USO DELLE CELLULE STAMINALI
MESENCHIMALI ADULTE IN MEDICINA
RIGENERATIVA DA SOLE OD IN
ASSOCIAZIONE AI FATTORI DI CRESCITA:
LE CERTEZZE E LE PROSPETTIVE
Fabiano Svolacchia , M.D.
Anzio ( RM )
L’utilizzo delle cellule staminali mesenchimali adulte rappresenta oggi uno
dei settori della medicina di maggior interesse in medicina rigenerativa .
Definiamo rigenerativa quella branca della medicina che ha come scopo
quello di sostituire con cellule dello stesso tipo del tessuto danneggiato o
modificato dal processo dell’ invecchiamento. L’obiettivo è quello di
ripristinare la funzionalità di questi organi/tessuti . La Medicina
rigenerativa identifica dunque l’insieme delle terapie che, nel perseguire
l’obiettivo della rigenerazione, utilizzano o comunque sfruttano le
potenzialità delle cellule staminali , sia stimolate localmente alla
duplicazione e differenziazione , sia trasferite dopo opportuna selezione ed
estrazione . Parliamo di terapie in cui le cellule stesse entrano a far parte
integrante della evoluzione migliorativa e rigenerativa dei tessuti : le
terapie cellulari. Le staminali hanno dimostrato una grande capacità di
rigenerazione dei tessuti, di rimodulazione del sistema immunitario e
posseggono, inoltre, una serie di altre qualità da cui l'organismo può trarre
beneficio . Le recenti ricerche condotte sulle cellule staminali adulte hanno
permesso di definire che queste cellule sono multipotenti, ossia possono
replicarsi e se stimolate opportunamente, differenziarsi in specifiche e
diverse popolazioni cellulari (ossee, cartilaginee, tendinee, muscolari etc) .
Sono capaci di auto-replicarsi e di proliferare illimitatamente .
Ma non è esatto parlare di cellule staminali e delle capacità rigenerative
proprie di queste come se fosse una cosa unica . Prima nell'embrione e
successivamente all'interno del nostro organismo adulto , molti tipi di
cellule staminali svolgono funzioni continue di formazione e rigenerazione
dei tessuti. Le cellule staminali mesenchimali adulte costituiscono un tipo
di cellule che possono essere utilizzate in medicina rigenerativa . Queste
cellule sono reperibili in molti tessuti del nostro organismo ed hanno la
capacità una volta aumentate di numero e differenziate ( indirizzate ad
uno specifico tessuto) di rigenerarlo in parte o interamente . Questo può
accadere anche a distanza dal tessuto bersaglio. Le cellule mesenchimali
adulte sono caratterizzate da una morfologia simile a quella dei fibroblasti
e sono cellule multipotenti , in grado replicarsi .
Queste caratteristiche hanno causato un crescente interesse verso quelle
prospettive terapeutiche basate sulla capacità rigenerativa e riparativa di
organi e tessuti, che le cellule staminali offrono . Alcuni studi hanno
dimostrato che le MSC sono dotate di potere rigenerativo e che possono
essere ottenute da diversi tessuti, come midollo osseo, sangue periferico,
cordone ombelicale, tessuto adiposo e derma .Il midollo osseo contiene
cellule staminali mesenchimali o stromali (MSC) e cellule staminali
ematopoietiche (HSC ). Le MSC sono presenti nel midollo in quantità
minore rispetto alle HSC e sono responsabili della genesi di tutte le cellule
non emopoietiche che risiedono nel midollo osseo. Per molti anni il
midollo osseo è stato considerato la principale fonte di cellule staminali
mesenchimali in grado di rispondere a stimoli provenienti da lontano ed
essere richiamate da tessuti danneggiati. Tuttavia, a causa dell’invasività
delle procedure di prelievo e della progressiva riduzione con l’età del
numero di cellule isolate e del loro potenziale differenziativo, i ricercatori
si sono indirizzati verso la ricerca di nuove fonti di MSC.
Recentemente è stato dimostrato che il sangue venoso periferico può
essere considerato una fonte alternativa di cellule staminali mesenchimali .
Grazie alle loro particolari caratteristiche le MSC possono essere
considerate da utilizzare in medicina rigenerativa , in terapia cellulare ed
in ingegneria dei tessuti da sole o in associazione con biomateriali che
funzionino da impalcatura . L’elevato potenziale proliferativo in vitro, il
trofismo, la capacità antinfiammatoria, la possibilità di disporre di cellule
off-the-self ed in modo particolare la possibilità di differenziare e trans
differenziare verso cellule specializzate, se impiantate nel giusto contesto e
microambiente, fanno si che le MSC possano essere uno strumento per la
rigenerazione e la riparazione di tessuti . Infatti la cellula staminale è una
cellula capace di autorigenerarsi infinite volte , spesso per dare vita
all’organismo a cui appartiene. Nelle opportune condizioni , in seguito a
stimoli specifici queste cellule possono generare diversi citotipi
differenziati nei tessuti che le ospitano.
Le proprietà delle cellule staminali si possono riassumere in statiche e
dinamiche . Le proprietà statiche sono : l’essere indifferenziate , avere
capacità proliferativa , avere la possibilità di automantenimento , avere la
possibilità di generare progenitrici differenziate. Dinamiche perché
possono proliferare ed automantenersi e perché hanno flessibilità nella
differenziazione
Esistono quattro tipi di cellule staminali: embrionali, fetali, degli annessi
embrionali ed adulte. Le cellule staminali embrionali sono cellule
indifferenziate. Le cellule staminali fetali si trovano negli stadi tardivi
dell'embrione e nel feto e sono le cellule che in utero provvedono
all'accrescimento dei tessuti. Altre cellule con caratteristiche che vanno
dalla multipotenza all'unipotenza si possono trovare negli annessi
embrionali (cordone ombelicale, placenta, sacco amniotico).
