Come misurare la concentrazione di glucosio
Nei laboratori, la [c] ematica del glucosio è di solito
misurata utilizzando una miscela di enzimi, la glucosio
ossidasi e la perossidasi.
Il primo E è altamente specifico per il glucosio e
ossida il 64% dello zucchero in soluzione. Riconosce
solo l’anomero b, per cui, alla miscela viene aggiunta
la mutarotasi, un E che trasforma tutte le altre forme
anomeriche del glucosio in forma b.
La H2O2 che si forma in queste reazioni di
ossidazione, viene ridotta dalla perossidasi ad acqua.
Contemporaneamente alla reazione catalizzata dalla
perossidasi, un cromoforo incolore presente nella
soluzione, si colorerà e l’intensità del colore sarà
direttamente proporzionale alla [c] di glucosio.
REGOLAZIONE DELLA GLICOLISI
La fosfofruttochinasi è detto anche "enzima tandem",
infatti forma un complesso con un secondo enzima,
l’enzima 2,6 bifosfatasi 2. L'attivazione di una delle
due unità enzimatiche è regolata dalla fosforilazione di
un residuo di serina. Quando il residuo è defosforilato,
la fosfofruttochinasi è attiva, viceversa, la bifosfatasi 2
è attiva.
La sua regolazione è fondamentale nella glicolisi,
dove catalizza la fosforilazione del fruttosio 6 fosfato a
fruttosio 1,6 bisfosfato.
REGOLAZIONE DELLA GLICOLISI
L’attività della fosfofruttochinasi è favorita dalla
presenza di AMP, di fruttosio-6-fosfato, di fosfato
inorganico e dallo ione ammonio. Questi rimuovono
l'inibizione allosterica operata dall’ ATP, dal fruttosio2,6-bifosfato e dal citrato.
enzima
induttore
repressore
La struttura secondaria presenta 13 α-eliche e 11
filamenti β disposti in due gruppi di 4 e 7 filamenti. Il
gruppo di 4 filamenti β compone un foglietto β aperto
ed è riconoscibile il motivo supersecondario β-α-β
filamenti β paralleli intercalati da α-eliche. Il gruppo
di 7 filamenti β presenta un gruppo centrale di 5
filamenti che compongono un foglietto β aperto
torsionale, sempre con motivo β-α-β, aperto e chiuso
da due filamenti antiparalleli congiunti al foglietto da
α-eliche con funzione di ansa di raccordo.
Tra i due motivi strutturali è presente un’ampia
fessura caratterizzata dalla presenza di due loop che
presentano una discreta flessibilità, che suggerisce
la presenza di un sito di legame.
319 residui aminoacidici, forma allungata.
loop
gruppo di 7 filamenti β
gruppo di 4 filamenti β