Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006
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Arthur Kornberg, 1970
L’attivita’ delle DNA polimerasi
5'
3'
5'
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Le tre DNA Polimerasi di E.coli
DNA Polimerasi I
DNA Polimerasi II
DNA Polimerasi III
Struttura
Dalton
Composizione
Numero/cellula
109,000
monomero
400
120,000
monomero
?
>250,000
eteromultimero
10-20
Attività enzimatiche
Allungamento 5'-3'
Esonucleasi 3'-5'
Esonucleasi 5'-3'
si
si
si
si
si
no
si
si
no
polA
riparazione difet.
vitalità ridotta
solo quando difetta
5'-3' esonucleasi
polB
riparazione difet.
senza effetto
pplC, dnaN, dnaZX, dnaQ, dbaT
previene replicazione
letale condizionale
Mutanti
Loci mutanti
Fenotipi dei mut.
Letalità
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Fedeltà della replicazione
• Controllo presintetico
• Correzione di bozze
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5’
3’
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Ruolo dell’elicasi DnaB durante la replicazione del DNA in E. coli
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L’attivita’ della DNA ligasi
3'
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B
B
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B
B
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B
B
B
5'
B
B
B
B
B
B
B
B
OH
3'
P
+
A
PPP
OH
3'
5'
B
B
B
B
B
B
B
B
B
B
B
B
B
B
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B
B
B
B
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A
+
PP
+
P
OH
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Proteine necessarie nella replicazione degli eucarioti
Proteina
Funzione
DNA polimerasi a
Innesco
DNA polimerasi d
Sintesi del DNA
PCNA
Processività
Fattore di replicazione C
Allungamento
Fattore di replicazione A
Proteina SSB
Topoisomerasi I e II
Separazione dei filamenti
MF1 (FEN I)
Rimozione dell’RNA
DNA ligasi
Saldatura delle incisioni
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Lez_16_replicazione