Diagnostica delle malattie renali: l’automazione oggi e domani Cosimo Ottomano MD CdA DasitGroup Kidney may undergo damages and/or dysfunction Markers of Damages Albuminuria (Immunological) Markers of dysfunction [Total Proteinuria] Creatinine Specific urinary Proteins [Glycosuria] Β-NAG Na and K (Na/K ratio) EGF/MCP-1 ratio Elements of Urinary Sediment Urea Creatinine Clearance Cystatin C Iothalamate Clearance Neutrophil Gelatinase – associated Lipocalin (NGAL) Profilo di Imprecisione dei Globuli Rossi G.R./ul C.V. 3,1 23,18 3,7 14,4 6,3 17,97 8,7 18,35 14,6 13,5 70,7 4,81 147,9 7,54 303 3,22 314,6 2,0 469,9 1,88 574,4 1,23 609,8 1,01 779,4 1,56 Globuli Rossi / ul 30 25 20 15 C.V. 10 5 1330,5 1,05 1354,6 0,79 0 0 500 1000 1500 Profilo di imprecisione dei Globuli Bianchi Leuco/ul C.V. 5,2 6,23 5,6 5,4 12,2 5,58 17,2 5 38,7 4,59 47,1 3,99 70 4,36 95,4 2,78 120,4 1,57 7 219,9 4,78 6 235,5 2,35 5 366,1 1,52 Leuco/ul 4 C.V. 3 920,3 1,73 1081 3,68 1 1383,9 5,64 0 2 0 500 1000 1500 Profilo di Imprecisione dei Batteri Batteri/μl 10,3 C.V. 6,5 23,1 10,94 25,9 11,51 30,4 4,17 60,1 7,3 79,8 9,15 221,9 3,06 309,5 3,25 961,6 4,72 5329 2,56 12 5503,2 2,04 10 7720,3 3,31 8993,4 2,0 4 9364,6 7,77 2 12333,3 11,65 0 Batteri/ul 14 8 C.V. 6 0 5000 10000 15000 Profilo di Imprecisione delle Cellule Epiteliali Cell Epi/μl 3,9 C.V. 13,62 5,4 5,38 5,5 8,13 8,6 4,67 11,1 3,79 11,7 11,61 19,6 7,29 22,9 4,7 24,8 2,86 26,9 4,87 28,2 5,11 56,8 4,14 Cellule Epiteliali/μl 16 14 12 10 8 C.V. 6 57 4,13 4 101,5 1,97 2 121,4 1,38 0 0 20 40 60 80 100 120 140 Profilo di Imprecisione di Cilindri Cilindri/μl C.V. 0 0 0,32 11,91 0,41 18,81 0,45 20,99 1,37 5,78 1,55 14,83 1,61 14,61 2,07 5,18 2,66 5,49 25 2,72 15,4 20 3 10,59 15 3,61 2,82 4,41 8,15 Cilindri/ul C.V. 10 5 5,1 4,2 5,5 14,60 0 0 1 2 3 4 5 6 Confronto tra UF-1000i e microscopia Tavola sinottica dell’Accuratezza diagnostica dell’UF-1000i AUC Curva ROC Cut-Off UF-1000 (cells/uL) SE SP VPN VPP IBC RBC 0.96 10 97,1% 94,0% 96,9% 94,4% 95,6% WBC 0.99 10 99,1% 92,8% 98,9% 93,9% 96,1% EC 1.00 7 97,8% 96,4% 98,2% 95,8% 97,1% CAST 0.92 1 88,9% 85,3% 98,1% 48,0% 85,8% YEAST 0.92 >0 87,1% 93,1% 97,6% 69,2% 92,2% Conclusions Compared to data regarding the UF-100 (14,16), the UF1000i evaluated in the present study gives better definition and differentiation of the different species of corpuscular elements, giving accuracy and inaccuracy at the best levels yet found for this type of analytical system (14, 15, 22). The accuracy revealed, compared to the microscope, seems to permit a reduction in the percentage of microscopic reviews of the samples, facilitating the operative flow and reducing the TAT and the risk of errors Ability of UF-1000i in the follow-up of urinary tract infections R E S P O N D E R N O T R E S P O N D E R • In base ai dati ottenuti nel presente studio possiamo suggerire che una riduzione della batteriuria pari al 70% a t24 suggerisca una buona risposta alla terapia • Utilizzando il cut-off specificato abbiamo ottenuto SE=0.96, SP=0.96, PPV=0.95, NPV=0.96 Conduttività La conduttività appare legata alla osmolalità poiché entrambe sono dipendenti dalla concentrazione di soluti ionici nelle urine. La conducibilità elettrica o conducibilità specifica