Costruzione delle rette di taratura Posizione sulla piastra ATP (moli) Fotoni emessi 20 dicembre Fotoni emessi 19 dicembre B1 1E-14 14 16 B2 2E-14 8 6 B3 1E-13 64 50 B4 1E-12 458 474 B5 2E-12 934 654 B6 1E-11 4528 3374 Tabella dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione diluita 25 volte Costruzione delle rette di taratura Posizione sulla piastra ATP (moli) Fotoni emessi 20 Fotoni emessi dicembre 19 dicembre B1 1E-14 14 16 15 B2 2E-14 8 6 7 B3 1E-13 64 50 57 B4 1E-12 458 474 466 B5 2E-12 934 654 794 B6 1E-11 4528 3374 3951 media Tabella dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione diluita 25 volte. Media dei valori ottenuti nei due giorni Rappresentazione delle rette di taratura intensità del segnale emesso (numero di fotoni) taratura per la reazione con mix diluita 4500 4000 3500 3000 esercitatorori 2 2500 esercitatori 1 AVERAGE 2000 Linear (esercitatorori 2 ) Linear (esercitatori 1) 1500 Linear (AVERAGE) 1000 500 0 0 2E-12 4E-12 6E-12 ATP (moli) 8E-12 1E-11 Costruzione delle rette di taratura Posizione sulla piastra ATP (moli) Fotoni emessi 20 dicembre Fotoni emessi 19 dicembre A1 1.00E-16 152 194 A2 2.00E-16 102 198 A3 1.00E-15 126 178 A4 1.00E-14 274 392 A5 2.00E-14 392 426 A6 1.00E-13 1194 2408 Tabella dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione Costruzione delle rette di taratura Posizione sulla piastra ATP (moli) Fotoni emessi 20 Fotoni emessi dicembre 19 dicembre A1 1.00E-16 152 194 173 A2 2.00E-16 102 198 150 A3 1.00E-15 126 178 152 A4 1.00E-14 274 392 333 A5 2.00E-14 392 426 409 A6 1.00E-13 1194 2408 1801 media Tabella dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione. Media dei valori ottenuti nei due giorni Rappresentazione delle rette di taratura taratura per la reazione con mix intensità del segnale emesso (numero di fotoni) 2400 2100 1800 1500 esercitatorori 2 esercitatori 1 1200 AVERAGE Linear (esercitatorori 2 ) 900 Linear (esercitatori 1) Linear (AVERAGE) 600 300 0 0.00E+00 2.00E-14 4.00E-14 6.00E-14 ATP (moli) 8.00E-14 1.00E-13 1.20E-13 Costruzione delle rette di taratura Posizione sulla piastra ATP Fotoni emessi (moli) 20 dicembre Fotoni emessi 19 dicembre media Deviazione standard B1 1E-14 14 16 15 1 B2 2E-14 8 6 7 1 B3 1E-13 64 50 57 7 B4 1E-12 458 474 466 8 B5 2E-12 934 654 794 140 B6 1E-11 4528 3374 3951 577 Tabella dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione diluita 25 volte. Media dei valori ottenuti nei due giorni e deviazione standard Rappresentazione dell’errore sui punti delle rette di taratura Errore su ciascun punto della retta 700 600 Errore calcolato 500 400 STDN DEV 300 % error 200 100 0 1 2 3 4 Punti della retta di taratura 5 6 Grafico dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione diluita 25 volte Rappresentazione dell’errore sui punti delle rette di taratura % error 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 1 2 3 4 5 6 % error Grafico dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione diluita 25 volte Costruzione delle rette di taratura Posizione sulla piastra ATP Fotoni emessi (moli) 20 dicembre Fotoni emessi 19 dicembre media Deviazione standard A1 1.00E-16 152 194 173 21 A2 2.00E-16 102 198 150 48 A3 1.00E-15 126 178 152 26 A4 1.00E-14 274 392 333 59 A5 2.00E-14 392 426 409 17 A6 1.00E-13 1194 2408 