Lic. classico”D. A. Azuni” Sassari I processi metabolici cellulari Prof. Paolo Abis 1 Metabolismo E’ l’insieme delle reazioni chimiche che avvengono in una cellula o, più in generale, in qualsiasi organismo. − Le sostanze coinvolte in tali reazioni sono dette metaboliti Sintetizzati dagli organismi Derivati dall’ambiente Macromolecole organiche: zuccheri, lipidi, proteine … Nutrienti, acqua, anidride carbonica, ossigeno … Prof. paolo abis 2 Metabolismo E possibile individuare due gruppi fondamentali di reazioni chimiche: Anabolismo Catabolismo: fase costruttiva fase di degradazione consumo di energia liberazione energia Reazioni chimiche endoergoniche Reazioni chimiche esoergoniche Prof. paolo abis 3 Metabolismo = anabolismo + catabolismo Le diverse vie metaboliche non si svolgono in modo indipendente: spesso sono collegate in cicli di utilizzo e riclico di sostanze Proteine, polisaccaridi, lipidi… demolizione Zuccheri, amminoacidi, acidi grassi… Molecole organiche di piccole dimensioni Macromolecole + sintesi Prof. paolo abis 4 Metabolismo e energia • Gli organismi sono in grado di utilizzare soltanto due tipi di energia : En. Luminosa En. Chimica Autotrofi Eterotrofi Fotosintesi Respirazione cell. Prof. paolo abis 5 Metabolismo e energia Reazioni chimiche endoergoniche Reazioni chimiche esoergoniche E. prodotti E. reagenti E. liberata E. assorbita E. prodotti E. reagenti Il contenuto energetico dei reagenti è maggiore di quello dei prodotti Il contenuto energetico dei reagenti è minore di quello dei prodotti Prof. paolo abis 6 l'ATP, il trasportatore universale di energia • In tutti i viventi esiste una molecola, chiamata adenosin trifosfato (ATP) che ha il compito di assorbire l'energia prodotta dalle reazioni esorgoniche di demolizione e di renderla disponibile per i lavori cellulari. base azotata adenina tre gruppi fosfato I legami presenti tra questi gruppi fosfato racchiudono l'energia utilizzabile dalla cellula. Prof. paolo abis zucchero a cinque atomi di carbonio 7 L’ATP: una molecola “Ricaricabile” Prof. paolo abis 8 L’ATP: una molecola “Ricaricabile” L’ATP immagazzina energia chimica nel legame fra due dei suoi gruppi fosfato. ADP ATP Energia P P Quando il legame si rompe, con una reazione di idrolisi, Legami ad alta energia l’energia chimica si rende disponibile per altri processi biologici. adenina P Ribosio Prof. paolo abis 9 Rigenerazione dell’ATP Continuamente, nel nostro organismo, si realizzano queste due reazioni: 1. ATP --> ADP + P + Energia 2. ADP + P + Energia ---> ATP La (1) è la reazione di liberazione di energia durante l'anabolismo, la (2) è quella che avviene durante la produzione di energia nella respirazione cellulare. ATP viene continuamente consumato ma si rigenera per addizione di un P ad ADP. Prof. paolo abis 10 Ciclo dell’ATP l’energia liberata dalle reazioni di degradazione (catabolismo), viene utilizzata per “ricaricare” l’ATP. L’energia immagazzinata nell’ATP viene utilizzata per compiere la maggior parte del lavoro cellulare. Quindi l’ATP accoppia i processi cellulari che liberano energia con quelli che la richiedono. L’ATP risulta coinvolto, direttamente o indirettamente, in quasi tutti i processi metabolici. Prof. paolo abis 11 Flusso dell’energia Da dove proviene l’energia necessaria alla produzione di ATP ? • Tutti i viventi ricavano energia dalla demolizione del glucosio, uno zucchero a sei atomi di carbonio. • Questo processo libera energia chimica che viene immagazzinata sotto forma di ATP • per essere trasportata e resa disponibile alle reazioni dell'anabolismo cellulare. Prof. paolo abis 12 Produzione di energia • AdenosinTrifosfato o ATP • Respirazione cellulare produzione di ATP Prof. paolo abis 13 Le cellule respirano? • La respirazione cellulare è il meccanismo che permette alla cellula, in presenza di ossigeno,di ricavare energia utilizzabile nei processi vitali dai legami chimici delle molecole assorbite nella digestione. • La respirazione cellulare consta di diverse reazioni, in cui i prodotti di un passaggio sono utilizzati come reagenti per il processo successivo. • I prodotti di scarto della respirazione cellulare (come CO2 o H2O) vengono eliminati dalla cellula e, negli organismi superiori, escreti attraverso la respirazione polmonare e le urine. 