Senato della Repubblica, 30 giugno 2015 Il futuro della Ricerca e applicazione degli OGM in agricoltura Rischi/benefici derivanti dall’impiego degli OGM in alimentazione animale Federico Infascelli e Raffaella Tudisco Dipartimento di Medicina Veterinaria e Produzioni animali Università di Napoli Federico II Problemi connessi con l’utilizzazione di OGM 1. Corrispondenza tra OGM e relativi organismi non modificati per quanto concerne la valutazione nutrizionale e fisiologica 2. Destino di frammenti di DNA endogeno e transgenico ingeriti dagli animali 3. Influenza degli OGM sulla salute animale e sulla qualità dei prodotti Costrutto genico Gene Marker o Reporter Promotore Gene Strutturale Terminatore nptII P-35S pat nos 3’ GUS P-nos EPSPS Cry T-35S Ricerca geni a singola copia specifici della soia f.e. transgenica: Promotore 35S CP4 epsps in latte di capre alimentate con un mangime contenente soia f.e. transgenica (T) number of animals 10 35S promoter CP4 epsps 8 6 4 2 0 1° 2° 3° 4° 5° 6° 7° Ricerca frammenti transgenici: in capretti alimentati con il solo latte di capre, che ricevevano un mangime contenente soia f.e. convenzionale (a) e transgenica (b) Nessun frammento è stato rilevato nel gruppo a Aumento significativo dell’attività enzimatica • Rene: GGT e LDH • Cuore: LDH • Muscolo LDH Isoenzimi: • Cuore, rene e fegato: LDH1 • Muscolo: LDH1 e LDH2 Composizione chimica del Mais convenzionali vs Mais Mon810 (% s.s.) Proteine Grassi Ceneri NDF ADF ADL Mais conv. 8.4 4.1 1.6 12.5 3.8 1.2 Mais GM 8.4 4.0 1.6 12.4 3.8 1.2 NDF: fibra neutro detersa; ADF: fibra acido detersa; ADL: lignina acido detersa Tudisco et al. (2004) 2nd Int. Meeting on Veterinary morpho-functional Biotechnologies Tasso di fermentazione Risultati Composizione chimica (%) e concentrazione delle IgG (mg/ml ± ds) nel colostro Proteine Grasso IgG A 18.7 ± 1.4 A 7.2 ± 0.3 A 28.2 ± 3.2 A B 6.1 ± 0.9 B 4.6 ± 0.9 B 10.3 ± 2.5 B A, B: P < 0.01 Il caso del latte nobile Dal disciplinare: Gli animali devono essere alimentati con una razione giornaliera con un minimo di 70% di foraggi; I foraggi devono essere costituiti da un numero di essenze botaniche non inferiore a 4; Sono vietati i foraggi con rischi di contaminazione da germi butirrici (es. insilati, rotoballe fasciate, ecc.) I concentrati, miscele di materie prime, non devono contenere: sottoprodotti e panelli oleosi, alimenti OGM (certificata) ….. Campione Alta qualità Nobile* SFA, % 64.64 63.58 MUFA, % 28.68 28.85 PUFA, % 0.734 0.80 n3, % 0.124 0.22 n6, % 0.622 0.59 n6/n3 5.005 2.65 PUFA/SFA 0.011 0.013 LA/ALA 7.744 0.78 AA/EPA 0.313 6.338 SFA = acidi grassi saturi MUFA = acidi grassi monoinsaturi PUFA = acidi grassi polinsaturi n3 = acidi grassi polinsaturi, serie omega 3 OBIETTIVO Valutare e confrontare eventuali cambiamenti nella regolazione del bilancio energetico, del metabolismo glucidico e lipidico, dello stato infiammatorio, delle difese antiossidanti in ratti alimentati con supplemento di latte bovino, latte Nobile Ratti maschi di 60 giorni Controllo Dieta standard (60,4% carboidrati; 29% proteine; 10,6% lipidi; 15,88 kJ/g) CM (cow milk) Dieta standard + Latte di vacca (21 ml/giorno -3,46 kJ/ml) Il periodo di trattamento è durato 4 settimane NM Dieta standard + Latte Nobile (22 ml/giorno-3,343kJ/ml) Body composition N CM NM Body water (%) 68±0.7a 58.1±1.8 b 59.1±0.7 b Body lipid (%) 11.7±0.25 a 17.9±0. 