Irene Allegranti e Laura Viola Tutors : Lara Odorizzi Cristina Ress 20 SETTEMBRE 2010 PRESENTAZIONE FINE STAGE FONDAZIONE BRUNO KESSLER, POVO I BioMEMS sono sistemi elettro-meccanici fabbricati su micro scala e applicati a diversi settori biotecnologici: agroalimentare, ambientale, farmaceutico e biomedicale. CLEAN ROOM di FBK: Laboratorio di microfabbricazione Riduce il volume del reagente utilizzato ed i relativi costi; Riduce i tempi di analisi; Permette di ottenere sistemi portatili (es. point of care diagnostics); Potenziale utilizzo sia in-vitro che in-vivo; Permette al sensore di godere di una maggiore sensibilità verso specifiche biomolecole di interesse; 1. Piattaforma integrata per elettroporazione cellulare; 2. Sensore di impedenza per la valutazione della biomassa; 3. PDMS: materiale polimerico per sistemi Lab On a Chip (LOC ). Metodo tradizionale con cellule in sospensione Dispositivo Bio-MEMS per cellule in adesione Possibilitá di : seguire l’evento di EP nel tempo e nello spazio; transfettare soluzioni diverse in aree specifiche del chip. Il Saccharomyces cerevisiae è il lievito più comunemente utilizzato per la fermentazione del pane, del vino e della birra. Si riproduce per gemmazione e tale processo avviene in tempi molto rapidi. Colture di lievito sono state fatte crescere in provetta, in terreno ricco YPD, ed incubate a 28°C. Multi-Parametric Monitoring System (MPMS) for agrofood applications. Il microsistema e’ dotato di una cameretta di contenimento per il campione da analizzare. È una misura elettrica e rappresenta l’opposizione al passaggio di corrente. Viene ottenuta collegando il chip ad un analizzatore di impedenza (4192A IMPEDANCE ANALYZER) . Questo registra il passaggio di corrente e grazie ad un’equazione fisica il computer estrapola una curva. Campioni analizzati: - microbeads in polistirene da 5 e 10 µm di diametro per eliminare la variabile replicazione. 3000 Stabilizzazione 2500 N3_50 ul 2107 N1_100 ul 2107 N13_400 ul 2107 N14_400 ul 2107 N15_400 ul 2107 ZA ctrl 2107 cm] 2000 1500 1000 time N14 freq imp phase rho sol delta rho 11 2.24E+01 6.06E+03 -4.95E+00 1.53E+03 -7.70E+02 21 1.78E+01 8.10E+03 -5.32E+00 2.05E+03 -2.44E+02 52 1.59E+01 8.88E+03 -5.52E+00 2.25E+03 -4.32E+01 76 1.59E+01 9.14E+03 -5.58E+00 2.32E+03 2.51E+01 83 1.59E+01 9.03E+03 -5.78E+00 2.29E+03 -2.58E+00 111 1.59E+01 9.16E+03 -5.58E+00 2.33E+03 2.92E+01 190 1.59E+01 9.08E+03 -5.57E+00 2.31E+03 8.53E+00 218 1.59E+01 9.05E+03 -5.56E+00 2.30E+03 2.07E+00 248 1.59E+01 9.04E+03 -5.57E+00 2.30E+03 0.00E+00 274 1.59E+01 8.92E+03 -5.74E+00 2.26E+03 -3.23E+01 302 1.59E+01 8.94E+03 -5.55E+00 2.27E+03 -2.64E+01 1637 7.94E+00 9.32E+03 -6.10E+00 2.37E+03 7.08E+01 500 0 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 Time [min] Esempio: beads da 10 µm La resistivita’ dipende sensibilmente dalla concentrazione del campione Stabilizzazione del segnale dopo circa 1.5 h Miscela soluzione semiliquida (PREPOLIMERO : INDURENTE) Degassaggio sotto vuoto Deposizione del PDMS su 2 supporti: fetta di silicio semplice e fetta master (FOTOLITOGRAFATA) Prepolimerizzazione (80°C, 10’ca.) Adesione dello strato-membrana sullo strato strutturato dal master Termine polimerizzazione (100°C, 20’ca.) Pratica fori d’entrata e uscita fluidi Cutting singole strutture Integrazione nel sistema appropriato (fissaggio con gocce del polimero) GRAZIE PER L’ATTENZIONE! Irene Allegranti e Laura Viola