Morfologia sferoidale (approx. 100 nm) INVOLUCRO glicoproteine SU e TM Capside icosaedrico o a forma tronco-conica Genoma diploide RNAss a polarita’ positiva (9-10 Kb) HIV gag cap pol RNA genomico env polyA vertebrati alterazioni del sistema immunitario tumori AlphaBetaGammaEpsilonretrovirus leucemie Deltaretrovirus patologie neurodegene rative Lentivirus gp120 /NCp7 integrasi gp41 proteina nucleocasidica p9 NC proteina di matrice p17 MA proteasi p24 CA RETROTRASCRIZIONE COMPLESSO DI PREINTEGRAZIONE Trascrittasi Inversa : RT RT: DNA polimerasi RNA-dipendente RT: RNAsi H RT: DNA polimerasi DNA-dipendente RT manca di attività “proof reading” 1-10 errori/genoma DNA PROVIRALE U3 LTR R LTR INTEGRAZIONE del DNA PROVIRALE PROCESSAMENTO: le estremità del DNA virale vengono riconosciute da IN e tagliate per formare idonee estremità 3’ (avviene nel PIC). INTEGRAZIONE: rottura dei legami fosfodiesterici nel DNA dell’ospite (4-6 bp) Inserimento delle estremità 3’virali (processate) Enzimi di riparo (della cellula ospite) L’integrazione è sito specifica per il genoma virale (estremità), ma casuale nel genoma della cellula ospite PROMOTORE PROVIRUS INTEGRATO PROVIRUS INTEGRATO PolyA ATTIVA TRASCRIZIONE DI HIV-1 RNA polimerasi II cellulare Trascritti corti proteina TAT TRASCRIZIONE HIV-1 9.1 kb pr55 MA CA MA CA p17 p24 NC NC p15 p2 NC p7 p1 p6 MA CA NC PR PR p10 RT RT p51/66 IN IN p31 4.3 kb Gag-pol e env mRNA sono tradotti come poliproteine processate successivamente SU SU gp120 TM gp41 TM gp160 Ciclo di replicazione di HIV-1 TRASCRIZIONE di mRNA e vRNA SINTESI PRECURSORI PROTEICI ASSEMBLAGGIO sulla plasmamembrana MATURAZIONE attività della PROTEASI a Enfuvirtide (T20) b inibitori nucleosidici inibitori nucleotidici (AZT) (Tenofovir) inibitori non-nucleosidici (Nevirapina, Efavirenz) c molecole peptidomimetiche in grado di bloccare il sito catalitico della proteasi (Ritonavir) VIRUS a RNAss di POLARITA’ NEGATIVA RNA virale non è infettante il genoma virale non può essere tradotto l’RNA virale è trascritto in mRNA (polarità+) I virioni contengono una RNA polimerasi RNA-dipendente virus provvisti di involucro ORDINE MONONEGAVIRALES 150-300 nm morfologia: sferico pleomorfica (forme filamentose) RpRd trascrittasi e replicasi virale GENOMA PARAMYXOVIRIDAE Tr sequenze intergeniche EIS TRASCRIZIONE dei PARAMYXOVIRUS sequenze intergeniche EIS Modello “Start-Stop Pol (P+L) inizia la sintesi del mRNA al terminale 3’ L: RpRd P: recruta L sul templato. trascrizione della sequenza Leader la Pol si ferma alla sequenza STOP la trascrizione ricomincia al 3’ (sequenza START) del gene N la trascrizione di N continua fino alla sequenza STOP Pol ricomincia la sintesi al 3’ del gene P mRNA monocistronici mRNA provvisti di “ cap” e “poly A” ruolo delle sequenze EIS SEQUENZE STOP per scivolamento viene sintetizzata la coda poliA (200nt) all’estremità 3’ del trascritto Terminazione del trascritto SEQUENZE START 5’ “capping” del mRNA Trascrizione polarizzata Sequenze EIS L PP P P 3’ End-Intermediate-Start N P M F HN L 5’ Transizione tra trascrizione e replicazione del genoma dei PARAMYXOVIRUS bassi livelli di N: favoriscono la sintesi di mRNA alti livelli di N: la RpRd continua la sintesi di vRNA attraverso le sequenze EIS CICLO DI REPLICAZIONE QuickTime™ and a GIF decompressor are needed to see this picture. virus Sendai FUSIONE Trascrizione mRNA Sintesi di proteine Trascrizione vRNA Assemblaggio e gemmazione 2 Sottofamiglie: Paramyxovirinae Pneumovirinae Genere Ospite Specie Respirovirus virus parainfluenzale 1-3 virus Sendai Morbillivirus virus del morbillo virus del cimurro del cane uomo Rubulavirus virus della parotite uomo Henipavirus virus Hendra virus Nipah Pneumovirus virus respiratorio sinciziale (RSV) virus respiratororio bovino infezione vie aeree superiori uomo topo uomo/equini uomo/suini uomo Virus Respiratorio sinciziale - RSV •isolato nel 1956 1- infezione delle prime vie aeree 2- infezione delle vie aeree profonde danno immunomediato (necrosi ed edema della mucosa dei bronchi ) grave infezione in età pediatrica ospedalizzazione nel 30% dei casi SINCIZI in cellule epiteliali infettate con RSV Virus della Parotite isolato nel 1945 ospite:uomo 1- replicazione nelle cellule epiteliali delle vie aeree superiori 2- linfonodi locali - distali - organi del SRE 3- infezione delle parotidi (infiammazione locale=orecchioni) Complicazioni orchite (20%; più frequente negli adulti) virus del Morbillo •altri sintomi e complicazioni –otite –polmonite –infezioni al CNS (as SSPE, subacute sclerosing panencephalitis) febbre alta Vaccino attenuato MPR (trivalente): Morbillo (Paramyxoviridae), parotite(Paramyxoviridae), rosolia (Togaviridae) 15 mesi di età From Flint et al., ASM Press, 2004