Università degli Studi di Roma “Tor Vergata” U.O.C. di Ginecologia Direttore Prof. E. Piccione Tecniche di procreazione medicalmente assistita Prof.ssa L. Casadei Esami diagnostici Partner femminile Ecografia pelvica transvaginale Monitoraggio ecografico follicolare Colposcopia e pap-test Ecografia mammaria-Mammografia Istero-Ecoisterosalpingografia Laparoscopia Isteroscopia Tampone vaginale (germi comuni, trichomonas, Partner maschile Ecografia prostatica e testicolare Eco-doppler vasi spermatici Spermiogramma Spermiocultura + ABG Tampone uretrale Dosaggi ormonali: - 17bE2, FSH, LH, PRL, T, DHT candida, clamydia, micoplasma) Ricerca anticorpi gruppo TORCH HBsAg, HCV, HIV, VDRL, TPHA Dosaggi ormonali il 2°-3° gg: - 17bE2, FSH, LH, PRL, T - Progesterone (fase luteinica) - DHT, A, DHEAS, SHBG (sospetto iperandrogenismo) - FT3, FT4, TSH, Tireoglobulina Curva glicemica e insulinemica (sospetta PCOS) Tecniche di fecondazione assistita senza prelievo ovocitario IUI Intrauterine Insemination IPI Intraperitoneal Insemination ITI Intratubal Insemination Tecniche di fecondazione assistita con prelievo ovocitario e trasferimento di gameti GIFT Gamete Intrafallopian Transfer POST Peritoneal Oocyte Sperm Transfer TIUG Trasferimento Intrauterino di Gameti Tecniche di fecondazione assistita con prelievo ovocitario e trasferimento di embrioni FIVET In Vitro Fertilization-Embryo Transfer FIVET con ICSI In Vitro Fertilization-Embryo Transfer con Intracytoplasmic Sperm Injection ZIFT PROST Zygote Intrafallopian Transfer Pronuclear Stage Tubal Transfer Inseminazione intrauterina (IUI) Indicazioni Fattore cervicale Fattore maschile (medio-lieve) Sterilità inspiegata Protocolli di stimolazione IUI Step-up r-FSH Step-down 37.5-75 UI/die dal 2° gg low-dose 150 UI/die dal 2° gg IUI 12 e 36 h o 36 h dopo hCG FSH ricombinante + IUI FSH ricombinante 75 UI/die dal 2° giorno del ciclo (150 UI nel fattore tubarico unilaterale) Monitoraggio ecografico follicolare transvaginale HCG (5000 UI) in presenza di un follicolo di diametro medio maggiore o uguale a 17 mm Rapporto vaginale il giorno dell’HCG e IUI 34-36 ore dopo HCG IUI IUI Speculum monouso Materiale occorrente (in campo sterile) Guanti sterili Ciotola con sol. fisiologica Pinza Garze sterili Catetere per IUI (Kremer-Delafontaine) Inseminazione intrauterina (IUI) Percentuale di successo variabile (2.7%-20.5%) in base a: Causa di infertilità Età di entrambi i partner Durata di infertilità Ciclo di trattamento Parametri del seme GIFT (Gamete Intrafallopian Transfer) Indicazioni Fallimento IUI Fattore maschile (medio-lieve) Fattore cervicale Sterilità immunologica Alterazione captazione ovocitaria Sterilità inspiegata GIFT (Gamete Intrafallopian Transfer) Trasferimento dei gameti (ovociti e spermatozoi) nella TUBA Per via Laparoscopica Transvaginale - a mano libera - sotto controllo ecografico - sotto controllo isteroscopico Percentuale di gravidanza Percentuale di nati vivi 29.3% 20.8% Fecondazione in vitro (FIVET) Indicazioni Fattore tubarico Fattore maschile (medio) Sterilità inspiegata Endometriosi Fecondazione in vitro (FIVET) Trasferimento in utero dell’embrione/i circa 48 ore dopo l’inseminazione (ciascun ovocita è inseminato con circa 100.000200.000 spermatozoi