Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Arthur Kornberg, 1970 L’attivita’ delle DNA polimerasi 5' 3' 5' Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Le tre DNA Polimerasi di E.coli DNA Polimerasi I DNA Polimerasi II DNA Polimerasi III Struttura Dalton Composizione Numero/cellula 109,000 monomero 400 120,000 monomero ? >250,000 eteromultimero 10-20 Attività enzimatiche Allungamento 5'-3' Esonucleasi 3'-5' Esonucleasi 5'-3' si si si si si no si si no polA riparazione difet. vitalità ridotta solo quando difetta 5'-3' esonucleasi polB riparazione difet. senza effetto pplC, dnaN, dnaZX, dnaQ, dbaT previene replicazione letale condizionale Mutanti Loci mutanti Fenotipi dei mut. Letalità Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Fedeltà della replicazione • Controllo presintetico • Correzione di bozze Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 5’ 3’ 3’ 5’ Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Ruolo dell’elicasi DnaB durante la replicazione del DNA in E. coli Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 L’attivita’ della DNA ligasi 3' 5' B B B B B B B B B B B B 5' B B B B B B B B OH 3' P + A PPP OH 3' 5' B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B 5' 3' A + PP + P OH Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Proteine necessarie nella replicazione degli eucarioti Proteina Funzione DNA polimerasi a Innesco DNA polimerasi d Sintesi del DNA PCNA Processività Fattore di replicazione C Allungamento Fattore di replicazione A Proteina SSB Topoisomerasi I e II Separazione dei filamenti MF1 (FEN I) Rimozione dell’RNA DNA ligasi Saldatura delle incisioni