Bersani Fabrizio De Cristofaro Luca Di Lena Simone Frigerio Stefano Girotto Alessandro Maiorana Antonina Pecoraro Veronica PRIMA FASE: TRASFORMAZIONE BATTERICA PUNTO DI PARTENZA Aliquota di cellule competenti. PRIMA FASE: TRASFORMAZIONE BATTERICA SCOPO Trasformare le cellule batteriche inserendo il DNA plasmidico che contiene il gene per la resistenza all’Ampicillina (AMP) PRIMA FASE: TRASFORMAZIONE BATTERICA RISULTATI: . Le cellule trasformate, piastrate su terreno con antibiotico, svilupperanno delle colonie PREPARAZIONE DI COLTURE LIQUIDE Passaggio intermedio tra 1° e 2° fase: Vengono preparate colture liquide di batteri trasformati, a partire da colonie cresciute su terreno solido. SECONDA FASE: MINIPREPS DI DNA PUNTO DI PARTENZA Colture liquide in terreno selettivo (AMP) SECONDA FASE: MINIPREPS DI DNA SCOPO Estrarre il DNA plasmidico da un’aliquota della soluzione di partenza SECONDA FASE: MINIPREPS DI DNA RISULTATI Soluzione di DNA plasmidico in eppendorf TERZA FASE: ELETTROFORESI PUNTO DI PARTENZA Aliquota di DNA plasmidico appena estratto Caricamento dei campioni su gel d’agarosio Corsa elettroforetica. TERZA FASE: ELETTROFORESI SCOPO Verificare l’avvenuta trasformazione delle cellule batteriche dal punto di vista molecolare. TERZA FASE: ELETTROFORESI RISULTATI Dopo la corsa su gel d’agarosio, con l’ausilio del colorante, si evidenziano le bande di DNA plasmidico.