RNA regolatore Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Piccolissimi RNA cellulari (20-25 nt) miRNA (micro RNA) siRNA (small interfering RNA) regolazione espressione genica degradazione mRNA Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 COMPONENTI DELLA SINTESI PROTEICA RNA Proteine Proteine che legano l’mRNA Amminoacil-tRNA sintetasi Proteine ribosomali Fattori di traduzione Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 RNA transfer (tRNA) Il tRNA ha le proprietà di un adattatore che riconosce sia l’amminoacido che il codone Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Il tRNA ha le proprietà di un adattatore che riconosce sia l’amminoacido che il codone Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Il tRNA è ripiegato in una struttura terziaria compatta a forma di L con l’amminoacido ad un estremo e l’anticodone all’altro estremo Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Ansa TYC 5’ 3’ Braccio accettore Ansa D Anticodone Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 “Wobble” Tentennamento Vacillamento Oscillazione Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 L’appaiamento codone-anticodone può coinvolgere un appaiamento G/U (wobble) nella terza posizione Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 La modificazione di basi nell’anticodone permette altri tipi di appaiamenti Base modificata nella prima posizione dell'anticodone I tio-U Basi riconosciute nella terza posizione del codone C/U/A A Il caricamento dei tRNA Le amminoacil-tRNA sintetasi Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Il riconoscimento dell’a.a. corretto da parte della a.a.-tRNA sintetasi è verificato con un meccanismo di “correzione di bozze” innescato dal legame con il giusto tRNA: • un cambiamento conformazionale può causare l’idrolisi dell’ a.a.adenilato • il trasferimento dell’a.a. sul tRNA può essere seguito da idrolisi Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 La accuratezza del caricamento del tRNAIle da parte della corrispondente sintetasi dipende da un meccanismo di controllo degli errori che agisce in due diverse fasi Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Soppressione Mutazioni non-senso possono essere “soppresse” da un tRNA con una mutazione nell’anticodone che inserisce un a.a. in corrispondenza del codone mutato, producendo così una proteina completa. Nell’esempio la Leu originale è stata sostituita da una Tyr. Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 I soppressori non-senso continuano la lettura attraverso i codoni di terminazione naturali, sintetizzando proteine che sono più lunghe del normale Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 La soppressione “di senso” avviene quando l’anticodone di un tRNA è mutato in modo da “rispondere” al codone sbagliato. Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Ricodifica Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006 Lewin, IL GENE VIII, Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2006