F. Corelli CHIMICA FARMACEUTICA E TOSSICOLOGICA I FARMACI ANTI-ULCERA Principali fattori causali dell’ulcera peptica •Aumento della secrezione di HCl •Insufficiente protezione della mucosa contro l’acido gastrico •Infezione da Helicobacter pylori Farmaci antiulcera •Farmaci antiacidi •H2 antagonisti •Inibitori della pompa protonica •Farmaci vari (antimuscarinici, antigastrinici, proteggenti della mucosa) •Farmaci antimicrobici Farmaci Antiacidi Sono farmaci sintomatici, non curativi, usati per neutralizzare l’iperacidità gastrica. Possibili limiti ed effetti indesiderati: •Alcalosi sistemica •Azione sulla peristalsi intestinale •Formazione di anidride carbonica (NaHCO3) •“Ritorno acido” Farmaci Antiacidi Sistemici: sodio bicarbonato Può provocare alcalosi sistemica, eruttazioni gassose con dilatazione della parete gastrica, “ritorno acido” Non sistemici: ossidi, idrossidi, sali inorganici ed organici del calcio, del magnesio, del bismuto e dell’alluminio. Es.: Magaldrato (Riopan®): [Al5Mg10(OH)31(SO4)2] idrato Antagonisti H2 : Introduzione • I recettori H2 sono accoppiati alla proteina G, e si trovano principalmente nelle cellule parietali (localizzate nella mucosa del fondo e nel corpo dello stomaco). I recettori H2 sono anche presenti nel muscolo liscio vascolare e bronchiale, ma gli H2 antagonisti hanno effetti estremamente limitati in tali distretti. • La stimolazione dei recettori H2 della parete da parte dell’istamina aumenta cAMP intracellulare che, a sua volta, attiva l’enzima H+/K+ ATPasi contenente un gruppo tiolico, enzima noto come pompa protonica. Ciò determina attiva secrezione di acido gastrico. • Oltre all’istamina, anche la gastrina e l’acetilcolina (che mobilitano entrambe il Ca+2 intracellulare) stimolano le cellule parietali a secernere acido attraverso l’attivazione dell’enzima H+/K+ ATPasi. Antagonisti H2 : Farmacologia • Secrezione di acido gastrico • Gli antagonisti H2 inibiscono in maniera competitiva e dose-dipendente la secrezione di acido gastrico indotta dall’istamina. • In minor misura questi agenti inibiscono anche la secrezione acida indotta da gastrina e Ach • Gli antagonisti H2 inibiscono sia la secrezione basale che quella notturna, come pure quella stimolata dal cibo • Diminuiscono anche la secrezione del fattore intrinseco, ma non in misura tale da compromettere l’assorbimento della vitamina B12 Antagonisti H2 : SAR R1 R2 HN R3 N • La struttura degli antagonisti H2 è prevalentemente idrofila e, a differenza degli H1 antagonisti, deve essere "istamino-simile" • Non possono presentare cariche positive in corrispondenza dell’area molecolare in cui l’istamina è cationica, anche se cationi sono permessi a livello dell’anello imidazolico • Vengono progettati e sintetizzati come modificazioni strutturali dell’agonista, istamina. La sintesi del primo H2 antagonisa, la Cimetidina (Tagamet) è stato uno dei primi tentativi di vero rational drug design che ha avuto successo Antagonisti H2 : SAR R1 R2 HN R3 N • L’anello imidazolico non è fondamentale per l’attività. Altri sistemi aromatici, purchè provvisti di carattere basico, possono portare ad inibitori attivi • Se l’anello imidazolico è presente, la struttura deve promuovere e mantenere il tautomero N-H perché l’antagonista sia riconosciuto dal recettore e possa legarsi ad esso (ricorda che questo è il tautomero dell’istamina che inizialmente si lega al recettore) • Il tautomero N-H deve essere evitato a tutti i costi, altrimenti si avrà la stimolazione del recettore, mentre invece vogliamo che questi composti antagonizzino