Caratterizzazione Genetica di Razze Podoliche Italiane e Istriane con Marcatori Microsatellite Dalvit C., Maretto F., Cassandro M., De Marchi M., Cecchinato A., Bittante G. Sulle Tracce delle Podoliche – Matera 9-12 Luglio 2009 Scopo Ricerca • Studio della variabilità genetica e consanguineità media in alcune razze podoliche mediante marcatori molecolari microsatellite • Analisi della struttura delle popolazioni mediante sw STRUCTURE Sulle Tracce delle Podoliche – Matera 9-12 Luglio 2009 Dataset • 326 animali, 6 razze ceppo podolico – – – – – – Chianina (Chi, n=30) Marchigiana (Marc, n=36) Romagnola (Rom, n=53) Maremmana (Mmm, n=54) Podolica, (Pod, n=46) Istarsko govedo, bovino Istriano (Isg, n=51) – Bruna (Brs, n=56) Sulle Tracce delle Podoliche – Matera 9-12 Luglio 2009 Istarsko govedo Podolica Pugliese (Pojese) del Veneto • Principale razza bovina da lavoro della Serenissima Repubblica di Venezia • Estinta in Veneto agli inizi degli anni ‘70 • Sopravvissuta in Istria come razza Istarsko govedo Sulle Tracce delle Podoliche – Matera 9-12 Luglio 2009 Materiali e Metodi • 20 Marcatori Molecolari Microsatellite (TGLA57, INRA016, ILST008, BM1818, BM203, INRA006, CSSM14, ETH152, RM12, TGLA122, ETH185, TGLA227, TGLA126, TGLA53, ETH10, MM12, INRA64, INRA023, SPS115, ETH3) • Estrazione e Amplificazione in 5 multiplex da FTA cards. • Analisi dei frammenti mediante sequenziatore capillare Beckman Coulter CEQ8000 • Analisi statistica mediante sw GENEPOP 4.0, FSTAT 2.9.3, MolKin 3.0, STRUCTURE 2.3.1 Sulle Tracce delle Podoliche – Matera 9-12 Luglio 2009 Risultati • 221 alleli identificati (11,1 alleli/locus) – TGLA122 -> 17 alleli – ILST008 -> 4 alleli • 48 alleli razza specifici – Isg -> 13 alleli Et. Att. Et. Oss NMA fij Fis Bru 0.58±0.22 0.55±0.23 6.2 0.43 0.06 Chi 0.59±0.22 0.50±0.24 5.2 0.43 0.16 Isg 0.61±0.21 0.56±0.23 6.7 0.38 0.08 Mmm 0.71±0.10 0.57±0.14 7.4 0.33 0.21 Marc 0.62±0.20 0.54±026 6.0 0.42 0.14 Pod 0.71±0.10 0.62±0.18 7.7 0.31 0.12 Rom 0.57±0.25 0.53±0.25 6.0 0.46 0.08 Sulle Tracce delle Podoliche – Matera 9-12 Luglio 2009 Risultati W&C Value 95% CI FIS 0.1093 0.06689 - 0.15714 FIT 0.2155 0.15802 - 0.28472 FST 0.1193 0.08482 - 0.16036 W&C Genetix – campione intero Bru Chi Isg Mmm Marc Chi 0.1103 Isg 0.1640 0.0854 Mmm 0.1691 0.0999 0.1043 Marc 0.1386 0.0743 0.1161 0.1142 Pod 0.1278 0.0810 0.0708 0.0402 0.0965 Rom 0.1410 0.1039 0.1290 0.1292 0.0900 W&C Stime pairwise Fst - Genepop Sulle Tracce delle Podoliche – Matera 9-12 Luglio 2009 Pod 0.0967 Risultati STRUCTURE •Analisi bayesiana basata su modello in cui vi sono K popolazioni ognuna delle quali caratterizzata da un set di frequenze alleliche per locus. •Gli individui sono assegnati probabilisticamente alla popolazione o a piu’ di una popolazione se il loro genotipo indica admixture Pr(X|Z,P) Parametri: X -> Genotipo Z -> Popolazione (sconosciuta) di origine P -> Frequenze alleliche (sconosciute) in tutte le popolazioni • • • • • • Modello ADMIXTURE Frequenze alleliche correlate 40 Corse Indipendenti 2 < K < 12 Burn-in: 10.000 Iterazioni: 100.000 Sulle Tracce delle Podoliche – Matera 9-12 Luglio 2009 Risultati STRUCTURE -> Ln Pr(X|K) Sulle Tracce delle Podoliche – Matera 9-12 Luglio 2009 Risultati K=2 K=3 K=4 K=5 K=6 K=7 K=8 Bru Chi Isg Mmm Marc Sulle Tracce delle Podoliche – Matera 9-12 Luglio 2009 Pod Rom Conclusioni • Razze Pod, Mmm e Isg hanno evidenziato la maggiore variabilità genetica e il più basso livello di consanguineità media • Mmm e POD sono risultate le più simili e con presenza di sottostrutture • Chi, Mar e Rom sono risultate meno variabili, con un più alto livello di consanguineità e maggiormente omogenee Sulle Tracce delle Podoliche – Matera 9-12 Luglio 2009 Ringraziamenti • ANABIC – Chiara Berti – Fiorella Sbarra • AZRRI – Jasenka Kapuralin – Gordan Subara – Igor Jurcic Sulle Tracce delle Podoliche – Matera 9-12 Luglio 2009