La crioconservazione degli ovociti
Dott.ssa Silvia Bernardi
GynePro Medical Group
Bologna, Italy
www.gynepro.it
Human Oocyte Cryopreservation
80’s
After the early reports (Chen 1986 Lancet) this field
was not investigated further
90’s
Later studies on Slow Freezing (Gook
(Gook et al, 1995 Hum
Reprod))
Reprod
ICSI
2000
2000--now
1. Renewed interest
2. Achievement of several pregnancies and births
3. Adopted as a clinical tool
Slow cooling
Preliminare disidratazione e
successivo raffreddamento della
cellula uovo. La curva di
raffreddamento progressivo viene
controllata da un computer
Vitrification
Vitrifikation
1 sec.
- 0.3°C/min
- 50.000°C/min
Ovocita viene immerso in una
soluzione ad alta
concentrazione di crioprotettori
e raffreddato in modo
rapidissimo mediante contatto
diretto con l’azoto liquido
Congelamento lento versus Vitrificazione
Congelamento lento
I risultati impiegando alte concentrazioni di saccarosio (0.3
molare) mostrano un graduale incremento negli ultimi anni (Jain
and Paulson, 2006; Parmegiani et al. 2009).
Vitrificazione
Rappresenta il futuro della crioconservazione degli ovociti umani
(Oktay, 2005; Kuwayama 2005; Chian, 2008).
Reports
Births
Outcome of oocyte vitrification
Cobo et al, Fertil Steril 89:1657, 2008
Issues in oocyte cryopreservation
timing
of oocyte freezing
safety
of long term
cryostorage
potential
female age limits for
applying oocyte freezing
Timing of Slow Freezing
A timely cryopreservation (≤
(≤ 2 hours) can yield
very encouraging clinical results, when using a
SF/RT protocol with high sucrose concentration
The overall yield from oocytes cryopreserved within 2 hours from
OPU was 8.1 implantations per 100 oocytes thawed
Lo studio svolto nei nostri centri medici GynePro
ha messo in evidenza la possibilità di ottimizzare
la tecnica di congelamento ovocitario
permettendo di ottenere percentuali di
gravidanza su transfer embrionale di circa il 40%.
≤ 2h
Timing of slow freezing: conclusions
A
timely cryopreservation (≤
(≤ 2 hours)
can yield:
Best
embryo quality and development
Highest
Highest
pregnancy/transfer rate (30(30-39%)
efficiency rate in terms of
implantations/oocytes thawed (6.5
(6.5--8.1%)
Issues in oocyte cryopreservation
timing
of oocyte freezing
safety
of long term
cryostorage
potential
female age limits for
applying oocyte freezing
Long--term cryostorage: a realistic possibility
Long
Primo caso al mondo di sviluppo di blastocisti, gravidanza e
nascita da un ovocita crioconservato da 5 anni
Durata della crioconservazione
Lo stoccaggio prolungato non altera la
competenza riproduttiva degli ovociti umani
Issues in oocyte cryopreservation
timing
of oocyte freezing
safety
of long term
cryostorage
potential
female age limits for
applying oocyte freezing
Are there age limits for oocyte cryopreservation?
efficacy of ART declines in parallel
with increased female age
oocyte quality is reduced after 35
years of age
should oocyte cryopreservation be
offered to all women, particularly
those older than 35 years?
Birth from oocytes frozen at age 40
This report may suggest that oocyte freezing might be
applicable at any age!
Preservazione della fertilità femminile
in donne che intendono ritardare la maternità o
per quelle a rischio di perdere la funzionalità
gonadica
in caso di neoplasie che necessitano di terapie
gonadotossiche
Crioconservazione ed ovodonazione
Nelle nazioni in cui è consentita l’ovodonazione,
la crioconservazione degli ovociti rappresenta un
fondamentale strumento per la gestione di
alcune procedure
EGG BANKING
PERIODO FINESTRA PER MALATTIE INFETTIVE
Conclusioni
La crioconservazione degli ovociti umani
rappresenta un utile strumento clinico nel
laboratorio PMA
La crioconservazione a lungo termine non altera
la competenza riproduttiva degli ovociti umani
La tecnica di vitrificazione rappresenta il futuro
(già presente) della crioconservazione degli
ovociti umani