SERVIZIO BIO-PLEX CRIBI A N A L I S I S I M U L T A N E E D I P R O T E I N E Principio Funzionale Principio Funzionale Principio Funzionale La Camera di Lettura M U L T I W E L L B I O P L E X Reporter channel Classify channel Saggi per Citochine Saggi per Citochine Sandwich Immunoassay - Cytokine - IL-2 TNFa IL-4 GmCSF Kit applicativi Citochine umane (27): IL-2 IL-4 IL-6 IL-8 IL-10 IFN- TNF-a GM-CSF IL-1b IL-5 IL-7 IL-12 (p70) IL-13 IL-17 MCP-1 (MCAF) MIP-1b Eotaxin Rantes IL-1ra IL-9 IL-15 PDGF bFGF VEGF Nuovo kit 27-plex: 171-A11127 HUMAN CYTOKINE 27-PLEX, 1X96 Kit applicativi Citochine di topo (23): IL-1b IL-5 IL-2 IL-10 IL-4 IL-1a IL-3 IL-6 IL-12 (p40) IL-12 (p70) MIP-1a Rantes IL-13 MCP1 Eotaxin IFN- TNF-a GM-CSF IL-17 MIP-1b IL-9 KC Nuovo kit 23-plex: 171F11241 MOUSE CYTOKINE 23-PLEX, 1X96 Kit applicativi Citochine di Ratto (9): GM-CSF IFN- IL-1b IL-2 IL-4 IL-6 IL-10 TNF-a Kit 9-plex: 171K11070 RAT CYTOKINES 9-PLEX A PANEL,1X96 Saggi per Fosfoproteine Saggi per Fosfoproteine Sandwich Immunoassay – Phospho P JNK IBa P P STAT3 ERK1 P Saggi per Fosfoproteine 15 Phosphoprotein Assays – – – – – – – Phospho-Erk2 Phospho-IB-a Phospho-JNK Phospho-p38 MAPK Phospho-Stat3 Phospho-ATF2 Phospho-Erk1 –Phospho-Erk1/2 –Phospho-EGFR –Phospho-Akt –Phospho-GSK-3a/b –Phospho-p70 S6 –Phospho-p90 RSK –Phospho-Stat2 – Phospho-TrkA – Phospho C-Jun – Phospho HSP 27 – Phospho p53 – Phospho NF-kβ – Phospho S6 Ribosomal P. LISATI DI COLTURE CELLULARI LISATI DI CAMPIONI TISSUTALI Saggi per Fosfoproteine 8 Total Target Assays – – – – – – – – Total Total Total Total Total Total Total Total Erk2 IBa p38 MAPK ATF-2 JNK Akt p90 RSK c-Jun Correlazione tra Bio-Plex e W. Blot All of our cytokine and phosphoprotein detection assays are validated against ELISA and western blot to validate the results. Here we look at the correlation between the Bio-Plex phosphoprotein detection assay and western blot for Erk and Stat-3. Phospho-Erk Phospho-Stat3 Western Blot, 8 ug protein/lane Western Blot, 8 ug protein/lane Bio-Plex Assay Bio-Plex Assay 1600 MFI of Bio-Plex +2SD 4000 2000 1200 800 400 0 a He l CO H2* TN F/ H ela UV /H EK EG F/ H ek II F5 * 0 II D9 * CO H3* II C9 * CO H4* II B1 * MFI of Bio-PlexAssay 6000 1 2 3 4 5 6 Un Sistema Aperto Formati Applicabili Amine Coupling Kit Amine Coupling Kit Chimica dell’accoppiamento o C oH + o R C N R N = H H Carbodiimide reaction • Le beads vengono attivate dall’EDC (1-ethyl-3 (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrocloride) • Reagiscono con S-NHS (N-hydroxysuccinimide) • Si formano esteri stabili che reagiscono con il gruppo NH2 della proteina per formare un legame covalente Amine Coupling Kit 171-406001 Amine Coupling Kit Per 30 reazioni di accoppiamento 171-5060XX COOH Beads Regione XX, 1 ml Per 10 reazioni di accoppiamento Un coupling kit e 3 ml di beads sono sufficienti per 60 multiwell da 96 pozzetti Saggi di Interazione DNA - Proteine Interazione DNA-Proteine