il recettore H2! Antagonisti H2 : SAR R1 R2 HN R3 N • R1: Deve essere un gruppo ad effetto +I per spingere elettroni verso l’anello e così favorire il tautomero N-H a spese del tautomero N-H. • CH3 è l’unico gruppo usato come R1. E’ elettrondonatore e piccolo, per cui minimizza l’impedimento sterico nel binding al recettore • R2: Deve essere un gruppo ad effetto -I per tirare via elettroni da N. Anche questo effetto favorisce il tautomero N-H • R2 deve avere dimensioni equivalenti a quelle di una catena butilica al fine di mantenere la giusta distanza tra l’anello aromatico ed R3 (due gruppi importanti per il binding recettoriale) Antagonisti H2 : SAR R1 R2 HN R3 N • Il sostituente R2 è comunemente rappresentato da un gruppo etiltiometile (-CH2-S-CH2-CH2-) perché S ha effetto -I e presenta approssimativamente le stesse dimensioni di un gruppo CH2 • La posizione ottimale per S in questa catena è ad un atomo di carbonio di distanza dall’anello. In tal modo: • S è abbastanza vicino all’anello per esplicare l’effetto induttivo elettronattrattore (favorendo N-H) ma non è coniugato con l’anello, pertanto il suo doppietto elettronico non può avere effetto +R (il che favorirebbe N-H) • S può anche avere un ruolo importante nel permettere il giusto posizionamento reciproco di R3 e dell’anello per avere la massima affinità di binding Antagonisti H2 : SAR eR1 S HN R3 L'effetto i ndutti vo el ettronattrattore dell 'atomo di S aumenta l a potenza H2 antagonista Favori sce il tautomero NH N eR1 N S NH R3 L'effetto el ettrondonatore per ri sonanza di mi nui sce l a potenza H 2 antagonista Favori sce il tautomero NH Antagonisti H2 : SAR R1 R2 HN R3 N • R3: deve essere polare ma non-cationico • All’inizio fu provato il gruppo guanidinico, ma non risultò efficace a causa della basicità eccessiva. Dava origine ad un catione, con conseguente azione H2 agonista N H C NH2 NH2 pKa - 13 acido molto debole N H C NH2 NH base molto forte Perché ??? Antagonisti H2 : SAR Risonanza! N H C NH2 NH2 N H C NH2 NH2 N H C NH2 NH2 Stabilizzazione per risonanza dell'acido coniugato (catione) Lo ione guanidinio risuona tra tre formule canoniche di risonanza equivalenti che consentono una notevole delocalizzazione della carica positiva con conseguente forte stabilizzazione del catione, che è la specie predominante a pH fisiologico. Infatti, a pH 7.4, il rapporto tra forma dissociata (d) e forma indissociata (i) è d/i = 106/1, con effetto H2 agonista Antagonisti H2 : SAR R1 R2 HN R3 N • Come gruppo R3 fu poi provato un residuo tioureico NH C NH2 S • Lo zolfo attrae elettroni dagli atomi di azoto dell’urea, che perciò non è basica e non dà origine a cationi a pH 7.4. • Questo composto presentava buona attività H2 antagonista, ma risultò molto tossico (produceva agranulocitosi) Antagonisti H2 : SAR R1 R2 HN R3 N • Si ebbe successo con l’uso di altri gruppi elettronattrattori che permisero di eliminare la basicità della guanidina NH C NO2 C NH2 NH N C C NH2 N 1,1-Diamminonitroetene Cianoguanidina • Si pensa che il gruppo NH della guanidina formi legame a idrogeno con il recettore H2 • L’aggiunta di un CH3 all’azoto della guanidina modificata determina un aumento nel carattere lipofilo della molecola, che favorisce l’antagonismo H2. L’introduzione di questo CH3 permette di ottenere un certo bilanciamento idrofilo/lipofilo in queste molecole molto polari Antagonisti H2 : Prodotti H N H3C S HN N H N N C H3C CH3 N O N S CH3 N NH2 S S Famotidina CH3 Ranitidina NH2 N H N NO2 Cimetidina H2N H N N O2 S H3C NH2 H N N N CH3 S H N CH3 S NO2 Nizatidina