77 b 16.5±0.2 b Body protein (%) 13.3±0.3 a 12.8 ±0.1 a 12.7±0.5 a Body energy (KJ/g) 7.7±0.12 a 10.5±0.33 b 9.4±0.10 b Data are means ± SE for 7 different rats in each experimental group. Energy balance and partitioning of metabolisable energy intake Diet Initial body weight, g N 325.4±3.9a CM 324±6.9 a LN 325.7±3.9 a Final body weight, g 467,4±3.1 a 497.3±5.9 b 493.2±3.9 a Body weight gain, g 142±2.5 a 173.3±2.9 b 167.5±1.3 a Gross intake, kJ 12432±146 a 12064±249 a 12180±213 a Milk intake, kJ ± 2007±12 a 2008±11 a Total intake, kJ ± 14071±249 a 14188±218 a ME intake (KJ) 8812±258 a 10267±195 b 10290±239 b Energy expenditure KJ) 7940±261 a 8318±261 a 8432±246 a Body weight gain (KJ) 871.4±58 a 1949±99 b 1858±31 b Gross efficiency % 0.10±0.01 a 0.19±0.002 b 0.18±0.004 b Protein gain, kJ 424±35.8 a 516±32 b 525±34 b 745±41 a 1805±86 b 1785±21.5 b Lipid gain, kJ Data are means ± SE for 7 different rats in each experimental group. ME intake = metabolisable energy intake Immunomodulatory markers Control 135±1.51 a CM 131.1±4.8 a NM 128.1±1.9 a Insulin μg/l 0.268±0.02 a 0.271±0.015 a 0.265±0.02 a HOMA index 2.08±0.12 a 2.04±0.13 a 1.95±0.12 a Triglycerides, mg/dl 116±8.9 a 135±11 a 127±8.7 a Tot. Cholesterol, mg/dl 60±2.5 a 61±2.4 a 59±1.8 a 65±2.0 a 0.092±0.004 a 68±3.2 a 0.094±0.005 a 67±2.5 a 0.075±0.005 b IL1, pg/ml 55±3.1 a 63.0±2.8 a 50±2.9 b IL10, ng/ml 0.060±0.004 a 0.128±0.007 b 0.158±0.009 c Glucose mg/dl ALT, U/l TNFα, ng/ml Abbreviations: TNF-α: tumour necrosis factor-α; IL1: interleukin-1; IL10: interleukin-10; s. Data are the means ± SE. Data with different superscripted letters are significantly different (p<0.05). Mitochondrial respiration and fatty acid oxidation ng atoms oxygen/min/mg Control CM NM 130±5.8a 150±5.2 b 155±±7.6 b 17±1.2 a 7.6±0.2 a 21±1.0 b 7.1±0.3 a 22±1 b 7.0±0.5 a 71.1±2.1 a 91.2±7.2 b 99.0±4.8 b 11.2±0.5 a 13.2±1.2 a 16.2±0.8 b 6.3±0.1 a 6.9±0.8 a 6.1±0.5 a 8.79±0.544a 8.613±0.739 a 11.77±0.549 b Succinate State 3 State 4 RCR Palmitol-CoA State 3 State 4 RCR CPT, nmol/min x mg protein Data are means ± SE for 7 different rats in each experimental group. CPT Palmitoyl Carnite Transferase Mitochondrial respiration and fatty acid oxidation ng atoms oxygen/min/mg Control CM NM 130±5.8a 150±5.2 b 155±±7.6 b 17±1.2 a 7.6±0.2 a 21±1.0 b 7.1±0.3 a 22±1 b 7.0±0.5 a 71.1±2.1 a 91.2±7.2 b 99.0±4.8 b 11.2±0.5 a 13.2±1.2 a 16.2±0.8 b 6.3±0.1 a 6.9±0.8 a 6.1±0.5 a 8.79±0.544a 8.613±0.739 a 11.77±0.549 b Succinate State 3 State 4 RCR Palmitol-CoA State 3 State 4 RCR CPT, nmol/min x mg protein Data are means ± SE for 7 different rats in each experimental group. CPT Palmitoyl Carnite Transferase Mitochondrial efficiency REDOX STATES CONCLUSIONI Latte Nobile Ossidazione mitocondriale degli acidi grassi lipidi epatici Difese antiossidanti Stato infiammatorio Mitochondri del muscolo scheletrico Epigenetica Apprendimento