Protocollo n°22 del 26 Marzo 2012 Oggetto: Valutazione sulla base dello standard ASTM E2149 dell’attività antimicrobica del film HYDROLENE® LTFB contenente additivi antimicrobici a base di argento VALUTAZIONE DELL’ATTIVITÀ ANTIMICROBICA SECONDO LO STANDARD ASTM E2149 Background ECOPOL ha sperimentato l’uso di additivi antimicrobici a base di argento per varie applicazioni. A questo scopo sono stati analizzati due differenti campioni sottoforma di granulo e di film: un campione di controllo di Hydrolene® LTFB senza additivo, ed un campione di Hydrolene® LTFB contenente l’1% di additivo antimicrobico. I campioni sono stati realizzati secondo il processo produttivo di ECOPOL, ed il compound ha mostrato una buona processabilità. I campioni sono stati valutati in base alla crescita di S. aureus, secondo lo standard ASTM E2149. Test di Suscettibilità Per testare l’efficacia dei campioni con gli additive a base d’argento, la crescita batterica è stata valutata utilizzando lo “Standard test method for determining the antimicrobial activity of immobilized antimicrobial agents under dynamic contact conditions” (ASTM E2149). In accordo alla suddetta metodologia, 0,1 g di ogni campione sono stati introdotti in provette contenenti 10 mL di tampone fosfato a pH=7,2. Le provette sono poi state inoculate con ca. 1∙105 cellule/mL di S. aureus (CECT 86,
ATCC 12600) in fase di transizione e quindi incubate in un agitatore a piattaforma rotante (160 rpm) a 25ºC per 24h. Le cariche batteriche sono state enumerate secondo la sub‐coltivazione su piastre di TSA. La Tabella I evidenzia le unità formanti colonie (CFU) di ogni campione dopo il periodo di incubazione, sia nei campioni di controllo (film di PVOH senza additivo) che nei campioni nei quali è stato incorporato l’additivo. Inoltre, sono state calcolate la media e la percentuale di riduzione. Tabella I. Capacità antimicrobica dei campioni testati contro la crescita di S.aureus dopo 24 h a 25ºC Campioni CFU/mL CFU/mL Media % riduzione* Controllo PVOH ECOPOL 5.20E+06 5.89E+06 5.55E+06 ‐ LTFB PVOH + 1% di additivo 1.20E+04 5.00E+03 8.50E+03 99.85 Controllo senza polimero 3.61E+06 ‐ 3.61E+06 ‐ * % Riduzione: (CFU/mL controllo‐ CFU/mL campione)/CFU/mL controllo *100 Dai risultati ottenuti, è possibile osservare che alle condizioni impiegate i campioni senza additivo hanno mostrato una crescita ottimale dopo 24 h di incubazione. In presenza dell’additivo, le unità formanti colonie sono invece diminuite approssimativamente di 3 unità logaritmiche rispetto alla popolazione microbica finale riscontrata nei campioni di controllo inducendo quindi una riduzione microbica > 99,8 %. Il Responsabile R&D Capannori, 26 Marzo, 2012 Dr. Marco Bernabò, Phd ECOPOL S.p.A.
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