Antagonisti H2 : Prodotti Indicazioni: ulcera duodenale; ulcera gastrica benigna; riflusso gastro-esofageo (RGE); condizioni di ipersecrezione patologica; prevenzione di emorragie del tratto gastrointestinale superiore Forme Farmaceutiche: compresse; capsule (Nizatidina); polvere per sospensione orale (Famotidina); sciroppi (Ranitidina); soluzioni per iniezione ed infusione Antagonisti H2 : Prodotti H N H3 C 1. Cimetidina (Tagamet) H N S HN N C H3 N C N Note SAR • L’anello aromatico imidazolico ha carattere basico • R1 = CH3: gruppo +I che favorisce il tautomero N-H richiesto per il riconoscimento da parte del recettore H2 ma non per l’attivazione del recettore • R2 = etiltiometile: gruppo -I che favorisce la forma tautomerica N-H; isosterico con la catena butilica separazione ottimale tra l’anello aromatico e R3 • R3 = cianoguanidina: polare, ma neutra. 100% di forma nonionizzata a pH 7.4, il che assicura un effetto antagonista puro, senza alcuna azione agonista • N-CH3 aumenta il carattere lipofilo, con conseguente aumento di attività Antagonisti H2 : Prodotti 1. Cimetidina (Tagamet) H N H3 C H N S HN N C H3 N C N • Interazioni farmaco-farmaco • La Cimetidina inibisce il citocromo P450 (CYP450) • Provoca un aumento significativo della durata di azione di altri farmaci cosomministrati che vengono metabolizzati dal CYP450 • L’anello imidazolico è implicato in questo tipo di attività. L’atomo di azoto dell’imidazolo complessa il Fe+2 dell’eme che è associato all’enzima CYP450. • Anche il CYP3A4 ed altre isoforme dell’enzima vengono inibite, aumentando il rischio di interazioni farmacofarmaco. Antagonisti H2 : Prodotti 1. Cimetidina (Tagamet) H N H3 C H N S HN N C H3 N C N • Altri Effetti Indesiderati • Effetti collaterali antiandrogenici possono causare ginecomastia ed impotenza • Ha maggiore propensione rispetto ad altri H2 antagonisti a provocare effetti sul SNC (e.g. confusione mentale) • Gli antiacidi riducono l’assorbimento po della Cimetidina. Dal momento che i pazienti assumono sia antiacidi che H2 antagonisti per il trattamento di RGE o altri disturbi gastrici, questo è un aspetto da considerare attentamente • Nel caso di cosomministrazione, antiacidi e H2 antagonisti dovrebbero essere assunti a distanza di almeno un’ora gli uni dagli altri. Antagonisti H2 : Prodotti 2. Ranitidina (Zantac) H N O H3 C N H N S CH 3 CH 3 NO Note SAR: • L’anello aromatico del furano con la catena laterale basica dimetilamminometilica è considerato isostere dell’imidazolo • Presenta tra Ar and R3 una catena stericamente equivalente ad un butile ma con effetto elettronattrattore • R3 è un gruppo diamminonitroetilenico: polare, ma nonionizzabile • Vantaggi della Ranitidina rispetto alla Cimetidina: • La potenza è aumentata di 4-10X con un aumento di DOA • La catena laterale basica permette la formazioni di sali idrosolubili • Non ha un anello imidazolico, per cui non inibisce CYP450 2 Antagonisti H2 : Prodotti 3. Famotidina (Pepcid): NH 2 H2 N O2 S N N S NH 2 N NH 2 S Note SAR: • Il gruppo guanidinico sull’anello tiazolico fornisce il centro basico necessario in questi composti • Non ha il gruppo metilico sull’azoto terminale • La potenza è 40-60X quella della Cimetidina e 9-15X quella della Ranitidina • La Famotidina ha un indice terapeutico analogo a quello della Ranitidina • Non ha l’imidazolo, quindi non inibisce CYP450. • Minori interazioni farmaco-farmaco rispetto alla Cimetidina Antagonisti H2 : Prodotti 4. Nizatidina (Axid) H N N H3 C S N CH3 H N CH3 S NO2 Note SAR: • La Nizatidina presenta l’anello aromatico tiazolico