Le cellule staminali embrionali sono totipotenti, ossia possono
differenziarsi in tutti i tessuti , fino allo stadio di morula a 8 blastomeri,
dopodiché diventano pluripotenti, che sono in grado di differenziarsi in
uno qualsiasi dei tre foglietti embrionali ma non negli annessi embrionali.
Sono pluripotenti le cellule della massa interna della blastocisti rivestita
dal trofoblasto. Le cellule staminali multipotenti sono in grado di
differenziare in un numero di tipi cellulari limitato al tessuto in cui
risiedono; appartengono a questa classe le cellule ematopoietiche (HSC) e
le cellule mesenchimali (MSC).
Con "cellule staminali adulte" vengono indicate le cellule staminali
derivate dai tessuti di organismi adulti, per distinguerle da quelle di origine
embrionale.
Le cellule staminali adulte sono cellule non differenziate in grado sia di
autoreplicarsi , cioè dividersi in modo simmetrico dando origine a due
cellule uguali alla cellula di partenza , sia sotto l'influenza di particolari
stimoli, di differenziare , dando origine a cellule specializzate proprie del
tessuto in cui sono localizzate o nel nostro caso , trasferite . Normalmente
il differenziamento non avviene direttamente, ma attraverso la generazione
di cellule con caratteristiche intermedie ed orientamento già ben definito
che vengono chiamate progenitori/precursori o trans amplifying cells.
Questo processo avviene per divisione asimmetrica o per divisione
simmetrica seguita da un dedifferenziamento della cellula progenitrice in
staminale: questo garantisce la presenza continua di un pool di staminali
nella nicchia di appartenenza. Il ruolo principale delle cellule staminali è
quello di garantire il fisiologico ricambio delle cellule "invecchiate" (tissue
renewing) e di ripristinare le cellule eventualmente danneggiate o morte a
seguito di traumi o malattie.
In particolare le cellule staminali umane adulte non presentano i problemi
etici e di sicurezza derivati dall'utilizzo di quelle embrio-fetali, in quanto
non richiedono il sacrificio di un intero organismo e non sono
tumorigeniche.
Infatti le staminali adulte sono isolate da tessuti dell'organismo e possono
essere usate in autologous setting eludendo il problema della risposta
immunologica e del rigetto . Le MSC sono le cellule staminali adulte ad
oggi più studiate in quanto presentano caratteristiche proprie, in aggiunta a
quelle di staminali derivanti da altri tessuti/organi.
Le cellule sono definite in funzione alle molecole di superficie, per lo più
glicoproteine, espresse sulla loro membrana cellulare. Queste molecole
sono usate comunemente come marker cellulari e sono dette “cluster di
differenziazione” (CD). A oggi sono stati identificati più di 320 CD.
Generalmente una combinazione di marker è in grado di caratterizzare un
solo tipo cellulare, che viene quindi descritto come avente questi marker.
La classificazione cellulare mediante l’uso di CD è stata applicata anche
alle cellule staminali . Fenotipicamente le MSCs esprimono un certo
numero di marcatori che, sfortunatamente però, non sono specifici per
ciascuna MSC. Le MSCs adulte non esprimono i marcatori delle cellule
ematopoietiche (CD45, CD34, CD14, CD11). Inoltre non esprimono le
molecole co-stimolatorie CD80, CD86, CD40 o molecole di adesione
CD31 (platelet/endothelial cell adhesion molecule [PECAM]-1), CD18
(leukocyte function-associated antigen-1 [LFA]-1), o CD56 (neuronal cell
adhesion molecule-1). Possono esprimere i marker CD105 (SH2), CD73
(SH3/a), CD44, CD90 (Thy-1), CD71, Stro-1, molecole di adesione
CD106 (vascular cell adhesion molecule [VCAM]-1), CD166 (activated
leukocyte cell adhesion molecule [ALCAM]), molecole di adesione
intracellulare (ICAM)-1 e CD29 .
In particolar modo è stato osservato che le MSC sono:
- facilmente isolabili grazie alla loro capacità adesiva;
- facilmente separabili da altre tipologie cellulari grazie all'espressione di
un set di marcatori di membrana specifici (CD44+, CD90+,
CD105+166+73+, CD34-, CD45-31-14-);
- facilmente espandibili in vitro in quanto presentano un elevato potenziale
replicativo ;
- in grado di espletare funzioni immunosuppressive e immunomodulatorie;
- in grado di migrare spontaneamente nei tessuti di origine ed anche
selettivamente in tessuti danneggiati (multiorgan homing capacity/
trofismo ). In sede di danno promuovono la rigenerazione del tessuto
compromesso sia mediante differenziamento che secrezione paracrina di
fattori anti infiammatori .
Inoltre presentano una spiccata plasticità funzionale ed un potenziale
differenziativo multilieneage .
In tutti i tessuti esiste una presenza di cellule staminali per preservare
l’omeostasi del tessuto stesso. Le cellule staminali mesenchimali sono già
state isolate da diversi tessuti e testate per il differenziamento in diverse
linee cellulari .
Ovviamente vi sono delle differenze tra tessuto e tessuto e durante il
prelievo per la estrazione è necessario preservare nei tessuti il pool
presente per non impoverire il pool stesso . Le cellule che si prelevano e
che vengono reimpiantate devono mantenere e possedere una alta capacità
proliferativa , differenziativa e con la possibilità eventuale di interattività
con biomateriali .
