Università degli Studi di Messina
DIPARTIMENTO SPECIALITA’ CHIRURGICHE
CLINICA OCULISTICA
Direttore: Prof. G. Ferreri
Espressione genica di Metalloproteinasi 9
e Transglutaminasi 2 nella congiuntiva di
pazienti affetti da occhio secco
Aragona P, Aguennouz M, Spinella R, Crupi R,
Rania L, Vita G, Mobrici M, Lorino F
• Non esiste una univoca interpretazione del ruolo
dell’infiammazione nella patogenesi delle
diverse forme di dry eye
• Vengono spesso ricercati markers infiammatori
per valutare la compromissione della superficie
oculare nei vari processi patologici
• Sempre più spesso vengono indicate molecole
anti-infiammatorie per la terapia del dry eye
Transglutaminasi 2
• Responsabile, nella guarigione delle ferite, del
cross-linking proteico mediante il legame di
amine primarie a residui di glutamina sulla
molecola proteica (Griffin M et al. Biochem J 2002)
• Aumenta la metabolizzazione della Fosfolipasi
A2 con conseguente liberazione di eicosanoidi
pro-infiammatori (Miele L. J Clin Invest 2003)
• La disregolazione di questa attività enzimatica è
stata descritta nel wound healing patologico
nella LASIK ed in malattie neurodegenerative,
neoplastiche, autoimmuni, caratterizzate da
fibrosi tissutale (Nishida K et al. Am J Pathol 1999; Priglinger
SG et al. J Cataract Ref Sur 2005)
MMP9
• Gelatinasi B, che agisce modificando o degradando
la matrice extracellulare (Li DQ, et al. Arch Ophthalmol 2001)
• Lisa componenti della membrana basale e delle
Tight Junctions dell’epitelio, alterando la barriera
epiteliale (Luo L et al. IOVS 2004)
• Ha un ruolo fisiologico nella desquamazione e nel
ricambio cellulare (Sternlicht MD et al. Annu Rev Cell Dev Biol
2001; Behzadian MA, et al. IOVS 2001)
• Nel dry eye è aumentata nelle lacrime per
l’accentuato stimolo al ricambio cellulare (erosioni
epiteliali) (Pflugfelder S, et al. IOVS ARVO-Abs 2002)
Materiale e Metodo
• Gruppo 1: 10 pz. Sjogren primaria (10 F) età 61,6±13,6
• Gruppo 2: 10 pz. affetti da blefarite (10 F) età 55,2±10
• Gruppo 3: 5 soggetti normali (5 F) età 45,2±15,7
• Score Sintomatologico, BUT, Colorazione Corneale con
Fluoresceina, Colorazione Congiuntivale con Verde di
Lissamina, Test di Schirmer I.
• Prelievo citologico della congiuntiva per imprinting ad ore
12 (filtri Supor 200, Gelman, Francia)
• Real time PCR per studio TGM2 e MMP9
• Statistica: Student’s T-test; Mann-Whitney U-test. Dati
dell’occhio destro.
Real-time PCR
• La RT-PCR valuta il contenuto di mRNA
che codifica per un determinato gene e
rileva quantità molto piccole di RNA
• La Real-time RT-PCR quantifica
l’espressione di geni in modo più specifico,
sensibile e riproducibile rispetto ad altre
forme di RT-PCR
Sintomi
BUT
Cornea
Lissamin
Schirmer
TGM2
MMP9
Sjogren
8±3,1a
26±0,9b
4,3±4,3d
3,6±2,5e
11,2±11,2f
33,7±15,7g
22,5±7,6j
Blefarite
8±1.1a
4,2±1,7c
1,2±0,9d
2±1,8
26,7±12,7
7,7±6h
12±3,7k
Controlli
0
12±3,2
0
0.9±0,2
28±13,4
1,98±0,02
0,98±0,02
a=p<0,001 vs controlli; b=p<0,001 vs blefariti e controlli; c=p<0,001 vs controlli;
d=p<0,01 vs controlli; e=p=0,003 vs controlli; f=p<0,001 vs blefariti e controlli;
g=p<0,0001 vs blefariti e controlli; h=p=0,05 vs controlli; j=p<0,001 vs blefariti e
controlli; k=p=0,0009 vs controlli
CONCLUSIONE
• Esiste una differente espressione dei markers
infiammatori TGM2 e MMP9 nelle diverse forme
di dry eye
• L’espressione di TGM2 e MMP9 è maggiore
nella congiuntiva di pz Sjögren che in quelli
affetti da blefarite
• Il trattamento di queste patologie deve tener
conto del diverso livello di infiammazione
esistente per un corretto approccio terapeutico