della Famotidina ed i gruppi dimetilamminometilico e diamminonitroetilenico della Ranitidina • Possiede attività comparabile a quella della Ranitidina, ma migliore biodisponibilità dopo somministrazione orale • La sua potenza è 5-18X quella della Cimetidina • Non inibisce CYP450 • E’ un’ammina terziaria, perciò può formare sali idrosolubili Antagonisti H2 : Sintesi 1. Cimetidina (Tagamet) H3 C O + EtOOC Cl N 1. Na/NH 3 liq. H3 C formamide NH2 H3 C cisteamina cloridrato H2 N S HCl HOCH 2 etile 5-metilimidazol4-carbossilato HCl H N N 2. HCl EtOOC etile 2-cloroacetato HS H3 C NH2 CHO 2 H N 4-idrossimetil-5-metilimidazolo cloridrato NC H N SCH3 N SCH3 2 HCl N N-cianoimido- S,S-dimetilditiocarbonato 4-(2-aminoetil)-tiometil-5-metilimidazolo dicloridrato N CH3 S CN N H H3 C S H N N N CH3 NH2 CH3 NH CN N H H3 C S H N N cimetidina Rompicapo: Immaginate una via di sintesi del N-cianoimido-S,S-dimetilditiocarbonato a partire da cianamide, KOH, solfuro di carbonio e dimetilsolfato Antagonisti H2 : Sintesi 2. Ranitidina HCl (Zantac) (CH 3) 2NH condensazione HCl + (CH 2O)x + paraformaldeide OH O (CH 3) 2N di Mannich furfurolo NH2 HCl (CH 3) 2N SCH 3 NHCH 3 S O cisteamina cloridrato OH 5-dimetilaminometilfurfurolo O2N HS O NH2 N-metil-1-metiltio2-nitroetenamina NO2 (CH 3) 2N O S N H N H CH3 ranitidina Chi desidera conoscere la sintesi della Famotidina e della Nizatidina può consultere: A. Kleeman, J. Engel et al. Pharmaceutical Substances, 3rd edition, Thieme Inibitori della Pompa Protonica (PPI): Introduzione • Come già detto, la secrezione di acido gastrico da parte delle cellule parietali è regolata dall’enzima H+/K+-ATPasi (pompa protonica). • Poiché l’attivazione della pompa protonica è l’ultimo stadio del processo di secrezione acida, l’inibizione di questo enzima bloccherà la secrezione acida indotta da qualunque mediatore chimico (istamina, gastrina o ACh). Gli inibitori della pompa protonica bloccano anche la secrezione basale di acido gastrico, per cui sono degli agenti terapeutici molto potenti e di ampia portata. • Studi su soggetti affetti da RGE hanno mostrato che si può avere migliore cicatrizzazione dell’esofago con gli inibitori della pompa protonica rispetto agli H2 antagonisti. PPI: Introduzione • I PP inibitori bloccano l’effetto di tutti gli agenti stimolanti la secrezione gastrica, inclusa la gastrina, per cui determinano aumento della secrezione di gastrina con conseguente ipergastrinemia ed iperplasia delle cellule enterocromaffinosimili del fondo gastrico. Fortunatamente non si è osservata nell’uomo la progressione dei carcinomi dello stomaco vista negli animali. . PPI: Chimica • I PPI agiscono formando un ponte disolfuro (legame covalente) con l’enzima. Per fare ciò devono contenere un atomo di zolfo capace di formare tale legame con un gruppo SH dell’enzima. • L’enzima H+/K+-ATPasi presenta 37 residui CYS, in particolare la CYS813 che si pensa formi il legame covalente con i PPI si trova in un loop extracitoplasmatico tra la 5° e la 6° regione transmembranaria della proteina. • Questo residuo critico di CYS è affiancato da aminoacidi anionici alle posizioni 820 e 824. Il loro compito è trattenere gli inibitori cationici attraverso un’interazione ione-ione, che consente di posizionare correttamente il farmaco ai fini del suo legame irreversibile con il residuo di CYS. PPI: Chimica • Derivati benzimidazolici sostituiti (e.g., solfinilbenzimidazoli) sono il prototipo dei PPI. Tutti contengono un anello piridinico basico che si protona nel fluido gastrico, permettendo il legame del farmaco