3: 20%
FMTC : 60 %
HSCR: 65 cases
Cys630
Cys634
MEN2A-1:
MEN2A-2:
MEN2A-3:
FMTC
:
92%
69%
80%
30 %
Effetto biologico : dimerizzazione ligando-indipendente
del recettore RET
RET: Cys634Tyr
Uterus
Cys634Arg
Neg
Cys634Tyr
Cys634Arg
MTC
Pheo Bil
HPT
mut
3
9
3
MTC 33
Pheo Bil 40
MTC 17
Pheo Bil 35
wt
RET exon 11
4
RET: Cys634Tyr
Uterus
MT C
Pheo Bil
HPT
+
3
wt
+
9
+
+
MT C 17
Pheo Bil 35
+
+
wt
+
wt
+
wt
wt
3
MT C 33
Pheo Bil 40
+
wt
+
wt
4
RET: Cys634Tyr
Uterus
MT C
Pheo Bil
HPT
3
9
3
MT C 33
Pheo Bil 40
MT C 18
MT C 13
MT C 35
CCH 14
CCH 11
MT C 30
Pheo 31
MT C 11
MT C 10
MT C 17
Pheo Bil 35
4
RET: Cys634Tyr
stesso luogo di origine
Uterus
MT C
Pheo Bil
HPT
3
9
3
MT C 33
Pheo Bil 40
MT C 18
MT C 65
mut
2
MT C
Pheo Bil
mut
MT C
MT C 27
Pheo 28
mut
MT C 13
MT C 35
CCH 14
CCH 11
MT C 30
Pheo 31
MT C 11
MT C 10
MT C 17
Pheo Bil 35
4
RET: Cys634Tyr
03
M TC 6 5
2
Ute ru s
M TC
Ph e o Bi l
2
M TC 3 1
3
3
Ph e o
3
2
Ph e o
M TC
Ph e o Bi l
HPT
3
2
M TC
Ph e o
M TC 5 8
M TC 2 7
Ph e o 2 8
6
3
9
M TC 5 7
3
M TC 3 3
Ph e o Bi l 4 0
M TC 3 5
M TC 3 0
Ph e o 3 1
M TC 1 7
Ph e o Bi l 3 5
2
M TC 1 8
M TC 1 3
CCH 1 4
CCH 1 1
M TC 1 1
M TC 1 0
40 individui analizzati:
5 affetti al momento del test
14 portatori asintomatici
21 non portatori
9 tiroidectomie dopo test
M TC 6 1
4
3
CCH
CCH
RET: Cys618Ser
MTC
MTC
MTC
wt
wt
MTC
MTC
MTC
wt
wt
MTC
wt
MTC
wt
wt
CCH
MTC
micro MTC
wt
MTC
wt
wt
MTC
MTC
RET: Cys618Arg
1
1
2
2
3
4
5
wt
Pheo 74
MTC 75
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
wt
1
2
2
wt
wt
3
4
3
5
3
MTC 45
6
7
8
MTC 41
HPT
9
2
10
MTC 37
11
12
14
15
16
3
CCH 12
CCH 9
wt
MTC 8
wt
CCH 7
NO CCH 9
HSCR
12
wt
8
2
13
2
wt
MTC 34
13
7
wt
11
3
CNS 44
6
14
2
wt
2
3
Pheo 74
MTC 75
6
7
MTC 45
7
8
8
MTC 41
HPT
9
10
9
MTC 37
11
12
MTC 34
13
14
15
16
3
CCH 12
CCH 9
wt
MTC 8
wt
CCH 7
NO CCH 9
HSCR
wt
Mutazioni RET in Cys esone 10 :
MEN2A-FMTC e malattia di Hirschsprung
23 famiglie
65
cases
Mutazioni RET intra-cellulari
Livello di rischio 1 (MEN2B)
Effetto biologico: cambiamento della
specificità di substrato
transmembrane
Livello di rischio 3 (FMTC)
(raramente MEN2A)
ATP
binding
domain
ex 13
Glu768 Asp
Leu790 Phe
Tyr791 Phe
inter-TK
ex 14
Val804 Leu, Met
Arg844 Leu
ex 15
Ala883 Phe
Ser891 Ala
ex 16
Met918 Thr
Catalytic
core
pocket
3
RET: Val804Met
80
mut
8
64
MTC 52
wt
70
wt
mut CT al test genetico
57
51
mut
mut
wt
basale : 2.60 pg/ml
picco : 18.20 pg/ml
mut
2
36
34
micro MTC 30
CT al test genetico
basale : 10.36 pg/ml
picco : 215.36 pg/ml
30
27
18
RET: Glu798Asp
93
92
35
2
2
83
69
67 Leukemia
24
40
46
mut
WT
Glu768Asp
Leu769
CTT/CTG
89
85
HUMARA TEST
59
MTC 54
Pheo 59
Paraganglioma 59
Breast Cancer 58
wt
wt
31
RET exon 13
27
Blood
Hpa II
+ -
Pheo Celiac mass
+ -
+
-
RET: Leu790Phe
80
94
40
3
2
50
40
2
51
46
83
mut
62
Pheo 31
MTC 62
mut
40
38
Calcitoninemia
9.7 pg/ml
RET: Leu790Phe
51
46
+
66
Feocromocitoma 31
CMT 62
-
+
45
42
CMT 39
41
+
17
15
8