14 Equazione generale della respirazione cellulare C6H12O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O + 36 ATP Ossigeno Glucosio Acqua Anidride Carbonica Prof. paolo abis 15 Le reazioni avvengono per piccoli passi : sottoreazioni. I viventi hanno dovuto suddividere la demolizione in numerose tappe intermedie, in modo da poter sfruttare meglio l'energia contenuta nel glucosio e per evitare che questo processo fosse accompagnato da un innalzamento della temperatura cellulare. Prof. paolo abis 16 Respirazione Cellulare: le fasi Catena di trasporto degli elettroni Glicolisi Ciclo di Krebs Prof. paolo abis 17 Dove avviene la respirazione cellulare ? Prof. paolo abis 18 Fasi della respirazione cellulare 1. Glicolisi: catabolica, degrada sost. organiche avviene nel citoplasmatica 2. Ciclo di Krebs: catabolica, completa la degradazione di sost. org., avviene nella matrice mitocondriale 3. Catena di trasporto di elettroni e fosforilazione ossidativa: trasferimento di elettroni dal NADH , con formazione finale di acqua e ATP. La fosforilazione ossidativa avviene sulle creste mitocondriali, produce il 90% dell’ATP cellulare. Prof. paolo abis 19 Respirazione cellulare Prof. paolo abis 20 Glicolisi C6H12O6 Glucosio Questa prima fase avviene nel citoplasma di tutte le cellule, procariote od eucariote: una molecola di glucosio, a sei atomi di carbonio viene trasformata, tramite 9 reazioni, in due molecole di acido piruvico a tre atomi di carbonio. 2 ADP + 2 Pi Glicolisi 2 ATP Queste reazioni sono accompagnate da una liberazione di energia (2 ATP). E una fase anaerobica, non richiede ossigeno 2 Ac. piruvico C3H4O3 Prof. paolo abis 21 Sintesi dell’acetil-CoA Fase intermedia: il piruvato entra nei mitocondri e viene trasformato in acetil coenzima A. Si libera una molecola di CO2 Prof. paolo abis 22 Sintesi dell’acetil-CoA • La molecola di acido piruvico (3C) entra nel mitocondrio, perde una • molecola di CO2 , trasformandosi in un gruppo acetile (2C). • Il gruppo acetile si lega ad una molecola di Coenzima A (CoA), tramite • la quale entra nel ciclo di Krebs come acetilCoA. Prof. paolo abis 23 Ciclo dell’acido citrico (Krebs) • Serie di reazioni che partono dall’acetil-CoA • Si Producono elettroni ed atomi di idrogeno che sono inviati alla catena di trasporto di elettroni. Prof. paolo abis 24 Un ciclo in 9 tappe che inizia con l’acetil-CoA che viene legato ad un acido a 4 atomi di Carbonio (ossalacetato), per formare acido citrico (6 C) • Gli atomi Durante il ciclo di vengono eliminate idrogeno vengono 2 mol. di CO2 combinati con con gli produzionespecifici accettori di un acido ae5FAD), (NAD+ atomi di C che si trasforma •immediatamente Viene prodotta in un molecola una composto di a 4 atomi di C ATP. ossalacetato Prof. paolo abis 25 Bilancio del Ciclo di Krebs • Durante il ciclo di Krebs una singola molecola di acetilCoA produce: 3 molecole di NADH 1 mol. di FADH2 1 mol. di ATP 2 mol. di CO2 Prof. paolo abis 26 Catena di trasporto di elettroni e fosforilazione ossidativa spazio intramenbranale • Invenzione « recente » • Avviene nella Membrana interna dei mitocondri • Produzione di 34 ATP da ogni molecola di glucosio Prof. paolo abis 27 Trasportatori di elettroni: citocromi • I citocromi sono proteine vettori di elettroni che permettono l'utilizzazione dell'ossigeno a livello cellulare. • Trasportano gli