Q-TOF
Lo strumento piu’ potente per l’identificazione di incogniti
– Maggiore selettività e riduzione del rumore
– Frammenti in Massa Accurata
Come funziona un QTOF?
Primo quadrupolo
in SIM!
m2
m4
Quad Mass Filter (Q3)
Quad Mass Filter (Q1)
m1
m3
a
Collision Cell
Lens 1 and 2
Spettri in MSMS ACCURATA!
HED Detector
Diphenhydramine con Q-TOF
16.27
5500
13.83
STD ESI: 0.25 mL/min
flow Q1=256 (2.5 wide),
CE=10v, 167 (0.1 wide)
EIC
500 fg
5000
4500
4000
3500
3000
1000 fg
9.20
200 fg
2000 fg
11.43
2500
2000
1500
6.99
4.95
1000
2.84
500
0 0
2
4
6
8
10
12
14
16
167.0805
499
450
400
MS/MS spectrum at 1 pg.
Background substracted
350
300
250
200
150
100
50
0
71.0826
60
80
100
117.0875
120
168.0836
179.0656
152.0602
140
160
180
257.1350
200
220
240
260
Tabella comparativa degli strumenti
Qualitativa Sensibilità Sensibilità in Sensibilità in Sensibilità in
SIM
SIM
SCAN
SCAN
(campione (campione (campione
(campione
semplice) complesso) semplice) complesso)
Quadrupolo
6
10
6
7
5
TOF
8
n/a (7)
n/a (7)
8
7
Sequenziamento di
n/a (8)
10
peptidi
Ion Trap
9
n/a (8)
Triplo
Quadrupolo
7
8
10
6
8
Q-TOF
10
n/a (6)
n/a (8)
7
10
Investimento: Q-TOF > QQQ ≈ TOF ≈ Ion Trap > Single quad
8
Il nuovo QTOF Agilent 6520 QTOF
Sensibilità, velocità di scansione, accuratezza di
massa che ridefiniscono la categoria dei QTOF
Più informazioni dai campioni più complessi
• Sensibilità X10 (Attomoli)
• Ampio intervallo dinamico (5 decadi)
• Elevata velocità di scansione (20/sec) e fino a 18,000 di risoluzione
Identificazione semplice di composti incogniti
• Accuratezza di massa X2 (<2 ppm in MS e <5 ppm in MS/MS)
• Autotune semplice ed efficace
Benchmarking – Sensibilità per piccole molecole
200 pg MDMA (3,4-methylenedioxymethamphetamine)
1.61
0.68
400
5.0e5
350
4.5e5
Agilent QTOF
4.0e5
300
Altri QTOF
3.5e5
250
3.0e5
S/N = 230
S/N = 10
2.5e5
200
2.0e5
150
1.5e5
100
1.0e5
50
5.0e4
0
0.2!
! 0.6
1.0
1.4
Time, min
1.8
0
0.5
1.0
1.5
2.0
Time, min
2.5
3.0
Un paragone – Sensibilità su un peptide in MS/MS
Infusione ESI, Glu-Fib, MS/MS dell’m/z 876
1.00
72.0791
Agilent QTOF
6400
6200
0.90
5800
5600
0.85
10-20X sopra
il LOD
5200
5000
4800
4600
4400
3000
0.70
0.55
187.0662
0.50
813.3683
333.1794
0.45
480.2426
0.40
175.1143
0.35
2200
2000
1800
240.1288
1600120.0774
1400
0.75
0.60
2800
2600
2400
333.19855
0.65
4000
3800
3400
3200
LOD
0.80
684.3291
4200
3600
Altro QTOF
0.95
6000
5400
187.06339
268.11402
175.12511
246.160
95
480.25381
684.35544
785.83143
0.30
1056.4458
0.25
942.4062
1285.5122
230.0715
1171.4684
1200
87.0529
1000
627.3093
497.1879
800102.0522
337.1420
268.1223
600
740.2681 924.3967
1039.4248
355.1508515.1935
612.2114
400159.0733316.1450
1268.4917
1570.6306
1154.4547
785.8255
1296.4777
853.2747
200 55.0531 303.2225
1022.3982
409.1285
482.2451
667.2974
0
100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100 1200 1300 1400 1500 1600 1700
m/z, amu
0.20
0.15
231.12109
0.10
0.05
0.00
100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 750 800 850 900 9501000
m/z, amu
Metaboliti: urina maschile/femminile
Identificazione picco a 28.87
minuti
Formula bruta
C24H30O6
Error –0.9 ppm
Estriol triacetate
Ioni pseudomolecolari
messi in relazione tra
loro
Tabella comparativa degli strumenti
Qualitativa Sensibilità Sensibilità in Sensibilità in Sensibilità in
QA/QC, SIM
verifica eSIM
SCAN
SCAN
(campione
(campione (campione (campione
purificazione
prodotti
semplice) complesso) semplice) complesso)
Quadrupolo
6
10
6
7
Quantitativa di
TOF
8
n/a (7)
n/a (7)
8
composti target
Può fare
tutto...
Metabolomica,
Il primo passo
dopo
Ion Trap
9
n/a (8)
n/a (8)
10
farmacocinetica,
Triplo/TOF
il DAD
Tossicologico,
tossicologico
Triplo
7 Tossicologico,
8
10
6
Screening/Profiling
Quadrupolometabolomica,
proteomica,
sintesi,
proteomica
Q-TOF
10Strumento
n/a (6)
n/a (8)
7
farmaceutico
universale
Investimento: Q-TOF > QQQ ≈ TOF ≈ Ion Trap > Single quad
5
7
8
8
10
Il portafoglio completo di Agilent
• Quadrupolo: per sviluppo metodi, screening e quantitativa a
basso costo
• TOF: screening e identificazione in massa accurata
• Ion Trap: identificazione e quantitativa tramite MSMS
• QQQ: analisi quantitativa in tracce su matrici complesse
• Q-TOF: identificazione, screening e quantitativa in massa
accurata
Grazie per l’attenzione...
[email protected]