costituisce una misura della capacità di un materiale di condurre una corrente elettrica. Quando una differenza di potenziale elettrico viene posto attraverso un conduttore, il suo flusso mobile di cariche, dando origine ad una corrente elettrica. La conducibilità σ è definito come il rapporto tra la densità di corrente per l'intensità del campo elettrico. Conducibilità è il reciproco (inverso) di resistività elettrica e ha le unità SI Siemens per metro (S • m-1) ovvero se la conduttanza elettrica tra le facce opposte di un 1 metro cubo di materiale è 1 Siemens quindi la conduttività elettrica del materiale è di 1 Siemens per metro. Nelle urine la conduttività è misurata in mS/cm Conduttività vs Markers surrogati di Osmolalità urinaria e diuresi Densità Relativa vs Markers surrogati di Osmolalità urinaria e diuresi 24 25 26 27 28 30 31 32 33 34 35 The Work Group has recommended the classification of albuminuria into only 3 categories, based on practical considerations, but recognized that further subdivisions within the category of < 30 mg/24 hours (ACR < 30 mg/g or < 3 mg/mmol) may be useful for risk stratification, and that subdivisions within the category of > 300 mg/ 24 hours (ACR > 300 mg/g or > 30 mg/mmol) may be useful for diagnosis and management. 36 37 38 40 41 M. Bombardieri1, D. Barachetti1, N. Noris1, G. Previtali1, G. Azzarà1, M. Baigorria Vaca1, F. Zunino1, M. Vavassori1, E. Radavelli1, R. Sebastiani1, M.G. Alessio1 e R. Fiocchi2. 1.Laboratorio Analisi Chimico Cliniche e 2.UO Cardiochirurgia, Ospedali Riuniti Di Bergamo. La ratio tra Epidermial Growth Factor (EGF) e Monocyte Chemotactic Peptide 1 (MCP) urinari è in grado di predire il deterioramento della funzionalità renale in pazienti sottoposti a trapianto cardiaco 42 Pazienti Studio caso-controllo retrospettivo su 24 pazienti sottoposti a trapianto di cuore in terapia con ciclosporina CASI (n=12*) CONTROLLI (n=12*) P-Value Età media (anni) 59.8±15.9 58.6±10.3 0.82 Creatinina iniziale media (mg/dl) 1.86±0.6 1.89±0.2 0.9 GFR iniziale media (metodo MDRD) 40.5±17.1 42.3±16.5 0.95 Casi: pazienti con funzionalità renale deteriorata nei successivi 2 anni, 4 con necessità di trattamento dialitico (30%), 2 deceduti (16%) Controlli: pazienti con funzionalità renale stabile nei successivi 2 anni 43 Materiali e Metodi EGF e MCP-1 sono stati determinati nelle urine con metodo ELISA • Le urine raccolte al tempo zero (T0) e dopo 14± 3,4 mesi (T1) e conservate a -80°C dopo la determinazione a fresco della creatininuria • E’ stata calcolata la Ratio tra EGF e MCP1 ,dopo normalizzazione per grammo di creatinina urinaria • La ratio è stata confrontata con la creatinina sierica (su ADVIA 2400 Siemens) e con il filtrato glomerulare (GFR) calcolato con la formula MDRD • Poiché la ratio EGF/MCP1 ha mostrato una distribuzione non normale, per la valutazione statistica è stato utilizzato il Mann Whitney U test, confrontando le mediane dei tre parametri (creatinina , GFR e ratio EGF/MCP1) 44 Risultati GFR ( formula MDRD) 40 p=ns CREATININA (mg/dl) p=ns 3 35 2,5 p=ns p=ns 30 CASI 20 CONTROLLI 15 mg/dl 2 25 CASI 1,5 CONTROLLI 1 10 0,5 5 0 0 T0 T1 T0 T1 45 Risultati RATIO EGF/MCP-1 P=0,003 70 60 50 P=0,01 40 CASI CONTROLLI 30 20 10 0 T0 T1 46