E’ dimostrato che all’interno di un tessuto differenziato i progenitori
mesenchimali hanno delle caratteristiche diverse rispetto dalle
differenziate : hanno una dimensione ridotta con alta complessità
citoplasmatica . La staminale infatti ha un controllo post trascrizionale ,
cioè trascrive tutti i geni , ma andrà a tradurre solo quelle proteine tipiche
del tessuto di appartenenza . Queste sono in grado di neovascolarizzare e
di trasformarsi verso il citotipo del tessuto in cui sono iniettate .
Potenzialmente producono una serie di fattori autocrini ( che influiscono
sulla cellula stessa ) e paracrini ( che influiscono su cellule vicine ) .
Attraverso le integrine , che rappresentano la modalità di interconnettersi
con le cellule vicine , riconoscono il tessuto in cui sono state impiantate e
producono come nel tessuto . Come sopra detto esprimono determinati
recettori di superficie .
Il processo sistemico dell’invecchiamento produce delle variazioni cutanee
, intrinseche delle cellule : minore capacità di smaltimento dei ROS ,
variazioni ormonali e delle caratteristiche della cute . L’utilizzo delle MSC
riduce gli effetti delle aggressioni a livello cellulare.
Oggi le metodiche di estrazione delle staminali per un utilizzo in medicina
estetica , è divenuto di estrema attualità . Infatti un semplice prelievo di un
frustolo di tessuto di 1 mm , viene inserito in un macchinario che lo
disgrega . Disgregandolo rilascia una sospensione di staminali attive .
Questa sospensione contiene da 50.00 ad 80.000 cellule multipotenti (
MSC ) in grado di differenziarsi una volta inserite nel tessuto che
intendiamo rigenerare mediante un apporto di MSC . Recentemente , come
sopra ricordato , è stato dimostrato che il sangue venoso periferico può
essere considerato una fonte alternativa al midollo osseo per l’isolamento
di cellule staminali mesenchimali .
Si pensa che le MSC riescano a evitare il processo differenziativo tipico
delle cellule durante lo sviluppo embrionale e a colonizzare appropriate
nicchie; queste ultime avrebbero la funzione sia di mantenere la
potenzialità delle cellule nella vita adulta sia di limitarne i processi di
differenziamento.
Le indicazioni cliniche di questa metodica sono : rughe , atonia tissutale ,
cheloidi , cicatrici , smagliature , vitiligine , ustioni , piaghe , ecc.
L’utilizzo , unito a fattori di crescita è potenzialmente in grado , oltre che
di ottenere un alta replicazione dopo l’impianto anche di modificare
aumentandola la produzione dei componenti fondamentali della matrice e
dei prodotti di rigenerazione tipici del tessuto. Propongo l’utilizzo di
concentrato piastrinico, sia nella sua forma liquida sia in quella gelatinosa,
come matrice per l’applicazione di cellule staminali. Lo scopo è di
ottenere, dalle piastrine debitamente attivate, la liberazione di diversi
fattori di crescita necessari per la differenziazione delle cellule
multipotenti in modo da accelerare la crescita e l’impianto delle cellule
staminali .
I fattori di crescita liberati dalle piastrine, infatti, hanno dimostrato di
possedere la capacità di favorire la differenziazione delle cellule staminali
verso il destino cellulare e di promuovere l’angiogenesi .
L’utilizzo combinato di MSC e di PRP ha come importante vantaggio che
entrambi i biomateriali sono due composti autologhi, non tossici e
biodegradabili.
La rigenerazione tissutale è un processo molto complesso che vede
coinvolti numerosi meccanismi cellulari e molecolari. In condizioni
fisiologiche, le cellule implicate producono una serie di molecole che
consentono la rigenerazione tissutale e che, a loro volta, influenzano le
cellule che intervengono in questo processo.
Le piastrine sono frammenti citoplasmatici fondamentali poiché
possiedono, oltre che di un ruolo nell’emostasi, proprietà proinfiammatorie, regolatrici e rigenerative mediate dall’interazione con
alcune cellule ( neutrofili e cellule endoteliali) e dalla liberazione di fattori
di crescita (GF), chemochine e altre molecole regolatrici.
Le piastrine rilasciano numerosi GF e altre molecole coinvolte nella
guarigione
I GF principalmente secreti delle piastrine sono il Platelet-derived Growth
Factor (PDGF), il Transforming Growth Factor β1 (TGF-β1), il
Transformig Growth Factor β2 (TGF-β2), l’Epidermal Growth Factor
(EGF), il Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF), l’Insulin-like
Growth Factor di tipo 1 (IGF-I) e l’Hepatocyte Growth Factor (HGF) .
Questi peptidi inducono chemiotassi, proliferazione e differenziazione
cellulare, neovascolarizzazione e sintesi di ECM che favoriscono la
risoluzione della flogosi e del processo di rigenerazione tissutale.
Il concentrato piastrinico o plasma arricchito di piastrine (PRP, Platelet
Rich Plasma) è un prodotto ricavato dal sangue che si presenta come un
concentrato autologo di piastrine sospese in un piccolo volume di plasma
ed è pertanto considerato un emoderivato, secondo quanto definito dalla
normativa vigente in materia .
Il PRP, per essere definito tale, deve essere di origine autologa, in caso
contrario la presenza di membrane cellulari di prodotti omologhi, che
fungerebbero da elementi antigenici, scatenerebbe una reazione
immunitaria. Contiene numerose molecole che rivestono un ruolo di
fondamentale importanza nel processo di rigenerazione tissutale; alcune di
queste molecole sono rappresentate dai fattori contenuti nei granuli α
piastrinici mentre altre da proteine del sangue, come la fibrina, la
fibronectina e la vitronectina .
