1 SIMT-POS 027 Analisi Immnunoematologiche S.I.M.T. Viterbo Direttore Dr.ssa Tiziana Riscaldati 1 2 SIMT-POS 027 Analisi Immnunoematologiche S.I.M.T. Viterbo Direttore Dr.ssa Tiziana Riscaldati 1 SCOPO Scopo della presente procedura è quello di illustrare le analisi immunoematologiche che vengono effettuate presso il SIMT andando a descrivere le modalità attraverso le quali vengono gestite. 2 CAMPO D’APPLICAZIONE La presente Procedura si riferisce al Laboratorio di Analisi Immunoematologiche del SIMT Bel Colle di Viterbo. 3 DOCUMENTI DI RIFERIMENTO o DL 03 marzo 2005 “Protocolli per l’accertamento dell’idoneità del donatore di sangue ed emocomponenti” GU N.85, 3-4-2005 o DL 19 agosto 2005, n. 191: “Attuazione della direttiva 2002/98/CE che stabilisce norme di qualità e di sicurezza per la raccolta, il controllo, la lavorazione, la conservazione e la distribuzione del sangue umano e dei suoi componenti” o Legge 21 ottobre 2005, n.219: “Nuova disciplina delle attività trasfusionali e della produzione nazionale degli emoderivati” GU n. 251, 27-10-2005 o Raccomandazione n.R(95) 15 del Comitato dei Ministri del Consiglio d’Europa: ”Guida alla preparazione, uso e garanzia di qualità degli emocomponenti” 15^ Edizione, 2009 o Deliberazione Giunta Regione Lazio n.343 del 20 giugno 2006 “Piano Regionale Sangue e Plasma per il triennio 2006-2008” o Technical Manual. AABB. 16^ Edizione, 2009 o Standard di Medicina Trasfusionale – SIMTI, II Edizione 2010 o Linee Guida TRALI – Centro Nazionale Sangue, 1 Aprile 2011 o Manuale Operativo – NEO IMMUCOR o Metodiche prodotti NEO – IMMUCOR o Procedure di Verifica e Manutenzione – NEO IMMUCOR o Manuale di Assistenza “Don’t panic!” – NEO IMMUCOR o Foglietti Illustrativi e Master List dei reattivi e kit emodiagnostici o Marchio CE: Direttiva 98/79/CE o Standard SIMTI 2° edizione 2 3 SIMT-POS 027 Analisi Immnunoematologiche S.I.M.T. Viterbo Direttore Dr.ssa Tiziana Riscaldati 4 DESCRIZIONE ATTIVITÀ 4.1 Tipizzazione Gruppo Sanguigno Donatori Per tutti i donatori tipizzati e non, vengono eseguiti i seguenti test con metodica automatizzata in micro piastra su apparecchiatura NEO Immucor (SIMT-IO 037): ABO controllo gruppo diretto ed indiretto Definizione A1 e H (A2) per i gruppi A e AB Determinazione Rh-D D-Weak Fenotipo Rh e Kell e Cellano (Kell positivi) TAI La determinazione del gruppo completo viene effettuata mediante utilizzo di reagenti anti-A, anti-B, anti-AB, con impiego di eritrociti test A1, A2, B e O per la prova indiretta. La determinazione del tipo Rh viene effettuata utilizzando 2 diversi reagenti anti D monoclonali IgM+IgG e Rapid IgM. In caso di RhD negativo si esegue la ricerca del Dweak (Du) mediante metodica Capture. Nel caso in cui la ricerca del Dweak (Du) risulti positiva deve essere verificata la negatività del test diretto all’antiglobulina (vedi algoritmo decisionale -SIMT-IO 025), e successivamente effettuato il test D Partial con 6 antisieri per la conferma del DVI. La determinazione del fenotipo Rh e Kell viene effettuata mediante sieri anti C, e, E, e, Kell, mentre il Cellano viene eseguito sui Kell positivi con metodica Capture. La ricerca degli anticorpi irregolari (TAI), viene eseguita in micro piastra con metodica Capture (Pooled), mentre l’approfondimento e l’identificazione dei test positivi va eseguita su schedina Diamed. Per i donatori che non risultano tipizzati vengono ripetuti i seguenti test con metodica manuale su micro colonna in schedina Diamed: ABO Rh-D Fenotipo Rh e Kell Il controllo gruppo sacca ABD viene eseguito utilizzando la schedina Diamed ma con metodica automatizzata su apparecchiatura IH-1000. Criteri di attribuzione dell’RhD a. b. c. d. positività con i 2 reagenti anti-D RhD positivo; negatività con i 2 reagenti anti-D e negatività della ricerca Dweak RhD negativo negatività con i 2 