“Conoscere il DNA” LABORATORI CNR-INMM e PROVINCIA DI ROMA Progetto Bioform: Alcuni studenti delle classi III del Liceo Scientifico hanno partecipato ad un programma di laboratorio nel quale hanno applicato una metodica di biologia molecolare relativa alla tipizzazione del locus PV92 del cromosoma 16 Un gruppo di alunni delle classi IV, che aveva lo scorso anno scolastico già effettuato la tipizzazione del PV92, ha realizzato una metodica sperimentale per il DNA fingerprinting Dettagli del progetto L'iniziativa si è svolta con l'intervento di ricercatori e docenti esperti nell'ambito delle biotecnologie, appartenenti al CNR – INMM Fondazione Rita Levi Montalcini ed è stata sostenuta dalla PROVINCIA DI ROMA Gli alunni sono stati selezionati in base alla motivazione e preparati all’iniziativa, in orario extracurricolare, dai docenti della scuola Fasi della procedura: Estrazione del DNA dalla mucosa orale Isolamento di un frammento di un gene polimorfico mediante PCR Separazione dei frammenti mediante corsa elettroforetica Lettura e valutazione critica dei risultati ottenuti In viaggio verso il CNR…… Strumenti di lavoro Recupero delle cellule della mucosa orale mediante sciacquo con soluzione salina allo 0,9% Trasferimento di 1ml della soluzione salina contenente le cellule in un tubo da 1,5ml Inserimento dei campioni nella centrifuga Eliminazione del sopranatante e recupero del pellet di cellule Sospensione del pellet ed aggiunta di una resina (chelex) Di nuovo in centrifuga….e poi bollitura per 10 minuti dei campioni Recupero del DNA ed aggiunta degli oligonucleotidi, dei primer e della Taq.polimerasi Inserimento dei campioni nella macchina per la PCR per amplificare il DNA ….Si discute di evoluzione mentre si aspettano i tempi della PCR Si caricano i pozzetti per l’elettroforesi Ciascun alunno inserisce il proprio campione Comincia la corsa elettroforetica Esempio di risultati Test di gradimento (65 studenti) elaborazione dati prof.ssa F.F. De Vito 50 50 40 40 30 30 20 20 10 10 0 Molto abbast. poco 0 per niente Molto Quanto ti è piaciutala mattinata trascorsa al CNR- INMM? abbast. poco per niente L’esperimento proposto ha soddisfatto le aspettative? 70 70 60 60 50 60 50 40 40 40 30 20 30 20 0 20 10 10 Molto abbast. poco per niente Il personale che ti ha guidato nell’esperienza ti è sembrato preparato? 0 Si no Ripeteresti un’iniziativa simile? 0 Si* no Hai notato carenze organizzative?