Il vantaggio dato dall’impiego del PRP è dovuto alla concentrazione
soprafisiologica di fattori di crescita che è in grado di incrementare la
velocità di riparazione delle ferite, di ridurre l’infiammazione associata al
trauma e di ridurre al minimo la produzione di tessuto cicatriziale.
Numerosi studi sperimentali e clinici, realizzati in questi anni sia in
medicina umana che non , hanno permesso di investigare in modo
approfondito l’efficacia del concentrato piastrinico e la possibilità di
utilizzarlo routinariamente come supporto terapeutico per diverse
patologie.
Recentemente, l’impiego di PRP autologo per stimolare la rigenerazione
tissutale, è aumentato in ambito chirurgico in medicina umana unito alle
MSC .Per questo motivo è importante conoscere i processi responsabili
della genesi delle piastrine (PLT), i meccanismi biochimici e cellulari
coinvolti alla riparazione tissutale, i metodi impiegati per la preparazione e
l’impiego clinico del PRP.
L’inoculazione demica di MSC e PRP è sicura e non induce nell’ospite
alcuna reazione di tipo immunitario o altri effetti collaterali locali o
sistemici. Il trattamento dell’invecchiamento con MSC e PRP ,
l’associazione quindi di questi biomateriali determina un potenziamento
del processo di guarigione inteso come miglioramento del derma e
dell’epidermide per l’effetto sinergico che in grado di migliorare
l’efficacia d’azione .
BIBLIOGRAFIA
Adamo S. 2002 Tessuti connettivi. Tessuto connettivo propriamente detto in “Istologia” di V. Monesi Piccin editore
2002 V edizione III ristampa 435-488
Anitua E. 1999 Plasma rich in Growth Factors: preliminary results of use in the preparation of future sites for implants.
The International Journal of Oral & Maxillofacial Implants,; n°14; p 529-535.
Anitua E, Andia I, Ardanza B, Nurden P, Nurden AT. 2004 Autologous platelets as a source of proteins for healing and
tissue regeneration. Thromb Haemost, n°91; p 4-15.
Anitua E, Andia I, Sanchez M, et al. 2005 Autologous preparations rich in growth factors promote proliferation and
induce VEGF and HGF production by human tendon cells in culture. J Orthop Res, 2005; n°23; p 281-286.
Anitua E., Sanchez M., Nurden A.T., Nurden P., Orive G., Andia I. 2006 New insights into and novel application for
platelet-rich fibrin therapies. Trends in Biotechnology 24 (5), 227-234.
Anitua E., Sanchez M., Orive G., Andia I. 2007 The potential impact of the preparation rich in growth factors (PRGF)
in different medical fields. Biomaterials 28, 4551-4560.
Arendt J., Gazdzik T.S., Szczepanski T., Bielecki T.M. 2007 Antibacterial effect of autologous platelet gel enriched
with growth factors and other active substances: an in vitro study. Journal of Bone and Joint Surgery 89(3), 417-420.
Bieback K, Kern S, Klüter H, Eichler H. 2004 Critical parameters for isolation of mesenchymal stem cells from
umbilical cord blood. STEM CELLS; 22: 625-634.
Borzini P., Mazzucco L., Cattana E. 2004 Platelet gel: clinical use and unanswered question Blood Transfusion 2, 1014.
Chaer R. A., Graham J.A., Mureebe L. 2006 Platelet function and pharmacologic inhibition. Vasc Endovasc Surg 40,
261-267
Crane D. 2008 Platelet rich plasma (PRP) matrix grafts Practical Pain Management 8, 12-27.
Csaki C., Matis U., Shakibaei M. 2008 Cartilage formation of mesenchymal stem cells through co-colture with primary
isolated chondrocytes: potential applications in regenerative medicine. In Atti del 14th ESVOT Congress Munich
10th-14th September 2008 295.
Dean H. et al 1997 Platelet gel: an autologous alternative to fibrin glue with applications in oral and maxillofacial
surgery J Oral Maxillofac Surg 55, 1294- 1299.
Denaro V., Vadalà G., Di Martino A., Papapietro N., Tirindelli M.C. 2009 Uso del concentrato di cellule midollari
arricchito con gel di fibrina ricco in piastrine per artrodesi vertebrale posterolaterale In Atti del XI Congresso
nazionale IORS, Ancona 12-13 giugno, 25.
Diamant J, Keller A, Boer E, Lutt M, Arridge RG. 1972 Collagen;
ultrastructure and its relation to mechanical properties as a function of ageing.
Proc. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. 180: 293-315.
Dijkstra-Tiekstra M.J., van der Schoot C.E., Pieterst R.N.I., Reesink H.W. 2005 White blood cell fragments in platelet
concentrates prepared by the platelet-rich plasma or buffy-coat methods Vox sanguinis 88, 275-277.
Dohan Ehrenfest D.M., Choukroun J. 2007 PRP, cPRP, PRF, PRG, PRGF,FC...How to find your way in the jungle of
platelet concentrates? Oral surgery, oral medicine, oral pathology, oral radiology and endodontology 103(3), 305306.
Dohan Ehrenfest D.M., de Peppo G.M., Doglioli P., Sammartino G. 2009 Slow release of growth factors and
thrombospondin-1 in Choukroun's plateletrich fibrin (PRF): a gold standard to achieve for all surgical platelet
concentrates technologies. Growth Factors 27(1), 63-69.
Dohan Ehrenfest D.M., Rasmusson L., Albrektsson T. 2009 Classification of platelet concentrates: from pure plateletrich plasma (P-PRP) to leucocyte- and platelet-rich fibrin (L-PRF) Trends in Biotechnology 27(3), 158-167.
Douchet C., Ernou I., Zhang Y., llense J.R., Begot L., Holy X., Lataillade J.J. 2005 Platelet lysates promote
mesenchymal stem cell expansion: a safety substitute for animal serum in cell-based therapy applications. Journal of
cellular physiology 205, 228-236.
