II Riunione LNR Micotossine ISS - Roma, 4 maggio 2010 AGENDA A. Presentazione report attività LNR 2009 B. Comunicazioni dall’ EU-RL (CRL micotossine) C. Presentazione programmazione attività 2010 • • Resoconto questionari Organizzazione di studi interlaboratorio D. Aggiornamento sito Internet • Area riservata A. Report attività LNR 2009 • Attività svolta nell’anno 2009 • 1.Attività • 2.Aggiornamento e formazione professionale • 3.Consuntivo Spese 2009 • Programmazione attività 2010 • Allegato: Resoconto dei dati raccolti dalle risposte al questionario inviato agli II.ZZ.SS A. Report attività LNR 2009 1. Attività 1. Sorveglianza 2. Attività ufficiale 3. Accreditamento 4. Standardizzazione di metodiche e ring trial Matrix Mycotoxin Reference Method Accredited/not accredited Peanut butter, pistachio paste, hazelnuts, figs paste, paprika Aflatoxins B1G1B2G2 UNI EN 14123:2008 ACCREDITED Maize and feed Aflatoxin B1 Internal validation ACCREDITED Milk and milk powder Aflatoxin M1 UNI EN 14501:2008 ACCREDITED Wheat and wheat products Ochratoxin A Internal validation ACCREDITED Wheat and wheat products Deoxynivalenol Internal validation ACCREDITED Cocoa Ochratoxin A Internal validation (J. Liquid Chromat. & Related Technol., 26, 4, 2003) NOT ACCREDITED Wine and beer Ochratoxin A UNI EN 14133:2003 NOT ACCREDITED Paprika Ochratoxin A Internal validation (PT CRL EUR 23382 EN - 2008) NOT ACCREDITED Feed Ochratoxin A Internal validation (PT CRL 2006) NOT ACCREDITED Cereal based babyfoods and paprika Aflatoxins and Ochratoxin A Internal validation (under approval for publication Talanta) NOT ACCREDITED Apple Pure and juice Patulin EN 14177:2003 NOT ACCREDITED Barley, maize, wheat, cereal based baby foods Zearalenone TC 275 WI 00275159:2008 NOT ACCREDITED Mais e prodotti derivati Fumonisins B1 and B2 UNI EN 14352:2005 NOT ACCREDITED Wheat, oat and feed T-2 e HT-2 Toxins Internal validation (PT CRL EUR 24315 EN - 2009) NOT ACCREDITED A. Report attività LNR 2009 Standardizzazione di metodiche e ring trial • Validazione in house di metodi multimicotossina • I- Studio di validazione metodo multimicotossina Afla OTA in baby food e paprica. Metodo in HPLC per la determinazione simultanea di Ocratossina A e Aflatossina B1 in baby food e paprica. • II- Studio di validazione metodo multimicotossina Zearalenone, Deossinivalenolo, T2 e HT2 in mangimi. Metodo in UPLC-MS/MS per la determinazione simultanea delle micotossine indicate nei mangimi • Studi di validazione con il coinvolgimento di laboratori pubblici e privati (nazionali e internazionali) nell’ambito delle attività dell’LNR e nell’ambito dell’espletamento di attività legate a progetti di ricerca. • I- Studio di validazione interlaboratorio. Metodo in HPLC per la determinazione dell’Ocratossina A in campioni di prosciutto crudo. • II- Studio interlaboratorio per la validazione di un metodo immunoenzimatico per la determinazione del deossinivalenolo (DON) in campioni di grano tenero (2008/2009) A. Report attività LNR 2009 Standardizzazione di metodiche e ring trial Partecipazione a studi inter-laboratorio • Partecipazione a 11 FAPAS (z score tutti fra -1 ≤ z ≤ +1) • EU-RL Mycotoxin JRC-Geel Collaborative trials – determinazione di OTA nei mangimi – T-2 / HT-2 nei cereali • (Protocol for management of underperformance in comparative testing and/or lack of collaboration of National Reference Laboratories (NRLs) with Community reference laboratories (CRLs) activities). Regulation 882/2004, as last amended by Commission Regulation (EC) No 776/2006 (OJ L 136, 24.5.2006, p. 3) A. Report attività LNR 2009 Aggiornamento e formazione professionale • III Congresso Nazionale: Le Micotossine nella Filiera Agro-alimentare e Zootecnica, Roma 28-30 settembre 2009 • Sito web B. Comunicazioni dall’ EU-RL (CRL micotossine) https://irmm.jrc.ec.europa.eu/html/CRLs/crl_mycotoxins/index.htm • Newsletter of CRL Mycotoxins- 1/2009 – https://irmm.jrc.ec.europa.eu/html/publications/newsletters/index.htm • 5th Workshop of the EU Reference Laboratory for MycotoxinsWorkshop March 10-11, 2010- Geel, Belgium – PT dell’EU-RL 2010 OTA in paprica, caffè e cereali – T2-HT2 Proficiency Testing • Risultati dello studio dell’EU-RL • Risultati dello studio di Klafke (BFR, NRL Germania) – Frans Vestraete (DG Sanco) • Presentazione nuova legislazione (2010/178 sampling; 2010/165 Maximum Levels per AFs; 2010/105 ML per OTA in spezie e liquerizia) • Underperformances CRL e NRL – Determinazione di Ergot Alcaloidi (BFR, NRL Germania) – Valutazione sperimentale di test ELISA commerciali per la determinazione di DON nei cereali – Presentazione della ISO/IEC 17043:2010 (Conformity assessment -General requirements for proficiency testing) – Analytical aspects of mycotoxin binders (la presenza del binder nei mangimi non altera l’efficienza del metodo) – Gruppi di lavoro per la redazione di procedure di verifica di quei calibranti che non sono cromofori (FBs) - DERIVATIZZAZIONE C. Presentazione programmazione attività 2010 • Resoconto questionari • STRUMENTAZIONE – Per quanto riguarda la strumentazione tutti Istituti sono dotati di sistemi ELISA ed LC (HPLC) per l’analisi delle micotossine, mentre non tutti (86% del totale) dispongono di strumentazione per l’analisi LC-MS/MS. – La maggioranza dei laboratori, fatta eccezione di uno, NON prepara lo slurry del campione e preferisce manipolare il campione a secco, macinandolo con strumentazione a disposizione del laboratorio. C. Presentazione programmazione attività 2010 • • Resoconto questionari SISTEMA DI QUALITA’ – Tutti i laboratori hanno implementato un sistema qualità e il 71% dei laboratori è accreditato secondo la norma UNI EN ISO 17025:2005. – I metodi accreditati riguardano l’analisi delle principali micotossine (AFs totali, AFM1, OTA, ZEA, DON, FBs) per cereali e mangimi, principalmente. – I metodi accreditati prevedono quasi esclusivamente analisi in HPLC ad eccezione di un 10% che viene eseguito in ELISA. – Tutti i laboratori • utilizzano CRM • carte di controllo per tenere il processo di analisi sotto controllo interno; • FAPAS per il controllo di qualità esterno. – Tutti i laboratori calcolano il recupero per esprimere il risultato delle analisi. – Tutti i laboratori effettuano il calcolo dell’incertezza di misura, solo il 29% valuta tale contributo secondo l’equazione di Horwitz. C. Presentazione programmazione attività 2010 • Resoconto questionari Matrice Micotossina Metodo di conferma LC Latte AFM1 2 Alimenti per lÕ infanzia AFM1 1 Mais FBs 1 Mangimi FBs 2 Cereali FBs 3 Alimenti per lÕ infanzia Aflatoss ina B1 2 Frutta secca AFBs totali 2 Grano duro AFBs totali 1 Avena AFBs totali 1 Mais AFBs totali 1 Alimenti per lÕ infanzia OTA 1 Caff¸ OTA 2 Mangime DON 2 Cereali DON 1 C. Presentazione programmazione attività 2010 • STUDI INTERLABORATORIO • Organizzazione di due studi collaborativi: – VS - Multi-micotossina Afs-OTA in spezie e baby food (per settembre 2010) – PT - Fumonisine (FB1-FB2) multi-matrice: mais, mangime e cereali (per gennaio 2011) • Programmazione di un piano di formazione per personale dei Laboratori del Sistema Sanitario Nazionale. C. Presentazione programmazione attività 2010 • • Resoconto questionari Organizzazione di studi interlaboratorio Indice di preferenza da •1 (poco interessante) a •5 (di estremo interesse) Metodo preferito: indicare la preferenza sulla metodica Matrice Micotossine Indice di preferenza accordata Metodo detection (ELISA, HPLC-FLR/UV o LC-MS/MS) Cereali/Mangimi/M FBs ais PT Alimenti per l’infanzia e spezie VS - HPLC Altri test AFB1+OTA D. Aggiornamento sito Internet Area riservata • Interattività (sezioni riservate) • Divulgazione di informazioni ed eventi • Pubblicazioni • Normativa di riferimento