Associazione Italiana Allevatori
Laboratorio Standard Latte
ANALISI NIR FORMAGGI
ACCREDITAMENTO DELLA
PROVA DA PARTE DI
ACCREDIA-SINAL
Caterina Melilli
10° Meeting AIA-LSL Montegrotto Terme (PD)
INTRODUZIONE
•
•
•
Dal 2007 NIRS 5000 Foss;
analisi sui foraggi;
analisi sui formaggi facendo uso delle curve di
taratura messe appunto da altri lab della rete AA (es:
ARAS, Lab Aosta);
I vantaggi dell’uso del NIR:
•
Rapidità di esecuzione
•
No reagenti
•
Costi bassi
•
Buona ripetibilità
L’uso principale del NIR è per il controllo della
stabilità e omogeneità durante le fasi di preparazione
di un ring test.
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
INTRODUZIONE
Il LSL accredita le prove che utilizza nella
preparazione dei Materiali di Riferimento e dei
materiali per la preparazione di ring test.
Alla fine del 2007 sono state avviate le attività per
l’accreditamento delle analisi al NIR secondo la ISO
21543/IDF 201:2006: Milk products – Guidelines for
the application of near infrared spectrometry.
Contemporaneamente
sono
state
avviate
le
procedure per il corrispondente accreditamento dei
metodi di riferimento: Umidità (APHA 2004), Proteine
(ISO/TS17837/IDF25:2008),Grasso (ISO/TS1735/IDF5:2004).
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
ISO 21543/IDF 201:2006
Milk products – Guidelines for the application of
near infrared spectrometry
1 Scopo
 Solidi Totali, Grasso e Proteine nel formaggio,
 Umidità, Grasso, Proteine e Lattosio nel latte in
polvere, siero in polvere e latticello in polvere,
 Umidità, Grasso, Solidi non grassi e sale nel
burro.
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
ISO 21543/IDF 201:2006
Milk products – Guidelines for the application of
near infrared spectrometry
Near InfraRed (NIR):
esegue misurazioni sia in riflettanza diffusa che
in trasmittanza nell’intero range di lunghezza
d’onda del vicino infrarosso (700 nm - 2500
nm)
o
in
segmenti
di
questi
o
specifiche
lunghezze d’onda selezionate all’interno della
regione.
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
ISO 21543/IDF 201:2006
6.5 Validazione dei modelli di taratura
Utilizzare un set di campioni indipendenti,
che ricopra tutte le possibili variazioni della
popolazione di campioni e
deve essere di almeno 25 campioni. (…)
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
ISO 21543/IDF 201:2006
6.5 Validazione dei modelli di taratura
1. Selezionati 25 diversi campioni di formaggio
Latte
(ovino, vaccino, misto)
Stagionatura
(3-24 mesi)
Area di produzione
(nord, centro, sud)
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
Umidità = 35-55 %
Grasso = 20-35 %
Proteine = 25-38%
ISO 21543/IDF 201:2006
6.5 Validazione dei modelli di taratura
2.
Analizzati per via
metodiche
ufficiali
accreditamento):
Chimica secondo le
(in
contemporaneo
Umidità: APHA Standard Methods for the examination of
dairy product 17th edition 2004 Cap. 15.
Proteine: ISO/TS 17837/ IDF 25:2008. Milk and milk
products. Determination of nitrogen content and
crude protein calculation. Kjeldahl method
Grasso: ISO 1735/IDF 5:2004. Cheese and processed cheese
products – Determination of fat content – Gravimetric
method (Reference method).
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
ISO 21543/IDF 201:2006
6.5 Validazione dei modelli di taratura
3. Analizzati al NIR
Tutte le analisi sono state condotte in doppio e nel periodo di tempo
di 2 settimane (Marzo 2008)
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
ISO 21543/IDF 201:2006
6.5 Validazione dei modelli di taratura
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
ISO 21543/IDF 201:2006
6.5 Validazione dei modelli di taratura
SEP = 0.342
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
BIAS = 0.014
R2 = 0.995
ISO 21543/IDF 201:2006
6.5 Validazione dei modelli di taratura
SEP = 0.694
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
BIAS = -0.105
R2 = 0.968
ISO 21543/IDF 201:2006
6.5 Validazione dei modelli di taratura
SEP = 0.288
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
BIAS = 0.000
R2 = 0.992
ISO 21543/IDF 201:2006
7 Statistiche della performance del metodo
SEP < 2 * SEL
Errore Standard di Predizione (SEP):
differenza fra i dati chimici e NIRS di
validazione
Errore di Ripetibilità (SEL):
Scarto tipo del laboratorio
√∑(rip1 –rip2)2
2n
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
ISO 21543/IDF 201:2006
7 Statistiche della performance del metodo
UMIDITA'
GRASSO
PROTEINE
SEP
0,342
0,694
0,288
BIAS
R2
0,014 0,995
-0,105 0,966
0,000 0,992
SEP < 2 * SEL
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
SEL x 2
1,090
1,560
0,700
VALIDAZIONE DEL PROCESSO DI
PROVA - Ring Test
Ottemperata la ISO 21543/IDF 201:2006.
Redatto
il
documento
di
dettaglio
(Procedura di Prova -SINAL DG007 p.to
5.4.1).
Validazione del processo di prova attraverso
la partecipazione al ring test.
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
Z-Score
Circuito NIRS
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
Z-Score
Metodi di Riferimento
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
CONTROLLO DELLA RIPETIBILITA‘
La norma ISO 21543/IDF 201:2006 non
riporta dati di accuratezza (r, R).
IL LSL in ottemperanza al documento SINAL
DT0002/6 ha calcolato lo scarto tipo di
ripetibilità eseguendo 11 prove sullo stesso
campione di formaggio.
Pertanto è stato confrontato il valore σ (scarto
tipo di ripetibilità del ring test) con lo Sr
(scarto tipo di ripetibilità del laboratorio).
Il rapporto Sr/σ deve ricadere nel range della
tabella di Fisher (Tabella 1 DT0002/6).
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
CONTROLLO DELLA RIPETIBILITA‘
Tabella di Fisher - limiti di fiducia min e max
n=n-1
min (p=0,025)
max (p= 0,975)
5
0,408
1,602
6
0,454
1,551
7
0,491
1,512
8
0,522
1,480
9
0,548
1,454
10
0,570
1,431
11
0,589
1,412
15
0,646
1,354
20
0,692
1,307
25
0,724
1,275
30
0,748
1,251
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
Umidità
Sr / σ = 0.650
Grasso
Sr / σ = 0.843
Proteine
Sr / σ = 0.590
ESITO POSITIVO
INCERTEZZA DI MISURA
Soddisfatto
il
requisito
DT0002/6
il
Laboratorio associa, al risultato di prova, come
incertezza di misura, lo scarto tipo di
Riproducibilità dei ring test (SR).
Es: SRgrasso= 0.87
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
PROCEDURA DI PROVA P13 REV 2
“…Al fine di non imbrattare la cella di lettura il
TL frappone tra il campione ed il vetrino una
pellicola trasparente (film plastico) dalle
seguenti caratteristiche:
Destinata al contatto con i prodotti alimentari;
Composto da polimeri termoplastici;
Conforme alle norme vigenti in materia
(dichiarazione di conformità da parte del
produttore);
Spessore 0.012 mm…”
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL
Prova accreditata SINAL da Maggio 2008!!!!!
Analisi NIR Formaggi
10° Meeting AIA-LSL