El Tamer MK, Reis RL. 2009 Progenitor and stem cells for bone and cartilage regeneration. J Tissue Eng Regent Med
(in press).
Everts P.A., Hoffmann J., Weibrich G., Mahoney C.B., Schonberg J.P., van Zundert A. 2006 Differences in platelet
growth factor release and leucocyte kinetics during autologous platelet gel formation. Transfusion Medicine 16(5), 363368.
Everts P.A. 2007 Autologous platelet-leukocyte enriched gel basics and efficacy: A novel method to support soft tissue
and bone healing PhD Thesis Catharina Hospital Eindhoven, Netherlands.
Everts P.A., Devilee R.J., Oosterbos C.J., Mahoney C.B., Schattenkerk M.E., Knape J.T., Van Zundert A. 2007
Autologous platelet gel and fibrin sealant enhance the efficacy of total knee arthroplasty: improved range of motion,
decreased length of stay and a reduced incidence of arthrofibrosis. Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc 15(7), 888894.
Everts P.A.M., van Zundert A., Schönberger J.P.A.M., Devilee R.J.J., Knape J.T.A. 2008 What do we use: Platelet-rich
plasma or platelet-leucocyte gel? Journal of Biomedical Materials Research Part A 85A(4), 1135-1136.
Ferrari M., Corradi A., Lazzaretti M., De’ Cillà M., Losi C.G., Villa R.,mLanfranchi A. 2007 Adult stem cells:
prospective for therapeutic application Vet Res Commun 31(1)1-8.
Ficarelli E., Bernuzzi G., Tognetti E., Bussolanti O., Zucchi A., Adorni D., De Panfilis G. 2008 Treatment of chronic
venous leg ulcers by platelet gel. Dermatologic Therapy 21, 13-17.
Fortier L.A., Mohammed H.O., Lust G., Nixon A.J. 2002 Insulin-like growth factor-I enhances cell-based repair of
articular cartilage. The Journal of Bone and Joint Surgery 84(2), 276-288.
89.
Fortier L.A. 2005 Stem cells: classifications, controversies and clinical applications. Veterinary Surgery 34, 415-423.
Fotia C., Perut F., Cenni E., Savarino L., Dallari D., Cenacchi A., Fornasari P.M., Giunti A., Baldini N. 2008 In vitro
effect of platelet gel on human bone marrow stromal cells and endothelial cells for bone engineeringprecursors In Atti
del X Congresso nazionale IORS, Messina 12-13 settembre, 16.
Fotia C., Cenni E., Avnet S., Salerno M., Baldini N. 2009 Effect of platelet rich plasma on differentiation and activation
of osteoclasts obtained from human blood precursors in Atti del XI Congresso nazionale IORS, Ancona 12- 13 giugno,
33.
Froum S.J., Fallace S.S., Tarnow D.P., Cho S. 2002 Effect of platelet-richplasma on bone growth and osseointegration
in human maxillary sinus grafts: three bilateral case reports. The International Journal of periodontics and Restorative
Dentistry 22(1), 45-54.
Fuchs E., Segre J. A. 2000 Stem cells: a new lease on life in Cell 100 (1): 143-55.
Gigante A., del Torto M., Busilacchi A., Manzotti S., Procopio A., Greco F. 2009 Platelet-rich plasma nella riparazione
muscolare in modello sperimentale su ratto In Atti del XI Congresso nazionale IORS, Ancona 12-13 giugno, 24.
Giusti I. 2006 Il gel piastrinico nella terapia adiuvante per la riparazione tissutale: il laboratorio e la clinica in Atti del
Assegno regionale di ricerca, Regione Abruzzo.
Gobbi A. 2007 L’impiego delle cellule mesenchimali autologhe e del gel piastrinico per il trattamento delle lesioni
cartilaginee. Comunicazioni dell’Oasi Bioresearch Foundation Gobbi Onlus, Milano, 29-31.
Ishida K., Kuroda R., Miwa M., Tabata Y., Hokugo A., Kawamoto T., Sasaki K., Doita M., Kurosaka M. 2007 The
regenerative effects of platelet rich plasma on meniscal cells in vitro and its in vivo application with biodegradable
gelatine hydrogel. Tissue Eng. 13(5), 1103-1107.
Issa J.P.M., Tiossi R., Mello A.S., Lopes R.A., Di Matteo M.A., Iyomasa M.M. 2007 PRP: a possibility in regenerative
therapy Int J. Morphol. 25(3), 587-590.
Jiang Y, Jahagirdar BN, Reinhardt RL, Schwartz RE, Keene CD, Ortiz- Gonzalez XR et al. 2002 Pluripotency of
mesenchymal stem cells derived from adult bone marrow. Nature; 418: 41-49.
Kanno T., Takahashi T., Tsujisawa T., Ariyoshi W., Nishihara T. 2005 Platelet-rich plasma enhances human osteoblastlike cell proliferation and differentiation. J Oral Maxillofac Surg 63, 362-369.
Kern S, Eichler H, Stoeve J, Klüter H, Bieback K. 2006 Comparative analysis of mesenchymal stem cells from bone
marrow, umbilical cord blood, or adipose tissue. STEM CELLS; 24: 1294- 1301.
Kilian O., Flesch I., Wenisch S., Taborski B., Jork A., Schnettler R., Jonuleit T. 2004 Effect of platelet growth factors
on human mesenchymal stem cells and human endothelial cells in vitro European Journal of Medical Research
9, 337-344.
Landesberg R., Burke A., Pinsky D., Katz R., Vo J. Easing S.B., Lu H.H. 2005 Activation of platelet-rich plasma using
thrombin receptor agonist peptide.