elettroni da un livello di alta energia ad un livello più basso. Questa liberazione energetica permette all'ATP-sintetasi di produrre molecole di ATP a partire da ADP e gruppo P. Prof. paolo abis 28 LA RESPIRAZIONE CELLULARE Il motore della respirazione cellulare: ATP-sintasi La ATP-sintasi trasportante H+ tra due settori è un complesso enzimatico che catalizza la seguente reazione: ADP + fosfato + H+esterno ATP + H2O + H+interno Quando la reazione è catalizzata verso destra, l'enzima è comunemente chiamato ATP-sintasi ed è responsabile della sintesi di adenosintrifosfato (ATP) utilizzando come substrati adenosindifosfato (ADP) e fosfato inorganico, sfruttando il gradiente protonico generato dalla catena di trasporto degli elettroni. Prof. paolo abis 29 La catena di trasporto di elettroni e la fosforilazione ossidativa La catena di trasporto degli elettroni è un processo cellulare per la produzione di ATP nei mitocondri. È costituita da una serie di complessi proteici e composti lipo-solubili capaci di produrre un potenziale elettrochimico attraverso la membrana mitocondriale mediante la creazione di un gradiente di concentrazione di ioni H+ tra i due lati della membrana. Questo potenziale è sfruttato per attivare i canali di trasporto presenti sulla membrana stessa e per promuovere la sintesi dell'ATP da parte dell'ATP sintetasi. Prof. paolo abis 30 Catena respiratoria • Serie di reazioni in cui il potere riducente di NADH e FADH2 , prodotto durante la glicolisi ed il ciclo di Krebs, viene usato per produrre molecole di ATP. • NADH e FADH2 ridotti cedono elettroni agli enzimi della catena respiratoria. • Durante il passaggio da un trasportatore all’altro l’energia degli elettroni diminuisce. • L’ultimo trasportatore della catena cede gli elettroni all’O2 (accettore finale) trasformandolo in H2O. Durante il trasporto degli elettroni, i H+ sono pompati nello gradiente. I protoni tendono a rientrare nella matrice attraverso il canale della ATP sintetasi. spazio tra le due membrane generando un • Il flusso di H+ attraverso la ATP sintetasi induce la sintesi di ATP da ADP e Pi (fosforilazione ossidativa). Prof. paolo abis 31 • Ogni complesso proteico (CP) ha un proprio livello energetico. • I complessi sono disposti in serie secondo livello energetico decrescente. e - e - e - e CP CP CP - O2 • Gli e- scorrono spontaneamente da un livello energetico maggiore ad uno minore, fino all’O2. Prof. paolo abis 32 • Gli elettroni scorrendo in questi complessi proteici (proteine canale transmembrana) causano la fuoriuscita di ioni H+ contro gradiente • nello spazio tra le 2 membrane mitocondriali. • Il rientro secondo gradiente degli ioni H+ attraverso l’ ATP-sintetasi (proteina canale) genera ATP. Membrana mitocondriale esterna ATP-sintetasi Matrice mitocondriale Prof. paolo abis 33 L’energia liberata durante il trasferimento degli e- viene utilizzata dai CP per pompare H+ fuori dalla membrana mitocondriale interna, contro gradiente. La proteina canale ATP-sintetasi sfrutta il rientro secondo gradiente dei protoni H+ per generare ATP. Prof. paolo abis 34 Prof. paolo abis 35 Catena di trasporto di elettroni Prof. paolo abis 36 Catena di trasporto di elettroni • Alla fine della catena gli elettroni, insieme ad altrettanti ioni H+, si combinano con l’ossigeno per formare acqua. Prof. paolo abis 37 L’Ossigeno • Qual’è il ruolo dell’ O2? L'ossigeno è fondamentale per la respirazione perché agisce come accettore finale di elettroni dall’idrogeno dopo che tutta l’energia è stata estratta per la fabbricazione di ATP O2 si combina con 2H acqua metabolica Prof. paolo abis 38 Il rendimento energetico • Da ogni molecola di glucosio attraverso la respirazione cellulare vengono prodotte complessivamente 36 molecole di ATP (Eucarioti) 38 molecole di ATP (Procarioti) Prof. paolo abis 39