Nel laboratorio di fisiologia delle membrane si studiano proteine di
membrana che sono trasportatori di amminoacidi.
Le ricerche attuali riguardano principalmente i seguenti argomenti:
1) Relazioni struttura-funzione in KAAT1, CAATCH1 e GAT-1,
appartenenti alla superfamiglia dei trasportatori di neurotrasmettitori
Na+ e Cl- -dipendenti (SLC6).
2) Modulazione dell’espressione e localizzazione dei trasportatori
del glutammato appartenenti alla famiglia dei trasportatori per
amminoacidi eccitatori Na+/ K+ -dipendenti in condizioni fisiologiche
e patologiche.
3) Visualizzazione di proteine di membrana tramite la microscopia a
forza atomica (AFM).
Relazioni struttura-funzione nei cotrasportatori
KAAT1, CAATCH1 e GAT-1, appartenenti alla superfamiglia
dei trasportatori di neurotrasmettitori Na+ /Cl--dipendenti
(SLC6)
Scopo della ricerca
Individuare i determinanti strutturali
dell’attività di trasporto mediante
espressione funzionale delle proteine
mutanti in oociti di Xenopus laevis
Modulazione dell’espressione e localizzazione dei
trasportatori del glutammato in condizioni fisiologiche e
patologiche.
1) Cellule epiteliali e neuronali:
Studiare i meccanismi molecolari di regolazione
dell’espressione in superficie dei trasportatori in
condizioni fisiologiche e patologiche (Alzheimer,
Parkinson)
EAAC1/SV2
2) Cellule endocrine del pancreas
• Valutare l’espressione e la funzione dei
trasportatori del glutammato in condizioni
fisiologiche
• Verificare eventuali alterazioni nella loro
espressione in condizioni patologiche (Diabete)
Applicazione della microscopia a forza atomica (AFM) allo
studio della membrana plasmatica di oociti di X. laevis
Caratteristiche dell’AFM
• Risoluzione
laterale
subnanometrica
nanometrica
e
verticale
• Possibilità di lavorare in condizioni fisiologiche (senza
fissazione, colorazione, vuoto)
•Requisito del campione biologico: campione piatto e
adeso al supporto
Immagini AFM
Obiettivi della ricerca
•Sviluppo di protocolli di preparazione di
frammenti di membrana idonei per l’analisi
AFM
1 mm
Citoscheletro corticale di
actina
100 nm
Complessi proteici sulla
membrana plasmatica
• Analisi dell’organizzazione della membrana
plasmatica di oociti di X. laevis
•Analisi di membrane purificate da oociti
esprimenti proteine eterologhe.