Laboratorio di Analisi Chimico-Cliniche
Analiti: Glucosio, creatinina, calcio, magnesio, proteine
totali, azoto totale, colesterolo, trigliceridi, etc..
I risultati hanno un uso diagnostico, nel monitoraggio terapeutico,
in medicina preventiva e del lavoro ( “check-up” di salute);
Importanza della validità dei risultati analitici e del trattamento dati
Scelta del metodo analitico:
Ripetibilità: risultato uguale quando l’esame viene ripetuto sullo stesso
soggetto, piccole variazioni dovute a errori sperimentali accidentali
Sensibilità: riflette la presenza e l’entità della patologia, misura il grado
di associazione tra risposta dell’esame e gravità della malattia
Specificità: risposte caratteristiche di una data condizione patologica
Potere di discriminazione: differenzia soggetti patologici dai sani o da
altre patologie o da differenti gradi di gravità
Controllo di qualità: risultati attendibili
Controllo di qualità: viene fatto intra-laboratorio e/o inter-laboratorio
Indice di precisione (riproducibilità e ripetibilità)
Indice di accuratezza (vicinanza al valore vero)
Variabilità
Errori casuali: inevitabili, indice della precisione
Errori sistematici: strumentazione, evitabili
Errori grossolani: operatore, evitabili
Metodi per eseguire il controllo di qualità: metodi statistici
Statistica descrittiva - da usare nel definire la distribuzione dei
dati, nel calcolo di media, deviazione standard, mediana e percentili;
intervalli di confidenza; limiti di precisione dei metodi, etc..;
Statistica inferenziale – confronti statistici, controlli intra e
inter-laboratorio
Valutazione dell’Indice di precisione di un metodo analitico –
Costruzione della carta di controllo: si valuta la dispersione delle
misure intorno alla media aritmetica ottenuta dalla misura ripetuta
di un campione di controllo (sempre lo stesso).
Carta di controllo: es. concentrazione di glucosio ematico – distribuzione
Gaussiana; la carta di controllo contiene il valore medio (x, media):
x, x ± 2s (limite di allarme) e x ± 3s (limite di intervento);
Con questo metodo vengono rilevati e contenuti i vari tipi di errore
analitico; se la distribuzione segue un andamento gaussiano i dati devono
rientrare al 95% nei limiti d’allarme e al 100% nei limiti d’intervento.
Valutazione dell’ Indice di accuratezza di un metodo analitico:
Indice percentuale di “distanza” dal valore vero –
Anche in questo caso, si effettuano misure ripetute (es. glucosio
ematico) dello stesso campione con il metodo analitico da validare
– il campione deve essere uno standard di controllo (μ0), a contenuto
perfettamente determinato e noto -
Formula:
x – μ0 . 100 =
μ0
La deviazione in percentuale comunemente accettata in Chimica
Clinica è  10%; eccezione:  20% per le attività enzimatiche, il
conteggio di cellule, risposte cellulari. Saggi a > variabilità intrinseca.
Con la carta di controllo si può effettuare la valutazione sia dell’
indice di precisione che di accuratezza.
ESERCITAZIONE n° 1 DI ANALISI BIOCHIMICO CLINICHE
APPLICAZIONE DI METODI STATISTICI ALL’ANALISI CHIMICO
CLINICA: COSTRUZIONE DELLA CARTA DI CONTROLLO
(indici di precisione e di accuratezza dei metodi analitici)
Valutazione degli errori nell’analisi chimico clinica: ad esempio della misura del glucosio
ematico (100 mg/dl). Controllo di precisione e accuratezza del metodo all’interno del
laboratorio.
PRECISIONE : Data una serie di risultati analitici, ottenuti dalla misura giornaliera per 24
giorni lavorativi consecutivi di un campione di controllo rispetto al valore di glucosio ematico, si
dovrà:
a)
Costruire l’istogramma di frequenza, dopo aver calcolato il campo di variazione o range e
l’ampiezza delle classi in cui dividere il range; verificare se la Gaussiana è rispettata
b)
Calcolare gli indici di tendenza centrale (media) e di dispersione (deviazione standard s e
coefficiente di variazione CV%) dei valori dati;
costruire la carta di controllo identificando il valore medio m e i valori ± 2s (limite di
allarme) e ± 3s (limite d’intervento);
c)
Data una seconda serie di dati ottenuta dall’analisi del glucosio ematico durante il periodo di
controllo, inserire i valori nella carta di controllo e commentare il risultato;
Valori per la carta di controllo
68%
5%
x-3s
95%
x-2s x-s
x
Durante il periodo di controllo
Seconda serie di dati
x+ s
x+2s
x+3s
Tutti i dati (100%) dovrebbero
nell’intervallo: x±3σ se non ci
sono errori grossolani.
Tra il limite d’allarme (± 2 s) e il limite d’intervento
(± 3s): non più del 5% dei dati
VERIFICA DELLA PRECISIONE nel periodo di controllo sono stati ottenuti i seguenti valori:
Misurazione
data
risultato
1
19/10/2009
99.7
2
20/10/2009
97.85
3
21/10/2009
99.10
4
22/10/2009
102.5
5
23/10/2009
98.7
6
24/10/2009
99.2
7
26/10/2009
99.5
8
27/10/2009
99.7
9
28/10/2009
99.8
10
29/10/2009
99.99
11
30/10/2009
100.12
12
31/10/2009
100.50
13
2/11/2009
98.5
14
3/11/2009
99.5
15
4/11/2009
97.9
16
5/11/2009
99.7
17
6/11/2009
99.2
18
7/11/2009
98.3
19
9/11/2009
99.85
20
10/11/2009
99.4
21
11/11/2009
98.35
22
12/11/2009
99.05
Esempio dei tipi di errori rilevati mediante la carta di controllo
Il quadrato bianco indica che vi è errore:
commentare
ACCURATEZZA :
d) Date tre serie di valori sperimentali ottenuti per l’analisi di :
Glucosio (mg/dl), Potassio (mEq/L), Creatinina (mg/dl) e dati i valori veri per ogni
analisi, calcolare l’indice di accuratezza per ogni tipo di analisi
Valore vero
Valori Sperimentali
Glucosio (mg/dl)
85.2
83.4 – 86.9 – 84.2
Potassio (mEq/L)
5.1
5.4 – 4.9 – 5.2
Creatinina (mg/dl)
0.7
0.8 – 0.9 – 0.6
Accuratezza