ESTRAZIONE
del DNA
SCOPO:
Estrazione e visione del DNA da una banana.
MATERIALI e STRUMENTI:
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Detersivo per piatti (Svelto)
azione contro i grassi
rompe la membrana nucleare;
enzima bromelina
rompe i legami e libera il DNA dagli
istoni che lo impacchettano;
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Succo d’ananas
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NaCl;
Alcool etilico raffreddato (concentrazione 100%)
Bacchetta di vetro;
Una provetta;
Colino;
Spatola;
pestello;
2 becher;
Cilindro graduato;
Una banana (perché tanto DNA e pratica).
DNA insolubile in alcool
CENNI TEORICI:
FASE 1
PROCEDIMENTO:
Sbucciato e pesato la banana
(80 g). Inserita nel becher e
pestata per distruggere la
Parete cellulare (in modo
meccanico), come si può
osservare nella figura 1.
Figura 1: mousse di banana
FASE 2
PROCEDIMENTO:
Formare una soluzione per estrarre il DNA della
banana inserendo nel cilindro graduato 3 grammi
di NaCl, 10 ml di detersivo e acqua deionizzata
dalla spruzzetta fino a raggiungere 100 ml di
soluzione, cercando di non creare schiuma, come
si può vedere nella figura 2.
figura 2 : soluzione ottenuta
FASE 3
PROCEDIMENTO:
Versare il composto nel becher dove si trova la mousse di banana e
lasciarlo agire, continuare a mescolare, per circa 8 minuti fino ad
ottenere una soluzione.
Il protocollo più corretto sarebbe stato quello di portare il tutto alla
temperatura costante di 50-60 °C per circa 15 minuti e subito dopo
inserirla nel ghiaccio.
FASE 4
PROCEDIMENTO:
Filtrare 50 ml di soluzione con il colino
nell’altro becher di vetro.
Prelevare 20 ml di filtrato e aggiungervi 5 ml
di succo d’ananas, lasciandolo agire per circa
4 minuti, come si può osservare nella figura 3.
Figura 3: mousse di banana filtrata
FASE 5
PROCEDIMENTO:
Versare circa un terzo della soluzione nella provetta e aggiungere
lo stesso volume di alcool etilico raffreddato, lasciare riposare per
consentire al DNA di precipitare e di raccogliersi.
OSSERVAZIONI:
abbiamo notato la formazione di due livelli. L’alcool etilico si disponeva
sopra e sotto la soluzione acquosa per la diversa densità. Nel mezzo di
essi si può osservare una massa gelatinosa che è il DNA.
Esso figura di colore bianchiccio assomigliando ad una ragnatela come
di può vedere in figura.
Figura 1 : DNA prelevato dalla banana
CONCLUSIONI
Con ciò abbiamo verificato la facilità nell’estrarre il DNA da
cellule vegetali.
Il DNA ha un colore bianchiccio, è insolubile in alcool, nel quale
precipita e si rende visibile.