1801 607 Tabella dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione diluita 25 volte. Media dei valori ottenuti nei due giorni e deviazione standard Rappresentazione dell’errore sui punti delle rette di taratura Errore su ciascun punto della retta 700 600 Errore calcolato 500 400 STDN DEV 300 % error 200 100 0 1 2 3 4 5 Punti della retta di taratura 6 Grafico dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione Rappresentazione dell’errore sui punti delle rette di taratura % error 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 % error Grafico dei dati raccolti utilizzando quantità note di ATP e mix di reazione Rappresentazione delle rette di taratura intensità del segnale emesso (numero di fotoni) taratura per la reazione con mix diluita y = 5e14x + 12.101 R = 0.99996 4500 y = 4e14x + 21.176 R = 0.99971 4000 3500 y = 3e14x + 30.251 R = 0.99819 3000 esercitatorori 2 2500 esercitatori 1 AVERAGE 2000 Linear (esercitatorori 2 ) Linear (esercitatori 1) 1500 Linear (AVERAGE) 1000 500 0 0 2E-12 4E-12 6E-12 ATP (moli) 8E-12 1E-11 Rappresentazione delle rette di taratura taratura per la reazione con mix y = 2e16x + 143.78 R = 0.99127 intensità del segnale emesso (numero di fotoni) 2400 2100 y = 2e16x + 142.19 R = 0.99728 1800 1500 esercitatorori 2 y = e16x +esercitatori 140.6 1 AVERAGE R = 0.99545 1200 Linear (esercitatorori 2 ) 900 Linear (esercitatori 1) Linear (AVERAGE) 600 300 0 0.00E+00 2.00E-14 4.00E-14 6.00E-14 ATP (moli) 8.00E-14 1.00E-13 1.20E-13 Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati utilizzando mix di reazione ATP (moli) Ricostruita equazione 19 dicembre Ricostruita equazione 20 dicembre 1.00E-16 1.80E-16 1.14E-15 2.00E-16 2.71E-15 -3.86E-15 1.00E-15 1.71E-15 -1.46E-15 1.00E-14 1.24E-14 1.33E-14 2.00E-14 1.41E-14 2.51E-14 1.00E-13 1.13E-13 1.05E-13 ATP (moli) Ricostruita equazione 19 dicembre Ricostruita equazione 20 dicembre 1E-14 -4.75E-14 3.80E-15 2E-14 -8.08E-14 -8.20E-15 1E-13 6.58E-14 1.04E-13 1E-12 1.48E-12 8.92E-13 2E-12 2.08E-12 1.84E-12 1E-11 1.11E-11 9.03E-12 Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati utilizzando mix di reazione diluita 25 volte Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati mitocondri 1 ATP mito1 mitocondri 2 ATP mito 2 3.61E+06 1.80E-10 2.94E+06 2.94E-10 5.23E+06 2.61E-10 2.55E+07 2.55E-09 4.38E+06 2.19E-10 5.29E+06 5.29E-10 5.15E+06 2.58E-10 4.11E+07 4.11E-09 4.53E+07 2.27E-09 6.57E+06 6.57E-10 4.83E+07 2.41E-09 5.37E+06 5.37E-10 Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati utilizzando mix di reazione mitocondri 1 ATP mito1 mitocondri 2 ATP mito 2 2.21E+05 7.36E-10 1.74E+05 3.48E-10 1.47E+05 4.90E-10 1.14E+06 2.29E-09 2.02E+05 6.72E-10 2.75E+05 5.50E-10 3.00E+05 1.00E-09 1.16E+06 2.33E-09 8.39E+05 2.80E-09 1.89E+05 3.79E-10 1.17E+06 3.91E-09 2.45E+05 4.90E-10 Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati utilizzando mix di reazione diluita 25 volte Calcolo dell’ATP prodotta dai mitocondri isolati ATP prodotta turno 1 4.51E-09 4.01E-09 3.51E-09 3.01E-09 mix 2.51E-09 mix diluita 2.01E-09 1.51E-09 1.01E-09 5.10E-10 1.00E-11 1 2 3 4 5 6 ATP prodotta turno 2 4.51E-09 4.01E-09 3.51E-09 3.01E-09 2.51E-09 mix 2.01E-09 mix diluita 1.51E-09 1.01E-09 5.10E-10 1.00E-11 1 2 3 4 5 6 Mappa del segnale ottenuto sulle piastre di misura