UNIVERSITÀ
DI VERONA
INSTABILITÀ DEI MICROSATELLITI
NEGLI ADENOCARCINOMI DUTTALI E
NEI TUMORI ENDOCRINI DEL
PANCREAS
D Segala, S Bersani, V Zenti, S Beghelli, S Gobbo, S Barbi, P S Moore,
G Turri, M Brunelli, P Capelli, G Martignoni, F Menestrina, A Scarpa
INTRODUZIONE
L’ INSTABILITÀ DEI MICROSATELLITI (MSI) È
DOVUTA ALL’ALTERATA FUNZIONE DEI GENI DEL
MISMATCH REPAIR (MLH1, MSH2, MSH6).
NEL TRATTO GASTROENTERICO MSI È STATA
DESCRITTA DAPPRIMA NEL CARCINOMA EREDITARIO DEL
COLON NON ASSOCIATO A SINDROME POLIPOSICA
FAMILIARE (HNPCC) (1) E SUCCESSIVAMENTE NEL
CARCINOMA GASTRICO.
IN ENRAMBE LE CONDIZIONI SEMBRA AVERE VALORE
PROGNOSTICO POSITIVO (2)(3).
(1) Aaltonen LA, Peltomaki P, Leach FS, Sistonen P, Pylkkanen L, Mecklin JP, et al. Clues to the pathogenesis of familial
colorectal cancer. Science 1993;260:812–6.
(2) Samowitz WS, Curtin K, Ma KN, Schaffer D, Coleman LW, Leppert M, et al. Microsatellite instability in sporadic colon cancer
is associated with an improved prognosis at the population level. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2001;10:917–23
(3) Beghelli S, de Manzoni G, Barbi S, Tomezzoli A, Roviello F, Di Gregorio C, et al.
Microsatellite instability in gastric cancer is associated with better prognosis in only stage II cancers. Surgery
2006;139(3):347-56.
CARCINOMI COLORETTALI
N
MSI+
N
MSI-
T
T
hMHL1
hMSH2
hMSH6
ALTERAZIONE
N
T 18qLOH
TUMORI DEL PANCREAS
MSI SEMBRA ESSERE PRESENTE CON BASSA FREQUENZA
NELL’ADENOCARCINOMA DUTTALE (1).
MSI È STATA INOLTRE RISCONTRATA IN UN NUOVO
ISTOTIPO RECENTEMENTE DESCRITTO, IL CARCINOMA
MIDOLLARE DEL PANCREAS, IPOTIZZANDO LA SUA
CORRELAZIONE CON HNPCC (2).
NEI TUMORI ENDOCRINI È DESCRITTA
IPERMETILAZIONE DI MLH1 E MSI: TALI ALTERAZIONI
SAREBBERO CORRELATE ALLA RIDUZIONE DEL RISCHIO DI
RECIDIVA (3).
(1) Yamamoto H, Itoh F, Nakamura H, Fukushima H, Sasaki S, et al. Genetic and clinical features of human pancreatic ductal
adenocarcinomas with widespread microsatellite instability. Cancer Res 2001;61:3139–44.
(2) Wilenz RE, Goggins M, Redson M, Marcus VA, Volkan Adsay N, et al. Genetic, immunohistochemical, and clinical features of
medullary carcinoma of the pancreas: A newly described and characterized entity. Am J Pathol. 2000 May;156(5):1641-51.
(3) House MG, Herman JG, Guo MZ, Hooker CM, Schulick RD, et al. Prognostic value of hMLH1 methylation and microsatellite
instability in pancreatic endocrine neoplasms. Surgery 2003 Dec;134(6):902-8
INTRODUZIONE
CON IL NOSTRO STUDIO VOGLIAMO
ANALIZZARE L’INSTABILITÀ DEI
MICROSATELLITI NELL’ISTOTIPO
PREVALENTE DEI TUMORI DEL PANCREAS,
L’ADENOCARCINOMA DUTTALE, E
NELLE NEOPLASIE ENDOCRINE DEL
PANCREAS.
MATERIALI E METODI
ARCHIVIO DIPARTIMENTO DI PATOLOGIA
UNIVERSITÀ DI VERONA
261 NEOPLASIE DEL PANCREAS DI CUI
177
84
ADENOCARCINOMI DUTTALI
SPORADICI
TUMORI ENDOCRINI DEL
PANCREAS
ADENOCARCINOMI DUTTALI
• RACCOLTA DATI CLINICO-PATOLOGICI E
FOLLOW-UP
• RICERCA INSTABILITÀ DEI MICROSATELLITI
Marcatori utilizzati:
• BAT 25 (INTRONE GENE MSH2)
• BAT 26 (INTRONE GENE KIT)
MICRODISSEZIONE MANUALE DA SEZIONI DI TESSUTO IN PARAFFINA,
AMPLIFICAZIONE PCR UTILIZZANDO PRIMERS FLUORESCENTI E LETTURA
CON ABI PRISM 310 GENETIC ANALYZER, FOSTER CITY CALIFORNIA
• ESPRESSIONE FENOTIPICA DEI GENI DEL
MISMATCH REPAIR
MARCATORI IMMUNOISTOCHIMICI
• MLH1 (G168-15 PHARMINGEN, San Diego, Calif.)