mobili) allo stadio di 2-6 cellule Protocolli farmacologici della iperstimolazione ovarica controllata (COH) per IVF-ET Finalità Programmare il prelievo ovocitario Consentire la crescita di un numero moderato di follicoli (5-10 follicoli) Individualizzare la terapia di ciascuna paziente in base alla patologia e alla eventuale precedente risposta alla COH Prevenire il picco prematuro dell’LH Protocolli di stimolazione IVF-ET GnRH-antagonista GnRH-a Flare-up 0.4 ml/die 2°-4° g 0.2 ml/die dal 5° g 0.25 mg/die (1 foll. > 14 mm) GnRH-a “lungo” r-FSH 150-225 UI/die 2° g 1 fl depot in fase medioluteinica Monitoraggio ecografico follicolare 1° monitoraggio 6° giorno di terapia NON RISPOSTA mantenere o aumentare di 1-2f./die controllo dopo 2-3 gg. RISPOSTA (1) se follic.>10-12 m mantenere il dosaggio controllo dopo 2gg. (2) troppi follic.>12-13mm ridurre il dosaggio controllo dopo 2gg. Monitoraggio ecografico follicolare Il monitoraggio dovrebbe essere eseguito sempre dalla stessa persona o da un’equipe ben affiatata che guarda con lo stesso occhio! In presenza di 3 o più follicoli > 16-22 mm di diametro medio si somministra HCG 5000 UI Il prelievo ovocitario viene eseguito circa 34-35 ore dopo l’HCG Prelievo ovocitario per via laparoscopica Prelievo ovocitario per via vaginale Materiali occorrenti 1° servitore 2° servitore Guanti sterili non talcati Speculum monouso Ciotola con Betadine Ciotola con soluzione fisiologica Garze sterili Pinza Siringa con ago da spinale contenente carbocaina 1% Numerose siringhe (per aspirare il liquido follicolare) L’infermiera/e trasporta le siringhe contenenti il liquido follicolare dalla SO in laboratorio Ovocita Embrione a due pronuclei Embrione a 8 cellule Blastocisti Embryo-Transfer (ET) Speculum monouso Materiale occorrente (in campo sterile) Guanti sterili Ciotola con sol. fisiologica Pinza Garze sterili Catetere da ET (Frydman, Wallace) Fecondazione in vitro (FIVET) Percentuale di successo variabile (20%-25%) in base a: Età materna Causa di infertilità Numero di embrioni trasferiti PROST-ZIFT Trasferimento nella tuba dell’embrione/i allo stadio pronucleare (PROST) (18-24 ore dopo l’inseminazione) o allo stadio di zigote (ZIFT) (36-48 ore dopo l’inseminazione) PROST-ZIFT Indicazioni Fattore maschile Le stesse della FIVET (ma necessita della pervietà di almeno una tuba) Percentuale di gravidanza Percentuale di impianto 25-55% 13-20% Ménézo and Janny, 1996 Fecondazione in vitro con ICSI (FIVET con ICSI) Indicazioni Fattore maschile grave Mancata fecondazione dopo FIVET convenzionale Anticorpi antispermatozoi Fecondazione in vitro con ICSI (FIVET con ICSI) Fecondazione in vitro con ICSI (FIVET con ICSI) Fecondazione in vitro con ICSI (FIVET con ICSI) Percentuale di fecondazione 60-70% È indispensabile osservare la presenza dei due pronuclei (16-18 ore dopo la ICSI) per accertare la normale fecondazione Il numero di embrioni da trasferire dipende dall’età della donna: Se < a 37 anni 1-2 embrioni Se > 37 anni 3 o più embrioni Fecondazione in vitro con ICSI (FIVET con ICSI) Percentuale di successo (su 7610 cicli di ICSI) Percentuale di gravidanza per ciclo ICSI 27.8% - 39.8% Percentuale di parto per ciclo ICSI 22.3% - 29.2% De Vos and Van Steirteghem 1999 R I S U L T A T I