FHACT
Sonde per Citogenetica Molecolare (FISH)
Descrizione della sonda
La sonda pronta all’uso basata sul test oncologico associato all’HPV (FHACTTM) è disegnata per determinare le
variazioni nel numero di copie dei cromosomi 3, 5, 7 e 20 tramite fluorescence in situ hybridization (FISH).
Rappresentazione schematica della sonda FHACT
TERC
D5S2095
3q26
centromere
telomere
~904 kb
D5S2095
Cen7
5p15
telomere
centromere
Le barre orizzontali rossa , verde e gold indicano le regioni
coperte dalla sonda (approssimate alla scala NCBI
36.1/HG18/2006). La marcatura diretta TERC (rossa ), la
marcatura diretta D5S2095 (verde) e quella D20S911 (gold)
coprono i rispettivi loci, mentre la marcatura diretta Cen7
(aqua) copre le regioni pericentromeriche del cromosoma 7.
~601 kb
D20S911
TERC
D20S911
3
5
7
20q13
centromere
20
telomere
~493 kb
Interpretazione del segnale
Nei nuclei diploidi normali in interfase e nei cromosomi in metafase, la sonda FHACT TM genera 2 segnali rossi, 2
verdi, 2 gold e 2 aqua che corrispondono ai cromosomi normali 3, 5, 20 e 7 rispettivamente (Figura 1 e 2). Nelle cellule
con guadagno o amplificazione sui cromosomi 3q26, 5p15, 20q13 e/o sul cromosoma 7, il numero di segnali rossi,
verdi, gold e aqua aumenta (Figura 3).
Figura 1: Metafase diploide
normale con 2 segnali rossi
(TERC) , 2 verdi (D5S2095), 2
gold (D20S911) e 2 aqua (Cen7).
Figura 2: Nucleo normale in
interfase con 2 segnali rossi
(TERC), 2 verdi (D5S2095), 2
gold (D20S911) e 2 aqua (Cen7).
Referenze
1. Chen, L., et al. Exp Oncol, 2007. 29(2):116-20.
2. Moreau, P., et al. Blood, 2002. 100(5):1579-83.
3. Avet-Loiseau, H., et al. J Clin Oncol, 2012. 30(16): 1949-52
www.technogenetics.it
Figura 3: Nucleo in interfase con
segnale aumentato di numero di
copie TERC, D5S2095, D20S911.
Filtri Microscopio a Fluorescenza
Fluoroforo
Eccitazione max
Emissione max
Verde
496 nm
520 nm
Rosso
593 nm
612 nm
Gold
525 nm
551 nm
Aqua
431 nm
480 nm
DAPI
360 nm
460 nm
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