Grandezze, parametri e
prestazioni
Cromatografia su strato sottile
1.Selettività
2.Efficienza
3.Risoluzione
4.Capacità
Mauro Sabella
SELETTIVITÀ
• Esprime la capacità di un sistema di produrre
macchie distanziane le una dalle altre. Tale
valore nella TLC e nella PC viene misurato dal
fattore di ritenzione o ritardo.
• Rf= di/del
di = distanza percorsa sulla lastra
dal componente i-esimo.
del= distanza percorsa dall’eluente.
Mauro Sabella
• Esiste anche il fattore di ritardo relativo (Rrel)
è dato dal rapporto tra la distanza percorsa
dal singolo componente sulla lastrina e la
distanza percorsa da uno standard di
riferimento.
Rrel= di/dst=Rfi/Rst
Mauro Sabella
Parametri che condizionano la
selettività:
1. Natura chimica e attività della fase
stazionaria.
2. Struttura dei pori presenti nei granuli della
fase stazionaria.
3. Spessore dello strato
4. Temperatura e grado di saturazione
dell’ambiente in cui avviene la separazione
5. Composizione della fase mobile.
Mauro Sabella
Come si determina Rf
del= 10 cm
d1= 8 cm
Rf1=8/10=0,8
Mauro Sabella
Efficienza
• Esprime la capacità di un sistema di mantenere
compatta la macchia.
Nella TLC la macchia si
espande solo per fenomeni
di diffusione molecolare.
Macchia
compatta
Tanto più lunga sarà la corsa,
Maggiormente si espanderà la macchia
Mauro Sabella
Macchia
espansa
• Nella TLC il concetto di piatto teorico non ha
grande importanza, verrà ripreso quando
passeremo alla cromatografia su colonna.
• In ogni caso l’efficienza dipende dagli stessi
fattori:
1.
2.
3.
4.
Granulometria
Distribuzione granulometrica
Qualità dell’impaccamento
Geometria delle particelle.
Mauro Sabella
Risoluzione
• È la capacità di un sistema di fornire macchie
ben distanziate fra loro alla fine della
eluizione.
• Si indica con Rs e dipenda sia dall’efficienza che dalla
selettività.
• Si calcola ne seguente modo:
d = distanza fra i centri
delle due macchie.
Wa e Wb =è il diametro
di ciascuna macchia.
Mauro Sabella
Calcolo della risoluzione
Wa=Diametro macchia a= 1,2 cm
d= distanza tra
i due centri
delle macchie
= 5,2 cm
Wb= diametro
macchia b = 0,35
cm
Le due macchie si possono considerare risolte se Rs > 1
Mauro Sabella
Mauro Sabella
Capacità
• È la quantità massima di campione che può essere depositata
in base allo strato. Se si supera tale parametro, le macchie
tendono a deformarsi pregiudicando le prestazioni.
Mauro Sabella
1: macchia regolare.
2: tailing, abbastanza
frequente.
3: fronting: raro
4: deformazione dovuta
alla foratura dello strato
durante la semina.
5: strisciata, quantità
eccessiva di campione
depositato.
Regolare
tailing
fronting deformazione strisciata
I vari tipi di macchie
Mauro Sabella
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Grandezze, parametri e prestazioni di una TLC