A-Preparazione gel di agarosio:
TAE10X (TRIS BASE, ACIDO ACETICO GLACIALE, EDTA 0,5 M pH 8)
Questo tampone si utilizza sia per l’elettroforesi prolungate, poiché a differenza del
TBE10X ha una bassa capacità tamponante, sia nel processo di eluizione di frammenti DNA da gel.
1% in TAE 1X (diluendo 1:10 la soluzione madre TAE 10X in H2O distillata):
volume del gel 100 ml
concentrazione di utilizzo è di 1X.
el tampone scaldando nel forno a microonde fino al completo scioglimento,
evitando che giunga ad ebollizione.
asciare raffreddare brevemente ed aggiungere il Syber Safe
n la preparazione dei campioni da caricare.
B-Preparazione dei campioni
In ciascuna delle eppendorf contenente il campione di interesse, aggiungere loading buffer 6X
(concentrazione finale 1X) → volume finale 10 µl.
Marcatore (DNA ladder): Verrà preparato dagli esercitatori
C-Corsa elettroforetica
a 100 V.
Segnare per ogni pozzetto il risultato positivo o negativo.