ai residui anionici dell’enzima. • Questi composti contengono anche un atomo di zolfo (il gruppo solfinile), ma sono dei profarmaci inattivi. • Quando vengono attivati per protonazione, essi subiscono una serie di riarrangiamenti non-enzimatici che rendono reattivo l’atomo di zolfo, che a sua volta si lega covalentemente al gruppo SH della CYS813 dell’ ATPasi. • Una volta che si è formato il ponte disolfuro, l’ H+/K+-ATPasi è inattivata irreversibilmente, per cui i PPI hanno una lunga durata di azione PPI: Meccanismo di attivazione MeO MeO Me Me MeO Me H+ N N S MeO Me Me N H O N MeO H Omeprazolo MeO Me Me Me N N S H O N MeO H Forma protonata attivata N N S H O N N N MeO H H Intermedio spiro labile H2O MeO MeO Me Me S N N NH MeO Me S Enz Me Enz-SH Me Me N N N N S N H2O S OH N H MeO OMe OMe Solfenamide Enzima inattivato Enz-SH Formazione del ponte disolfuro S OH OH Acido solfenico PPI: Meccanismo di azione PPI: Metabolismo dell’Omeprazolo MeO MeO Me Me N N S O Me CYP2C19 N O-dea lchilazione N N MeO Ome prazolo O H Fenolo (ina ttivo) ossidazione riduzione MeO MeO Me Me Me N Me N N MeO S N HO H CYP3A4 Me S O N O N H Solfone (inattivo) MeO S N H Tioete re (inattivo) PPI: Metabolismo del Pantoprazolo MeO HO OMe N N F2 HCO S N H Pantopra zolo O OMe CYP2C19 N O-dea lchilazione N F2 HCO S N H Fenolo (ina ttivo) O PPI: Metabolismo del Rabeprazolo OMe O OH O OMe OMe CYP2C19 N O-dea lchilazione N N N S O N S O Alcol deidrogenasi N ossidazione N OMe O O S H Aldeide (inattiva) Aldeide ossidasi ossidazione riduzione OMe O OMe O O OMe OH OMe N N N S N S O N Solfone (inattivo) O N N H O N Alc ol (ina ttivo) ossidazione N S H Ra beprazolo N OMe H N H CYP3A4 O O H Tioete re (inattivo) H Acido ca rbossilico (ina ttivo) PPI: Interazioni tra farmaci •I PP inibitori si legano in misura notevole alle proteine sieriche e vengono estesamente trasformati dal sistema enzimatico CYP450 (in particolare le isoforme 2C19 e 3A4) in metaboliti inattivi. •Alcuni composti (specialmente il farmaco originario omeprazolo) inibiscono queste isoforme e possono dare importanti interazioni farmaco-farmaco PPI: Sintesi dell’Omeprazolo H3 C OCH 3 CH3 N (CH 3CO) 2O OCH 3 CH3 H3 C CH3 O N H3 C NaOH CH3 OCH 3 CH3 N OH O O SOCl 2 SK S NH2 CH3 O N OC2H 5 NH2 (potassio etil xa ntoge nato) H3 C SH N H CH3 O N NaOH H3 C OCH 3 CH3 N N S NH CH3 O O O O OH H3 C OCH 3 CH3 Cl N MCPBA N (acido metacloroperbe nzoico) S NH CH3 O Omeprazolo OCH 3 CH3 Cl Farmaci Vari Farmaci antiulcera che operano con meccanismi diversi da quelli finora considerati: •Pirenzepina è un antimuscarinico selettivo per i recettori della mucosa gastrica: riduce la secrezione sia di HCl che di pepsina •Proglumide è un inibitore della gastrina che riduce il volume, l’acidità ed il potere proteolitico del succo gastrico •Gefarnato è un antiulceroso ad azione protettiva e trofica sulla mucosa gastrica e duodenale con meccanismo analogo a quello fisiologico •Misoprostolo è un analogo sintetico della PGE1 usato come agente antisecretorio gastrico con effetti protettivi sulla mucosa gastroduodenale Farmaci Vari O H N O N N COOH N HN O O N N Pirenzepina CH3 Proglumide CH3 CH3 CH3 O H3C CH3 O Gefarnato O COOCH3 H3C OH HO Misoprostolo CH3 CH3 Farmaci Antimicrobici La terapia ottimale dei pazienti con ulcera peptica infetti da Helicobacter pylori richiede il trattamento antimicrobico con varie associazioni di antibiotici e chemioterapici, ad es.: •Bismuto, metronidazolo, tetraciclina (cui spesso si aggiunge un antisecretivo) •Metronidazolo, amossicillina (più omeprazolo) N O 2N N CH3 OH Metronidazolo