METODICHE PRATICHE
DI GESTIONE
DELLO STRUMENTO HPLC
Relatori: PICOTTI - BALDUCCI
Urbino 15 aprile 2005
programma
1 introduzione
2 gestione strumento strumento
documentazione
3 controlli periodici
pompa
autocampionatore
termostato
colonna
rivelatore
4 controlli giornalieri
5 prevenzione
software
pressione
confronto cromatogrammi
suitability
verifiche in corso di analisi
uso corretto
manutenzione preventiva
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procedura
uso
taratura
manutenzione
registrazioni
accuratezza flusso
accuratezza miscelazione
accuratezza iniezione
precisione iniezione
accuratezza temperatura
performance test
accuratezza lunghezza d'onda
noise
drift
algoritmi di calcolo
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INTRODUZIONE
 A parità di campione ha influenza sull’ analisi:
 metodo analitico
 operatore
 strumento
 Titolazione acido-base
 Analisi HPLC
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Linea HPLC
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4
Linea HPLC
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5
Cromatogrammi (p1)
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Cromatogrammi (p2)
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7
Cromatogrammi (p3)
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8
Cromatogrammi (p4)
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9
Cromatogrammi (p5)
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10
Cromatogrammi (p6)
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11
Cromatogrammi (p7)
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12
Cromatogrammi (p8)
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13
Cromatogrammi (p9)
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Cromatogrammi (p10)
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Gestione dello strumento
 Conoscere la teoria
 Conoscere lo strumento
 Verificare il corretto funzionamento dello strumento
 Prevenire malfunzionamenti e rotture
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Gestione strumento
 STRUMENTO
 Installato (IQ)
 Qualificato (PV)
 DOCUMENTAZIONE
 Manuale
 Procedura
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Procedura
 USO
 Come si lavora
 TARATURA
 Come si verifica che lo strumento funziona correttamente
 MANUTENZIONE
 Come si interviene sullo strumento se necessario
 REGISTRAZIONE
 Loogbook (registro macchina – diario) dello strumento
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Procedura
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CONTROLLI PERIODICI
 Pompa
 Autocampionatore
 Termostato
 Colonna
 Rivelatore
 Software
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POMPA
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21
POMPA
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Controlli periodici: POMPA
 Accuratezza flusso
 Accuratezza miscelazione
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Accuratezza flusso (p1)
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Accuratezza flusso (p2)
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Accuratezza miscelazione (p1)
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26
Accuratezza miscelazione (p2)
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27
Accuratezza miscelazione (p3)
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28
Accuratezza miscelazione (p4)
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AUTOCAMPIONATORE
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AUTOCAMPIONATORE
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Controlli periodici: AUTOCAMPIONATORE
 Precisione iniezione e carry over
 Accuratezza iniezione
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Autocampionatore
precisione e carry over (p1)
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33
Autocampionatore
precisione e carry over (p2)
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34
Autocampionatore
precisione e carry over (p3)
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35
Autocampionatore
precisione e carry over (p4)
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TERMOSTATO
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TERMOSTATO
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Controlli periodici: TERMOSTATO
 Accuratezza termostatazione
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Termostato (p1)
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Termostato (p2)
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COLONNA CROMATOGRAFICA
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Controlli periodici: COLONNA
 Efficienza colonna
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Colonna Efficienza
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RIVELATORE
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RIVELATORE
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Controlli periodici: RIVELATORE
 Accuratezza lunghezza d’onda
 Noise Drift
 Linearità risposta
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Rivelatore accuratezza lunghezza d’onda (p1)
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48
Rivelatore accuratezza lunghezza d’onda (p2)
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49
Rivelatore accuratezza lunghezza d’onda (p3)
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50
Rivelatore noise drift (p1)
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51
Rivelatore noise drift (p2)
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52
Rivelatore noise drift (p3)
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53
Rivelatore noise drift (p4)
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54
Rivelatore linearità (p1)
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55
Rivelatore linearità (p2)
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56
Rivelatore linearità (p3)
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57
Rivelatore linearità (p4)
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58
SOFTWARE
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Controlli periodici: SOFTWARE
 Verifica algoritmi di calcolo
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SOFTWARE algoritmi
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CONTROLLI GIORNALIERI
 Pressione
 Confronto cromatogrammi
 Suitability
 Verifiche in corso di analisi
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Condizionare lo strumento
 Verificare il condizionamento
 Confrontare la pressione con quella registrata
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Verifica condizionamento
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Confronto pressione
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Iniezioni di prova
Confrontare i cromatogrammi tra di loro
Confrontare i cromatogrammi con quelli memorizzati
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Confronto cromatogrammi (p1)
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67
Confronto cromatogrammi (p2)
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68
Confronto cromatogrammi (p3)
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69
Confronto cromatogrammi (p4)
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Suitability test
ripetibilità aree
ripetibilità RT
risoluzione
numero di piatti
simmetria
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Suitability test
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Verifiche in corso di analisi
Ripetibilità iniezioni (ini.1 ini.2)
Ripetibilità riferimenti (rif.2)
Ripetibilità campioni (c1 c2)
Ripetibilità risposta strumentale nel tempo
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Verifiche in corso di analisi
nome
rif.1
rif.2
c1
c2
rif.1
c3
c4
rif.1
ini.1
=
903
904
910
902
880
910
920
ini.2
=
905
906
920
904
880
1000
920
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media
900
904
905
915
903
880
955
920
rip.
=
100
100
99
100
100
91
100
rif.
902
%
100,3
100,4
101,5
100,2
97,6
105,9
102,1
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PREVENIRE
MALFUNZIONAMENTI E ROTTURE
 Utilizzo corretto dello strumento
 Manutenzione preventiva
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75
Manutenzione preventiva (p1)
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76
Manutenzione preventiva (p2)
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77
Manutenzione preventiva (p3)
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78
Fine presentazione
grazie per l’attenzione
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