Fattori di rischio ambientale IN AMBITO FAMILIARE 1 morte inattesa=tragedia 2 morti inattese=sospette 3 morti inattese=omicidio 2 generazioni precedenti: 5 SIDS Lenoir Calenda et al. (2000). Medical Hypotheses 54: 408-411 EREDITA’ AUTOSOMICA DOMINANTE A PENETRANZA INCOMPLETA Auckland, Nuova Zelanda (2000) 1 lavoro Firenze, Italia (2002) 4 lavori Edmonton, Canada (2004) 4 lavori Yokohama, Giappone (2006) 12 lavori STORICAMENTE CITOGENETICA Machin (1974). Chromosome and perinatal death. Lancet GENETICA MOLECOLARE Ding et al. (1991). G985 mutation in MCAD. New Eng. J. Med. Schwartz et al. (2000). SCN5A and LQTS. New Engl. J. Med. Narita et al. (2001). Serotonin gene and SIDS. Pediatrics Opdal et al. (2003). IL-10 and SIDS. Hum. Immunol. Weese Mayer et al. (2004). ENS and SIDS. Ped. Research. SIDS: Does a gene exist? GENETICA e SIDS Opdal e Rognum (2004); Hunt (2005) MCAD 1. MUTAZIONI KVLQT HERG Canali del potassio MALATTIE GENETICHE SCN5A KCNE1 KCNE2 Canali del sodio MORTE C4A 2. POLIMORFISMI C4B HLA-DR2 PREDISPOSIZIONE IL-10 INTERAZIONE 5-HTTLPR CON AMBIENTE hsp mtDNA Copyright ©2004 American Academy of Pediatrics ESTRAZIONE E PURIFICAZIONE DNA 15 casi SIDS 22 controlli 10 prelievi autoptici in etanolo 5 inclusi in paraffina sangue intero ANALISI GENETICHE AMPLIFICAZIONE PCR PCR E SEQUENZIAMENTO MAO-A Serotonina MCAD Metabolismo lipidi 5-HTT Serotonina SCN5A QT lungo GSTT Detossificazione Serotonina GSTM Detossificazione TPH-2 Copyright ©2004 American Academy of Pediatrics MCAD – AcilCoA Deidrogenasi a Catena Media AAA = Sano GAA = Deficit MCAD AAA GTG GTA MCAD – AcilCoA Deidrogenasi a Catena Media Mutazione puntiforme A985G FREQUENZA OMOZIGOTI Australia 1/20.000 nati vivi USA 1/28.000 Nord Europa 1/10.000 – 50.000 Italia 1/442.000 nati vivi SCN5A (LQT3) – Canale del sodio voltaggio dipendente Ali et al. (2000). American Journal of Cardiology 85: 457-461 Sonno Gene 80.000 pb 28 Esoni Proteina di 2016 AA SCN5A – Mutazioni puntiformi Esone 16 Nessuna mutazione SEROTONINA (5 Idrossitriptamina) Neuroni serotoninergici esercitano effetto modulatorio su: FUNZIONALITA’ CARDIOVASCOLARE TONO MUSCOLARE RITMO RESPIRATORIO TERMOREGOLAZIONE RITMI CIRCADIANI REGOLAZIONE SONNO STATI COMPORTAMENTALI TPH-2 TRIPTOFANO IDROSSILASI Mutazione G1463A perdita 80% della funzionalità enzimatica 5-HTT (SERT) – Trasportatore della serotonina Polimorfismi della regione del promotore Allele S (Short) Allele L (Long) Allele XL (extra long) Asiatici 5-HTT (SERT) – Trasportatore della serotonina 5-HTT (SERT) – Genotipi Omozigoti S/S Omozigoti L/L Eterozigoti L/S SERT (5-HTT) – Trasportatore della serotonina SIDS 1 Short/Long eterozigote SIDS 2 SIDS 3 Long/Long omozigote SIDS 4 Controllo 1 Controllo 2 Controllo 3 Short/Long eterozigote Tutti eterozigoti 5-HTT : TRASPORTATORE DELLA SEROTONINA SIDS n=15 Genotipo L/L Genotipo S/L Genotipo S/S Controlli n=22 58% 42% 0% 14% 59% 27% 5-HTT FREQUENZE ALLELICHE SIDS 79% (n=15) Frequenza allele L Controlli 43% (n=22) 28% (n=27) 14% (n=115) Narita et al. (2001) 73% (n=87) 35% (n=100) Weese Mayer et al. (2003) DATI BIBLIOGRAFICI TRASPORTATORE DELLA SEROTONINA DISTURBI DEPRESSIVI MAGGIORI Genotipo S/S INSONNIA GENOTIPO 5 HTT = Short/Short Short sleeping e frequenti risvegli SIDS Genotipo L/L IPERSONNIA DEFICIT DI AROUSAL 7 SIDS GENOTIPO L/L 6 IPOPLASIA NUCLEO ARCUATO MODELLO DEL TRIPLO RISCHIO Kinney e Filiano Critical period of development Pre/Postnatal vulnerability SIDS 5-HTT MAO-A Exogenous postnatal stressor MAO-A Monoaminoossidasi A PROMOTORE 5’ 3’ PROMOTORE 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ PROMOTORE PROMOTORE REGIONE CODIFICANTE REGIONE CODIFICANTE REGIONE CODIFICANTE REGIONE CODIFICANTE 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ MAO-A L/L In collaborazione con Istituto di Anatomia Patologica Università di Milano Dipartimento di Scienze GinecologicheOstetriche e di Neonatologia Università di Parma [email protected] AMPLIFIED FRAGMENT LENGTH POLYMORPHISM NO SI Controlli SIDS AFLP Fingerprinting Marcatore associato a fenotipo SIDS ? Cc Cc Ma Ma Cu Cu Fe Cc Cc Ma Ma Cu Cu Fe Cc Ma Cu Fe SIDS 2 422 marcatori AFLP analizzati 2 marcatori polimorfici 2 Midollo allungato SIDS 1 446 marcatori AFLP analizzati 16 marcatori polimorfici 9 Corteccia cerebrale 9 Midollo allungato