reagenti anti-D e positività della ricerca Dweak RhD positivo positività con un solo anti-D e negatività/positività della ricerca Dweak: attribuzione “cautelativa” del tipo Rh-D positivo. e. accertamento del D parziale RhD positivo 3 4 SIMT-POS 027 Analisi Immnunoematologiche S.I.M.T. Viterbo Direttore Dr.ssa Tiziana Riscaldati 4.2 Tipizzazione Gruppo Sanguigno Pazienti Per i pazienti tipizzati viene eseguito il test ABO controllo gruppo con determinazione Rh-D con metodica su schedina secondo quanto riportato nelle SIMT-IO 050 e SIMT-IO 023: Sui pazienti che non risultano tipizzati vengono eseguiti i seguenti test: ABO Rh-D (gruppo completo test diretto +indiretto) Fenotipo Rh e Kell (per pazienti politrasfusi in DHT e DHE, reparti ostreticia e neonatologia, Pz in età fertile) ABO controllo gruppo con determinazione Rh-D AB0 Rh D (test diretto) più D Weak per i neonati 4.3 Altre Analisi Immunoematologiche Test di Coombs Diretto TCD (eseguito con metodica in schedina). Approfondimento del TCD positivo eseguito con metodica in schedina contenente anticorpi monospecifici (IgG, IgM, IgA, C3c, C3d). Test di Coombs Indiretto TCI eseguito con metodica in schedina utilizzando come screening un pannello a 3 cellule. Approfondimento del TCI positivo eseguito con metodica in schedina utilizzando un pannello a 11 cellule con e senza enzima (vedi algoritmo decisionale SIMT- IO 025). Prova di compatibilità Cross Match eseguita con procedura in schedina mediante la tecnica del TCI. Tipizzazione altri sistemi gruppo ematici, viene eseguita con metodica in schedina nei casi particolari di Pz immunizzati. 5 INDICATORI 1 Standar d SIMTI 2010 E.2.2.1.1 2 E.2.5.1 3 E.3.2 4 E.3.3 N° Attività Caratteristiche da monitorare indicatore di controllo Controllo Conformità delle N. non conformità richieste test di richieste di test di richieste-campioni/ N. lab. e relativi lab. e dei campioni richieste campioni alle specifiche biologici definite Valutazione Performance dei N. errori-scostamenti in Esterna della sistemi e processi esercizi VEQ/ N. Qualità (VEQ) analitici gestiti esercizi VEQ effettuati Esecuzione Performance dei N. discrepanze prova delle sistemi e processi sierica/globulare/ N° tipizzazioni analitici dedicati alle tipizzazioni eseguite ematiche tipizzazioni eseguite Ricerca Performance dei N. anticorpi identificati/ Anticorpi sistemi e processi N. di test di screening Irregolari analitici dedicati alle risultati positivi ricerca Anticorpi Irregolari 4 5 SIMT-POS 027 Analisi Immnunoematologiche S.I.M.T. Viterbo Direttore Dr.ssa Tiziana Riscaldati 6 RESPONSABILITA’ Responsabilità: le responsabilità per le attività e gli operatori previsti nella presenta procedura sono indicate dalla seguente tabella secondo la priorità: C = Collabora, R = Responsabile ATTIVITA' TSLB MEDICO BIOLOGO Accettazione campioni e schede anamnestiche donatori R R R Accettazione campioni e richieste esami Pazienti R R R Processazione campioni: avvio seduta analitica R C C Controllo gruppo unità: accettazione sacche e avvio seduta analitica R C C Validazione e controllo finale R R R Refertazione C R R Rilascio schede validate C R R R R Gestione test non conclusi 7 ABBREVIAZIONI Abbreviazione Descrizione DHT Day Hospital trasfusionale DHE Day Hospital ematologico MEA Malattia emolitica Autoimmune TSLB Tecnico Sanitario di Laboratorio Biomedico SIMT Servizio Immunoematologia e Medicina Trasfusionale Ab Anticorpi TAI Test anticorpi Irregolari AB0 Gruppo Sanguigno AB0 A1 A2 A3 Ax Ael .... Varianti gruppo A RhD Antigene D D-weak Varianti antigene D D-Partial, D-mosaic Varianti Antigene D Fenotipo Rh Antigeni C,c,E,e K Antigene Kell K Antigene Cellano 5 6 SIMT-POS 027 Analisi Immnunoematologiche S.I.M.T. Viterbo Direttore Dr.ssa Tiziana Riscaldati 8 ALLEGATI SIMT-IO 023 Metodiche manuali SIMT-IO 025 Algoritmo 6