J Oral Maxillofac Surg 63, 529-535. Lana R. 2002 Handbook of Stem Cells Vole 2 “Adult and Fatal Stem Cells£
Edited by R. Lanza. Elsevier Inc. 2004.
Lee R .H., Kim B., Choi I., Kim H., Choi H. S., Suh K. et al. 2004 Characterization and expression analysis of
mesenchymal stem cells from human bone marrow and adipose tissue. Cell Physiol Biochem; 14: 311-324.
Lucarelli E., Beccheroni A., Donati D., Sangiorgi L., Cenacchi A., Del Vento A.M., Meotti C., Zambon A., Giardino
R., Fornasari P.M., Mercuri M., Picci P. 2003 Platelet-derived growth factors enhance proliferation of human stromal
stem cells. Biomaterials 24(18), 3095-3100.
Manes E., Manes C., Cantò L., Erasmo R. 2005 Le cellule staminali e i fattori di accrescimento in ortopedia e
traumatologia. G.I.O.T. 31, 197-205.Marx R.E. 2004 Platelet-rich plasma: evidence to support its use J Oral
Maxillofac Surg 62, 489-496.
Musgrave D. S., Fu F. H., Huard J. 2002 Terapia genica e ingegneria dei tessuti in chirurgia ortopedica. J Am Acad
Orthop Surg 10, 6-15.
Pittenger M. F., Mackay A. M., Beck S. C., Jaiswal R. K., Douglas R., Mosca J. D., Moorman M. A., Simonetti D. W.,
Craig S., Marshak D. R. 1999 Multilineage potential of adult Human mesenchymal stem cells. Science
284,143-147.
Prades M. 2007 Platelet rich plasma: a realistic alternative in tissue repair in Atti del SECV Proceedings.
Saldalamacchia G., Lapice E., Cuomo V., De Feo M. E., D'Agostino E., Rivellese A. A., Riccardi G., Vaccaro O. 2004
Uso del gel di piastrine autologo per la cura delle ulcere del piede diabetico. GIDM 24, 103-105.
Sanmartino G., Tia M., Marenzi G., Espedito di Lauro A., D’Agostino E., Claudio P. 2005 Use of autologous plateletrich plasma (PRP) in periodontal defect treatment after extraction of impacted mandibular third molars. J Oral
Maxillofac Surg 63, 766-770.
Sordi V. 2009 Mesenchymal stem sell hominig capacity Transplantation; 87:S42-45.
Tomohiro H., Masahito S., Yuki H., Hideki K., Satoshi T., Takashi O., Yumiko S. 2004 Investigation into centrifugal
separation for preparation of platelet rich plasma (PRP). Ohu University Dental Journal 31(4), 243-247.
Von der Mark K. 1981 Localization of collagen types in tissue Int Rev Connect Tissue Res 9, 265-324. Woodell-May J.
E., Pietzrak W. S. 2006 Platelet-rich plasma in orthopedics Orthopedic Biology and Medicine 547-558.
Yamamoto N, Akamatsu H, Hesegawa S, Yamada T, Nakata S, Ohkuma M et al. 2007 Isolation of multipotent stem
cells from mouse adipose tissue. J Dermatol Sci: 48: 43-52.
Zuk P. A., Zhu M., Ashjian P., De Ugarte D. A., Huang J. I., Mizuno H. et al. 2002 Human adipose tissue is a source of
multipotent stem cells. Molecular Biology of the Cell; 13: 4279-4295.
Role of stem cell research in therapeutic purpose--a hope for new horizon in medical biotechnology Saxena AK, Singh
D, Gupta J. Center of Experiential Medicine and Surgery, Faculty of Medicine, Institute of Medical Sciences, Banaras
Hindu University, Varanasi-221005, India. [email protected] , J Exp Ther Oncol. 2010;8(3):223-33.
Stem cells: a revolution in therapeutics-recent advances in stem cell biology and their therapeutic applications in
regenerative medicine and cancer therapies
Mimeault M, Hauke R, Batra SK.
Department of Biochemistry and Molecular Biology, University of Nebraska Medical Center, Omaha, Nebraska, USA.
[email protected]
Clin Pharmacol Ther. 2007 Sep;82(3):252-64. Epub 2007 Aug 1.
J Allergy Clin Immunol. 2010 Feb;125(2 Suppl 2):S336-44. Epub 2010 Jan 12
Embryonic and adult stem cell therapy
Brignier AC, Gewirtz AM.
Division of Hematology/Oncology, Department of Medicine, and Abramson Family Cancer Research Institute,
University of Pennsylvania School of Medicine, Philadelphia, PA 19104, USA. [email protected]
The bioethics of stem cell research and therapy
Hyun I.
Department of Bioethics, Case Western Reserve University, School of Medicine, 10900 Euclid Avenue, Cleveland,
Ohio 44106-4976, USA. [email protected]
Pathol Biol (Paris). 2009 Nov-Dec;57(7-8):555-9. Epub 2009 Oct 31
Induced pluripotent stem cells (iPS cells)
Germain D.
Université Claude-Bernard Lyon-I, 8, avenue Rockefeller, 69008 Lyon, France. [email protected]
Endocr Rev. 2009 May;30(3):204-13. Epub 2009 Apr 14
Ethical issues in stem cell research
Lo B, Parham L.
University of California San Francisco Program in Medical Ethics, San Francisco, California 94143, USA.
[email protected]
Gynecol Obstet Fertil. 2009 Jul-Aug;37(7-8):620-6. Epub 2009 Jul 4.
Human embryonic stem cells: from the human embryo transgressed to the regenerative medicine of tomorrow
De Vos J, Assou S, Tondeur S, Dijon M, Hamamah S.
