Estrazione del DNA del kiwi e
della banana
Tortando scientifico
La ricetta
GLI INGREDIENTI
100 g di polpa di kiwi o banana
3 g di sale fino
10 ml detersivo liquido
Succo di ananas
q.b.
Acqua
q.b.
Alcool freddo
q.b.
Ghiaccio
q.b.
La ricetta
GLI STRUMENTI
Termometro
Pentola per il bagnomaria
Colino
Beuta da 250 ml
Bacchetta agitatrice
Cilindri graduati
Siringhe senza ago ( 10 e 5 ml)
I PARTECIPANTI
I.C.
Borgoncini
Duca
Primaria
Secondaria
• IIC / IID • IA / IC
• VC / VD • IIA / IIC
La continuità: i diversi approcci
Per le prime classi si tratta di
preparare una “pozione magica”.
Per gli alunni della secondaria si tratta
di verificare la riuscita dell’esperienza.
Il procedimento
Il DNA è contenuto nel nucleo delle cellule del
kiwi e della banana. Per liberarlo, è necessario
demolire le membrane cellulari e quelle del
nucleo. Poichè queste membrane sono
costituite da molecole ricche di grassi, basterà
scioglierle usando del detersivo liquido.
Useremo anche un po' di sale che ha la
funzione di facilitare l'eliminazione delle
proteine su cui è avvolto il DNA (gli istoni)
Pesiamo il sale
3g
Pesiamo l’acqua
80 g
Versiamo
l’acqua nel sale
Mescoliamo con
cura per far
sciogliere il sale
Versiamo il detersivo nella soluzione salina
Cerchiamo di non produrre schiuma
Prepariamo il detersivo per demolire le
membrane cellulari e nucleiche
10 ml
10 ml
Aggiungiamo
ancora acqua fino
a raggiungere i
100 cc
Preparazione della poltiglia per separare le cellule le une dalle altre ed
esporle direttamente all'azione della soluzione di estrazione
• Sbucciamo il kiwi
.
e ne schiacciamo la polpa con la forchetta
Pesiamo la polpa
schiacciata
100 g
Prepariamoci ad estrarre il DNA
Ora è necessario demolire le membrane cellulari e quelle del loro
nucleo per liberare il DNA.
La poltiglia, immersa nella soluzione di estrazione, verrà portata a
60°C per accelerare e favorire il processo, oltre che per disattivare
certi enzimi che potrebbero degradare il DNA.
Dopo 15 minuti dobbiamo però togliere la beuta dal bagnomaria a
60° (mantenuti costanti) perché il DNA comincia a degradarsi
frammentandosi. Questa è la ragione per cui bisogna raffreddare
immediatamente la poltiglia nel ghiaccio.
Versiamo la soluzione
d’estrazione nella poltiglia……
..oppure la poltiglia nella
soluzione
Immergiamo la beuta nell’acqua a 60°C per
15 minuti
KIWI
BANANA
Controlliamo costantemente la temperatura
dell’acqua
60° C !
60° C
!
Trascorsi i 15 minuti
immergiamo la
beuta nel ghiaccio.
5 minuti
Filtriamo con attenzione e raccogliamo un liquido
ricco di DNA, separato dai residui cellulari e dagli altri
tessuti del frutto che rimangono nel colino.
KIWI
BANANA
RESIDUI DEL KIWI
Filtrato del kiwi
RESIDUI DELLA BANANA
Filtrato della
banana
RIMOZIONE DELLE PROTEINE
Ora cercheremo di ottenere un DNA più puro, allontanando gli istoni
che sono le proteine intorno alle quali è avvolto il DNA.
Per allontanarle, si possono usare enzimi proteolitici, quale per esempio
la “proteasi“, che però non sono facili da reperire.
Visto che il nostro desiderio è quello di far ripetere questo esperimento
anche a casa, abbiamo sostituito la proteasi con il succo di ananas che
contiene la bromelina, una sostanza capace di demolire le proteine negli
amminoacidi di cui sono composte facilitandone quindi l'eliminazione.
A tutto succo!!!!
Preleviamo 3 cc di succo di ananas e li uniamo a 15 cc di soluzione filtrata
Finalmente evidenziamo il DNA
ll DNA è molto solubile nell’acqua, dove non si vede,
ma è insolubile nell’alcool, nel quale precipita
diventando quindi visibile.
Quindi aggiungiamo alcool gelato alla soluzione
presente nella provetta, per vedere il DNA.
Versiamo lentamente nella provetta l’alcool freddo e cerchiamo
di evitare che si mescoli con il filtrato. La quantità dell’alcool
deve essere pari alla quantità di filtrato.
KIWI
BANANA
Aspettiamo 5 minuti per
consentire al DNA di
precipitare e
raccogliersi tra l’alcool
e il filtrato sottostante
.
FINALMENTE!!!
Ora possiamo vedere una
sostanza bianchiccia, la cui
quantità tende ad
aumentare.
Si tratta del DNA della frutta.
All'interno di questa massa
ci sono numerose bollicine
d'aria. Ciò è dovuto al fatto
che l'alcool ha assorbito gas
mentre era nel congelatore
ed ora, riscaldandosi, lo
espelle.