Il valore dell’analisi prenatale
non invasiva (non-invasive
prenatal testing, NIPT).
Un supplemento per il flipbook
del consulente genetico
Le NIPT utilizzano DNA libero.
Campione di sangue materno
DNA libero di
origine materna
DNA libero di
origine fetale
Le NIPT utilizzano DNA libero.
• Il campione di sangue materno contiene una miscela di DNA libero di origine materna e fetale.
• Nella NIPT vengono contati e analizzati sia i frammenti materni sia quelli fetali.
• Le aneuploidie vengono rilevate confrontando la quantità di materiale cromosomico rispetto a una serie di
cromosomi di riferimento.
Sequenziamento massivo in parallelo: un approccio
più approfondito al sequenziamento.
DNA libero di origine materna e fetale
Allineamento e conteggio
Gravidanza
non interessata
DNA libero sequenziato mediante
sequenziamento massivo in parallelo
(Massively Parallel Sequencing, MPS)
Gravidanza
interessata
Sequenziamento massivo in parallelo: un approccio
più approfondito al sequenziamento.
• Il campione di sangue materno contiene una miscela di DNA libero di origine materna e fetale.
• L’MPS, o sequenziamento massivo in parallelo, analizza i frammenti di DNA libero ottenuti da un
campione di sangue materno.
• Le sequenze vengono allineate al genoma per identificare il cromosoma di origine del frammento.
• Le aneuploidie vengono rilevate confrontando la quantità di materiale cromosomico per un
cromosoma specifico nel campione di una paziente rispetto a una serie di cromosomi di
riferimento.
Rilevazione di anomalie cromosomiche fetali.
Cromosomi
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
Trisomia 13
o
19
Trisomia 21
20
21
22
XX-sesso
femminile
Trisomia 18
XY-sesso
maschile
Rilevazione di anomalie cromosomiche fetali.
• Il test prenatale verifi® rileva le trisomie 21, 18 e 13 sia nelle gravidanze singole sia in quelle gemellari.
Rilevazione di anomalie dei cromosomi sessuali.
Cromosomi
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
o
19
20
21
XXX
22
XX-sesso
femminile
Monosomia X
XY-sesso
maschile
XXY
XYY
Rilevazione di anomalie dei cromosomi sessuali.
• Nelle gravidanze singole, possono inoltre essere rilevate le aneuploidie dei cromosomi sessuali. Questo test è
facoltativo, in base alla preferenza della paziente e del medico.
–– Le aneuploidie dei cromosomi sessuali rilevate includono 45,X, 47,XXX, 47,XXY, 47,XYY.
• Nelle gravidanze gemellari, viene rilevata la presenza o l’assenza del cromosoma Y. Questo test è facoltativo,
in base alla preferenza della paziente e del medico.
Rilevamenti del test verifi.
Risultati
Aneuploidia rilevata
Aneuploidia sospetta
Nessuna aneuploidia rilevata
Risultati del test.
Per gli autosomi vi sono tre possibili risultati:
• Aneuploidia rilevata, aneuploidia sospetta (valore al limite), aneuploidia non rilevata.
Per l’analisi dei cromosomi sessuali nelle gravidanze singole vi sono due possibili risultati:
• Aneuploidia rilevata e aneuploidia non rilevata.
–– Se non viene rilevata un’aneuploidia, verrà segnalato il sesso del feto.
–– Per le gravidanze gemellari, verrà segnalata la presenza o l’assenza del cromosoma Y.
Alle pazienti che ricevono un risultato di aneuploidia rilevata o sospetta deve essere offerta una
successiva discussione sui risultati e sulle opzioni di analisi invasive (villocentesi o amniocentesi) per
avere una conferma.
Tipica sequenza di analisi prenatale.
La paziente sceglie
l’analisi prenatale
NO
SÌ
Screening
del siero
Diagnostica
Villocentesi/Amniocentesi
(invasiva)
NIPT
(non-invasiva)
SÌ
Il risultato dello screening
del siero è positivo?
NO
Continuare con la gestione della
gravidanza secondo i protocolli
della vostra professione.
Il risultato del test verifi
è un’aneuploidia rilevata
o sospetta?
SÌ
NO
Continuare con la gestione della
gravidanza secondo i protocolli
della vostra professione.
Continuare con la gestione della
gravidanza secondo i protocolli
della vostra professione.
Tipica sequenza di analisi prenatale.
Considerazioni sulla consulenza prima del test
• Il test per l’aneuploidia deve essere una scelta informata.
• Il test prenatale verifi rileva aneuploidie dei cromosomi 21, 18 e 13. Il test dei cromosomi sessuali è facoltativo.
• L’offerta di qualsiasi test deve essere basata sul contesto clinico.
• Villocentesi e amniocentesi rimangono opzioni per tutte le donne in gravidanza.
Considerazioni sulla consulenza dopo il test
• 3 risultati possibili per ogni cromosoma testato.
–– Nessuna aneuploidia rilevata: questo risultato è rassicurante ma non garantisce una gravidanza non
interessata.
–– Aneuploidia sospetta/Valore al limite: questo risultato è indicativo di aneuploidia. Esiste una piccola
possibilità che i risultati possano non riflettere i cromosomi fetali bensì le modificazioni nella placenta o
nella paziente.
–– Aneuploidia rilevata: questo risultato è coerente con aneuploidia. Esiste una piccola possibilità che i
risultati possano non riflettere i cromosomi fetali bensì le modificazioni nella placenta o nella paziente.
–– Per i risultati di aneuploidia sospetta o rilevata sono raccomandate la consulenza genetica e la villocentesi/
amniocentesi.
• Lo screening del difetto di chiusura del tubo neurale non è una parte delle analisi NIPT e dovrebbe essere
offerto separatamente.
• Tutti i risultati devono essere esaminati nel contesto dell’anamnesi clinica, medica e familiare.
Profilo della NIPT: i numeri del test verifi.
1
provetta di sangue
0.1%
la più bassa percentuale
di fallimento del test
10
Eseguibile a sole
settimane di gravidanza
3
Analizza le
più comuni
aneuploidie autosomiche
e aneuploidie sessuali
supplementari
Risultati ottenuti
in soli
giorni lavorativi
2-4
Ciò che non può essere espresso in numeri:
il conforto di sapere
Che cosa rende il test prenatale verifi diverso?
• Il test verifi è un’analisi del sangue semplice, che si può eseguire in studio: è necessaria solo una provetta di sangue.
• Può essere effettuato presto, già a 10 settimane in gravidanza.
• Rileva le trisomie 21, 18 e 13 e ha un’opzione per le aneuploidie dei cromosomi sessuali (monosomia X, XXX, XXY, XYY).
• I risultati del test sono solitamente disponibili in 2–4 giorni lavorativi dal ricevimento del campione.
• Ha la più bassa percentuale di fallimento tra le NIPT (0,1%).
Per questo motivo, il test verifi è in grado di fornire risposte affidabili sulle più comuni anomalie cromosomiche.
Che cos’è il mosaicismo?
Divisione cellulare
Mosaicismo tissutale
Cellule normali
Cellule con modificazione genetica
Che cos’è il mosaicismo?
• Il mosaicismo è un fenomeno biologico dovuto alla presenza di cellule con differenti composizioni genetiche
nello stesso individuo. Di solito si verifica durante il processo di divisione cellulare mitotica.
• Il mosaicismo può essere una causa biologica alla base di risultati discordanti delle NIPT.
Tipi di mosaicismo.
Disomia
Mosaicismo generalizzato
Mosaicismo confinato alla placenta
(Confined placental mosaicism, CPM)
Mosaicismo fetale
Trisomia
Tipi di mosaicismo.
Esistono tre tipi di mosaicismo:
• Mosaicismo generalizzato: presenza di due o più linee cellulari con cariotipo diverso sia nella placenta
sia nel feto. Nei casi di mosaicismo generalizzato, esiste la possibilità di risultati delle NIPT falsi positivi o
falsi negativi a seconda dell’origine del DNA libero.
• Mosaicismo confinato alla placenta: presenza di due o più linee cellulari con cariotipi diversi che sono
limitate alla placenta e non presenti nel feto. Nei casi di mosaicismo confinato alla placenta, esiste la
possibilità di un risultato falso positivo della NIPT.
• Mosaicismo fetale: presenza di due o più linee cellulari con cariotipi diversi che sono presenti nel feto,
ma non presenti nella placenta. Nei casi di mosaicismo fetale, esiste la possibilità di un risultato falso
negativo della NIPT.
Mosaicismo confinato alla placenta.
Struttura di villo
corionico normale
Tecniche di laboratorio
utilizzate per la villocentesi
(Chorionic Villus Sampling, CVS)
Colonne cellulari
citotrofoblastiche
Villocentesi
Sinciziotrofoblasto
Nucleo mesenchimale
Citotrofoblasto
Nucleo
mesenchimale
Sospensione di
citotrofoblasto
Coltura di
villi corionici
Preparazione
diretta
Mosaicismo confinato alla placenta (Confined
placental mosaicism, CPM).
• Il mosaicismo confinato alla placenta (CPM) è definito come presenza di due o più linee cellulari con cariotipi
diversi che sono limitate alla placenta e non presenti nel feto.
• Il DNA libero che viene analizzato nella NIPT origina dai citotrofoblasti; quindi, un risultato della NIPT è molto
simile a un risultato della preparazione diretta della villocentesi.
• Mosaicismo confinato alla placenta di tipo 1: il mosaicismo è limitato alle cellule del trofoblasto.
• Mosaicismo confinato alla placenta di tipo 2: il mosaicismo è limitato alle cellule dello stroma del villo
corionico.
• Mosaicismo confinato alla placenta di tipo 3: il mosaicismo è presente in entrambe: cellule del trofoblasto
e dello stroma.
• I mosaicismi confinati alla placenta di tipo 1 e di tipo 3 possono causare falsi positivi nelle NIPT.
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