Institute for Research in Biotherapy, hôpital Saint-Eloi, CHU de Montpellier, 34000 Montpellier, France.
Int J Dev Biol. 2009;53(2-3):393-409.
Foetal germ cells: striking the balance between pluripotency and differentiation.
Western P.
Murdoch Childrens Research Institute, ARC Centre of Excellence in Biotechnology and Development, Department of
Paediatrics, University of Melbourne, Royal Childrens Hospital, Melbourne, VIC., Australia.
[email protected]
J R Soc Interface. 2010 Aug 25. [Epub ahead of print]
Biological characteristics of stem cells from foetal, cord blood and extraembryonic tissues.
Abdulrazzak H, Moschidou D, Jones G, Guillot PV.
Institute of Reproductive and Developmental Biology, Imperial College London, , London W12 0NN, UK.
Ann N Y Acad Sci. 2010 Sep;1205(1):17-22. doi: 10.1111/j.1749-6632.2010.05659.x.
Umbilical cord blood stem cells: what to expect.
Zhong XY, Zhang B, Asadollahi R, Low SH, Holzgreve W.
Laboratory for Gynecologic Oncology, Women's Hospital/Department of Biomedicine, University of Basel,
Switzerland. [email protected]
Best Pract Res Clin Haematol. 2010 Jun;23(2):291-303.
Tissue regeneration potential in human umbilical cord blood.
Arien-Zakay H, Lazarovici P, Nagler A.
Chaim Sheba Medical Center, Tel-Hashomer, Israel. [email protected]
Reprod Biol Endocrinol. 2003 Nov 13;1:102.
Tissue engineering and cell based therapies, from the bench to the clinic: the potential to replace, repair and regenerate.
Fodor WL.
Center for Regenerative Biology and Department of Molecular and Cell Biology, University of Connecticut, Storrs, CT
06250-4243, USA. [email protected]
J Cell Sci. 2006 Jun 1;119(Pt 11):2204-13. Epub 2006 May 9.
Mesenchymal stem cells reside in virtually all post-natal organs and tissues.
da Silva Meirelles L, Chagastelles PC, Nardi NB.
Departamento de Genética, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, Brazil.
Related J Stem Cells. 2009;4(2):105-21.
Adult stem cells: a clinical update.
Totey S, Totey S, Pal R, Pal R.
Stempeutics Research Malaysia Sdn Bhd, LG-E-2A, Enterprise-4, Technology Park Malaysia, Bukit Jalil, 57000, Kuala
Lumpur, Malaysia. [email protected]
Stem Cell Rev. 2006;2(2):163-8.
Cord-blood mesenchymal stem cells and tissue engineering.
Cetrulo CL Jr.
Institute of Reconstructive Plastic Surgery, Laboratory of Vascular Tissue Engineering and Microvascular Research,
New York University, New York, NY, USA. [email protected]
Institute of Reconstructive Plastic Surgery, Laboratory of Vascular Tissue Engineering and Microvascular Research,
New York University, New York, NY and Long Island Plastic Surgical Group, Garden City, NY
Rheumatology (Oxford). 2008 Feb;47(2):126-31. Epub 2007 Nov 6.
Human bone marrow mesenchymal stem cells in vivo.
Jones E, McGonagle D.
The Leeds Institute of Molecular Medicine, University of Leeds, Leeds, UK.
Arthritis Res Ther. 2007;9(1):204.
Mesenchymal stromal cells. Biology of adult mesenchymal stem cells: regulation of niche, self-renewal and
differentiation.
Kolf CM, Cho E, Tuan RS.
IStem Cells. 2008 Sep;26(9):2287-99. Epub 2008 Jun 19.
In search of the in vivo identity of mesenchymal stem cells.
da Silva Meirelles L, Caplan AI, Nardi NB.
Department of Genetics, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Avenida Bento Goncalves 9500, 91501-970 Porto
Alegre RS, Brazil.
Haematologica. 2009 Feb;94(2):258-63. Epub 2008 Dec 23.
Mesenchymal stem cells: the fibroblasts' new clothes?
Haniffa MA, Collin MP, Buckley CD, Dazzi F.
Hematological Sciences, Institute of Cellular Medicine, Newcastle University, Newcastle Upon Tyne.
Chirurg. 2010 Sep;81(9):826-32.
[Stem cells from fatty tissue : A new resource for regenerative medicine?]
[Article in German]
Kuhbier JW, Weyand B, Sorg H, Radtke C, Vogt PM, Reimers K.
Klinik für Plastische, Hand- und Wiederherstellungschirurgie, Medizinische Hochschule Hannover, Deutschland.
Cancer Res. 2008 Jun 1;68(11):4229-38.
Long-term in vitro expansion alters the biology of adult mesenchymal stem cells.
Izadpanah R, Kaushal D, Kriedt C, Tsien F, Patel B, Dufour J, Bunnell BA.
Division of Gene Therapy, Tulane National Primate Research Center, Tulane University Health Sciences Center,
Covington, Louisiana 70433, USA.
Stem Cells. 2006 Feb;24(2):462-71. Epub 2005 Aug 18.
Characterization of the optimal culture conditions for clinical scale production of human mesenchymal stem cells.
Sotiropoulou PA, Perez SA, Salagianni M, Baxevanis CN, Papamichail M.
Cancer Immunology and Immunotherapy Center, Saint Savas Hospital, 171 Alexandras Avenue, 115 22, Athens,
Greece. [email protected]
Br J Haematol. 1999 Nov;107(2):275-81.
Propagation and senescence of human marrow stromal cells in culture: a simple colony-forming assay identifies
samples with the greatest potential to propagate and differentiate.