• MSH2 (G129-1129 PHARMINGEN, San Diego, Calif.)
• MSH6 (Clone 44 PHARMINGEN, San Diego, Calif.)
UTILIZZAZIONE DEL COMPLESSO AVIDINA-BIOTINA-PEROSSIDASI
TUMORI ENDOCRINI DEL PANCREAS
• RACCOLTA DATI CLINICO-PATOLOGICI E
FOLLOW-UP
• RICERCA INSTABILITÀ DEI MICROSATELLITI
Marcatori utilizzati:
• BAT 25 (INTRONE GENE MSH2)
• BAT 26 (INTRONE GENE KIT)
MICRODISSEZIONE MANUALE DA SEZIONI DI TESSUTO IN PARAFFINA,
AMPLIFICAZIONE PCR UTILIZZANDO PRIMERS FLUORESCENTI E LETTURA
CON ABI PRISM 310 GENETIC ANALYZER, FOSTER CITY CALIFORNIA
RISULTATI
ADENOCARCINOMI DUTTALI
• 177 PAZIENTI: 100 ♀ , 77 ♂
• ETÀ MEDIA 61 ANNI (RANGE 27-94)
• TOPOGRAFIA: 152 TESTA DEL PANCREAS
19 CORPO DEL PANCREAS
6 CODA DEL PANCREAS
• GRADO ISTOLOGICO
G1=8; G2=98; G3=70; G4=1;
• TNM
T1N0=2; T1N1=1; T2N0=1; T2N1=2; T3N0=39; T3N1=114;
T3N1M1=3;T3NX=2; T4N0=4; T4N1=9;
• STADIO I=3; II=39; III=118; IVA=14; IVB=3;
• MALATTIA RESIDUA
R0=117; R1=48; R2= 12;
• 164 PAZIENTI CON FOLLOW-UP MEDIO DI 16 MESI
(RANGE 0,4-156)
RISULTATI
ADENOCARCINOMI DUTTALI
175 CASI: STABILI (MSI-)
MLH1+, MSH2+,MSH6+
N
T
1 CASO:
INSTABILE (MSI+)
MLH1+, MSH2+, MSH6+
1 CASO:
INSTABILE (MSI+)
MLH1-, MSH2+,MSH6+
N
T
MLH1
• MASCHIO, 48 ANNI
• NEOFORMAZIONE PERIAMPOLLARE
•
•
•
•
ADENOCARCINOMA DUTTALE
G3
T3N1M0
PAZIENTE DECEDUTO A 16 MESI DALLA DIAGNOSI.
MORFOLOGIA NON ASCRIVIBILE AL GRUPPO DEI
CARCINOMI MIDOLLARI
RISULTATI
TUMORI ENDOCRINI DEL PANCREAS
• 84 PAZIENTI: 41 ♀ , 43 ♂
• ETÀ MEDIA 52 ANNI
• TOPOGRAFIA: 46 TESTA DEL PANCREAS
21 CORPO DEL PANCREAS
16 CODA DEL PANCREAS
• 69 TUMORI NON FUNZIONANTI
• 15 TUMORI FUNZIONANTI (11 Insulinomi, 1 Vipoma, 2
Gastrinomi, 1 Glucagonoma)
• 42 NEOPLASIE ENDOCRINE BEN DIFFERENZIATE:
15 A COMPORTAMENTO BIOLOGICO BENIGNO (WHO)
27 A COMPORTAMENTO BIOLOGICO INCERTO (wHO)
42 CARCINOMI ENDOCRINI:
39 BEN DIFFERENZIATI SEC. WHO
3 SCARSAMENTE DIFFERENZIATI SEC. WHO
• FOLLOW-UP MEDIO DI 21 MESI
RISULTATI
TUMORI ENDOCRINI DEL PANCREAS
UN SOLO CASO HA PRESENTATO INSTABILITÀ
PER ENTRAMBE LE SONDE ( BAT25 E BAT 26).
• FEMMINA, 48 ANNI
• PREGRESSA PARATIROIDECTOMIA
SUBTOTALE PER ADENOMI
MULTIPLI (MEN1?)
• RESEZIONE INTERMEDIA PER
NEOPLASIA SOLIDA DEL
DIAMETRO DI CM 1,9
• NEOPLASIA ENDOCRINA BEN
DIFFERENZIATA A
COMPORTAMENTO BIOLOGICO
BENIGNO SEC WHO
• SINDROME MEN1 NON
CONFERMATA
CONCLUSIONI
L’INSTABILITÀ DEI MICROSATELLITI NON È
IMPLICATA NELLA PATOGENESI
DELL’ADENOCARCINOMA DUTTALE
SPORADICO E DELLE NEOPLASIE
ENDOCRINE DEL PANCREAS.
LA VIRTUALE ASSENZA DI MSI IN QUESTI TUMORI
PANCREATICI E IN PARTICOLARE
NELL’ADENOCARCINOMA DUTTALE, POTREBBE
VALORIZZARE LA DISTINZIONE PATOGENETICA DEL
CARCINOMA MIDOLLARE DEL PANCREAS.