INFORMAZIONI SUL PRODOTTO
Cellule endoteliali di vena ombelicale umana (HUVEC, Human
Umbilical Vein Endothelial Cells), da pool di donatori
Testate per l’angiogenesi
Codice prodotto:
ZHC-2102
Queste cellule hanno mostrato di produrre tubuli quando associate ai fibroblasti dermici umani
testati per l’angiogenesi di Cellworks (ZHC-5102), usando terreno di semina e terreno di crescita per
angiogenesi prodotti da Cellworks (ZHA-1960 e ZHA-1970, rispettivamente). Il loro uso nella
produzione dei kit Cellworks V2a è stato convalidato.
Presentazione
Ogni flaconcino contiene un minimo di 500 000 cellule crioconservate da donatori multipli, garantite
vitali al 70% dopo lo scongelamento. Le cellule vengono congelate in un terreno contenente
crioprotettivo.
Terreni e integratori raccomandati
Confezione con terreno di crescita per cellule endoteliali di grandi vasi umani: ZHM-2953
Contiene:
terreno base per cellule endoteliali di grandi vasi umani, 500 ml
Integratore di crescita per cellule endoteliali di grandi vasi umani, 500ml
Integratore antibiotato (gentamicina/amfotericina B) concentrazione 1000x,
0,5 ml
N.B. per i dosaggi di formazione dei tubuli, si raccomanda l’uso di fibroblasti dermici umani testati
per l’angiogenesi prodotti da Cellworks (ZHC-5102), usando la confezione con terreno di semina
(ZHA-1960) e quella con terreno di crescita (ZHA-1970) per angiogenesi prodotti da Cellworks.
Densità di semina raccomandata
2500 cellule vitali per cm2
Capacità di proliferazione
Le cellule umane normali hanno durata in vitro limitata. Quando le cellule sono coltivate usando i
nostri reagenti e procedimenti raccomandati, Cellworks garantisce 10 raddoppi di popolazione.
Conservazione e mantenimento delle cellule
Il flaconcino contenente le cellule viene spedito congelato su ghiaccio secco, e se la semina non
avviene immediatamente, deve essere trasferito nella fase gassosa di un serbatoio di stoccaggio
azoto liquido.
N.B. lo stoccaggio continuo su ghiaccio secco oppure a -80 °C NON è appropriato.
Per linee guida rapide sulla coltura delle cellule prodotte da Cellworks, vedere a tergo.
Cellworks, una divisione di Caltag Medsystems ● Whiteleaf Business Centre ● 11 Little Balmer ● Buckingham ● MK18 1TF ● Regno
Unito
Tel +44 (0)1280 827460 Fax +44 (0)1280 827466 e-mail [email protected] Sito Web www.cellworks.co.uk
Partita IVA: GB 765 6661 89 Numero registrato nel Regno Unito: 4162330 Sede legale: Whiteleaf Business Centre, 11 Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF.
ZHC-2102 v1 May14
Linee guida rapide per la coltura delle cellule prodotte da Cellworks
Avvio delle colture proliferanti da cellule crioconservate
1. Preparare il terreno nel numero richiesto di matracci per coltura, e pre-equilibrare a 37 °C in incubatrice
umidificata con CO2 al 5%. N.B. Si raccomanda l’uso di 15 ml di terreno nei matracci T75, e 6 ml di terreno nei
matracci T25.
2. Preparare un bagnomaria a 37 °C.
3. Rimuovere il flaconcino contenente le cellule dall’azoto liquido e mettere in ghiaccio secco (oppure in un vaso
dewar con azoto liquido). Allentare leggermente il tappo per rilasciare la pressione e stringere di nuovo.
4. Tenere la metà inferiore del flaconcino criogenico in bagnomaria a 37 °C, verificando che il tappo non sia
sommerso. Agitare delicatamente per 1-2 minuti finché non resta solo un piccolo pezzo di ghiaccio.
5. Pulire immediatamente il flaconcino e il tappo con etanolo, e mettere sotto la cappa.
6. Pipettare immediatamente le cellule di ogni matraccio per coltura formando un arco sulla superficie del
terreno, e mescolare delicatamente quest’ultimo in modo da disperdere le cellule e ottenere una crescita
uniforme.
7. Esaminare le cellule al microscopio prima del trasferimento nell’incubatrice a CO2. Lasciare che le cellule
attecchiscano nottetempo senza disturbare il processo.
8. Dopo un massimo di 24 ore, esaminare le colture al microscopio per verificare che la semina sia riuscita, e
sostituire il vecchio terreno con terreno fresco pre-equilibrato usando 6 ml per T25 oppure 15 ml per T75. Fare
attenzione a colare il terreno su una superficie acellulare del matraccio, e mai sopra lo strato cellulare, poiché
questo può causare il distacco delle cellule.
9. Rimettere le cellule nell’incubatrice, e rialimentare con terreni di crescita freschi ogni 48 ore.
10. Mettere in sottocoltura quando le cellule raggiungono una confluenza del 60-80%, mentre stanno ancora
dividendosi attivamente.
Attenzione
Solo per uso sperimentale, non per uso terapeutico o diagnostico.
Trattare tutte le cellule umane come potenzialmente a rischio biologico e smaltire nel modo
appropriato.
Cellworks, una divisione di Caltag Medsystems ● Whiteleaf Business Centre ● 11 Little Balmer ● Buckingham ● MK18 1TF ● Regno
Unito
Tel +44 (0)1280 827460 Fax +44 (0)1280 827466 e-mail [email protected] Sito Web www.cellworks.co.uk
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ZHC-2102 v1 May14