Digirolamo CM, Stokes D, Colter D, Phinney DG, Class R, Prockop DJ.
Center for Gene Therapy, and Department of Radiation Oncology, MCP Hahnemann University, Philadelphia,
Pennsylvania 19102-1192, USA.
Stem Cells. 2007 Nov;25(11):2739-49. Epub 2007 Jul 26.
Concise review: mesenchymal stem cells: their phenotype, differentiation capacity, immunological features, and
potential for homing.
Chamberlain G, Fox J, Ashton B, Middleton J.
Leopold Muller Arthritis Research Centre, School of Medicine, Keele University, Robert Jones and Agnes Hunt
Orthopaedic Hospital, Oswestry, Shrops SY10 7AG, UK.
Exp Biol Med (Maywood). 2001 Jun;226(6):507-20.
Mesenchymal stem cells.
Minguell JJ, Erices A, Conget P.
Unidad de Biología Celular, INTA, Universidad de Chile, Casilla 138, Santiago 11, Chile. [email protected]
Blood. 2003 Apr 15;101(8):2999-3001. Epub 2002 Dec 12.
Mesenchymal stem cells distribute to a wide range of tissues following systemic infusion into nonhuman primates.
Devine SM, Cobbs C, Jennings M, Bartholomew A, Hoffman R.
Section of Hematology/Oncology, Department of Surgery, University of Illinois College of Medicine, Chicago, USA.
[email protected]
BMC Genomics. 2008 Apr 11;9:166.
Gene expression pattern of functional neuronal cells derived from human bone marrow mesenchymal stromal cells.
Tondreau T, Dejeneffe M, Meuleman N, Stamatopoulos B, Delforge A, Martiat P, Bron D, Lagneaux L.
Institut Jules Bordet, Université Libre de Bruxelles, Laboratory of Experimental Hematology, 121, Bd de Waterloo,
1000 Brussels, Belgium. [email protected]
Stem Cells. 2004;22(4):487-500.
Plasticity of bone marrow-derived stem cells.
Grove JE, Bruscia E, Krause DS.
Department of Laboratory Medicine, Yale University School of Medicine, P.O. Box 8035, 333 Cedar Street, New
Haven, CT 06520-8035, USA. [email protected]
Sci Prog. 2010;93(Pt 2):113-27.
Biology and applications of mesenchymal stem cells.
Chagastelles PC, Nardi NB, Camassola M.
Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Brazil.
Int J Dev Biol. 2008;52(8):1023-32.
From bone marrow to therapeutic applications: different behaviour and genetic/epigenetic stability during mesenchymal
stem cell expansion in autologous and foetal bovine sera?
Tonti GA, Mannello F.
Department of Biomolecular Sciences, Section of Clinical Biochemistry, University Carlo Bo, I-61029 Urbino (PU),
Italy.
J Appl Genet. 2007;48(4):307-19.
Bone-marrow-derived stem cells--our key to longevity?
Ratajczak MZ, Zuba-Surma EK, Machalinski B, Kucia M.
Stem Cell Institute, University of Louisville, 500 South Floyd Street, Louisville, KY 40202, USA.
[email protected]
Folia Histochem Cytobiol. 2006;44(4):215-30.
Mesenchymal stem cells: characteristics and clinical applications.
Bobis S, Jarocha D, Majka M.
Department of Transplantation, Polish-American Institute of Pediatrics, Jagiellonian University Medical College,
Cracow, Poland.
Cell Tissue Res. 2009 Jun;336(3):501-7. Epub 2009 Apr 9.
Multiparametric comparison of mesenchymal stromal cells obtained from trabecular bone by using a novel isolation
method with those obtained by iliac crest aspiration from the same subjects.
Sanchez-Guijo FM, Blanco JF, Cruz G, Muntion S, Gomez M, Carrancio S, Lopez-Villar O, Barbado MV, SanchezAbarca LI, Blanco B, Briñon JG, del Cañizo MC.
Servicio de Hematología, Hospital Universitario de Salamanca, Salamanca, Spain.
Chang Gung Med J. 2008 May-Jun;31(3):228-36.
Applications of mesenchymal stem cells: an updated review.
Lee KD.
Department of Hematology and Oncology, Chang Gung Memorial Hospital, Chiayi, Taiwan. [email protected]
Cell Cycle. 2007 Dec 1;6(23):2884-9. Epub 2007 Sep 24.
Biochemical heterogeneity of mesenchymal stem cell populations: clues to their therapeutic efficacy.
Phinney DG.
Center for Gene Therapy, Tulane University Health Sciences Center, New Orleans, Louisiana, USA.
[email protected]
Cytotherapy. 2009;11(7):849-63.
Inhibition of myostatin promotes myogenic differentiation of rat bone marrow-derived mesenchymal stromal cells.
Geng J, Peng F, Xiong F, Shang Y, Zhao C, Li W, Zhang C.
Neurology Department, The First Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University, Guang Zhou, PR China.
Cardiovasc Res. 2010 Dec 16. [Epub ahead of print]
Urokinase receptor mediates mobilization, migration, and differentiation of mesenchymal stem cells.
Vallabhaneni KC, Tkachuk S, Kiyan Y, Shushakova N, Haller H, Dumler I, Eden G.
Department of Nephrology, Hannover Medical School, Carl-Neuberg-St 1, Hannover D-30625, Germany.
Use of MSC alone or in assotiation with PRP in the treatment of tendon injuries experimentally induced in sheep
Padova University , Faculty of Veterinary Medicine, thesis Ariella Casanova AA 2010-11
Bibliografia da internet
URL: http://www.staminafoundation.org
URL:http://www.dualtrend.it
URL:http://www.aephymed.it
URL:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed