Cenni di Microscopia
Potere risolutivo
Potere risolutivo: capacità di vedere due punti come
distinti tra loro
Potere risolutivo dell’occhio umano: circa 1/10 di millimetro
Per poter risolvere (individuare come distinti) oggetti di
dimensiori inferiori al potere risolutivo dell’occhio umano sono
state prima lenti d’ingrandimento e poi microscopi.
Il primo microscopio fu realizzato nel ‘600 e consentì la
comprensione che ogni essere vivente è costituito da cellule.
Microscopio ottico
Dotato di due sistemi di lenti
(obiettivo e oculare)
Consente di ingrandire la
immagine di un oggetto di
2000 volte.
Potere risolutivo: 0,2 micron (mm)
ovvero 200 nanometri
Oggetti più piccoli osservabili:
batteri, caratterizzati da
dimensioni attorno ai 2mm
Immagini al microscopio ottico
microfotografia di
tessuto vegetale
microfotografia di batteri
colorati con arancio di acridina
Microscopio elettronico a
scansione (SEM)
Un fascio di elettroni primari, opportunamente focalizzato da lenti
elettroniche, colpisce la superficie del campione (disidratato e reso
conduttivo) generando elettroni secondari retrodiffusi e raccolti
(rivelatore) durante la scansione del campione.
La quantità ed energia degli elettroni
secondari retrodiffusi da ogni punto del
campione dipende dalla morfologia e
dalla chimica del campione in quel
punto.
Potere risolutivo: inferiore a quello
del m. elettronico a trasmissione
Oggetti più piccoli osservabili:
Superfici di oggetti e cellule (es:
ciglia cellulari)
Immagini al microscopio
elettronico a scansione (SEM)
Arto insetto
Sezione di piccola
arteria con globuli rossi Il pelo di un braccio
Microscopio elettronico a
trasmissione (TEM)
Un fascio di elettroni, dopo aver attraversato l’oggetto da
ingrandire (molto sottile e opportunamente trattato), colpisce
uno schermo fluorescente sul quale si forma l’immagine.
Potere risolutivo: 0,2 nanometri
(nm) ovvero 2 angstrom
Oggetti più piccoli osservabili:
Struttura fine di strutture
cellulari (es: due strati della
membrana cellulare)
Immagini al microscopio
elettronico a trasmissione
(TEM)
microfotografia di
parvovirus
microfotografia di
molecole circolari di DNA