STS 0292 In quale ordine devo prelevare le provette? Sistema Vacutainer® (Becton Dickinson) Sistema Monovette® (Sarstedt) Provetta citrato, celeste Provetta citrato, celeste Riempire fino al segno apposto Riempire fino al segno apposto Gettare la provetta Gettare la provetta Non centrifugare la provetta Non centrifugare la provetta Provetta siero con gel, gialla-oro Provetta siero con gel, gialla-oro Lasciare coagulare per 30 minuti a temperatura ambiente prima di centrifugare Lasciare coagulare per 30 minuti a temperatura ambiente prima di centrifugare 1ʹ300 → rcf 15 min 2ʹ500 → rcf 10 min Provetta litio-eparina, verde chiara con gel Provetta litio-eparina, verde chiara 1ʹ300 → rcf 15 min 2ʹ500 → rcf 15 min Provetta EDTA, lilla Provetta EDTA, lilla In genere non centrifugare In genere non centrifugare Se si necessita di plasma EDTA: 1ʹ300 rcf → 15 min Se si necessita di plasma EDTA: 2ʹ500 rcf → 10 min Provetta glucosio, grigia Provetta glucosio, grigia Non centrifugare Non centrifugare 400 rcf → 5 min © by Viollier AG / 11.2015 Come devo centrifugare l’urina per ottenere il sedimento? STS 0292 Come centrifugo in maniera corretta? L’obbiettivo è centrifugare con l’intensità necessaria, il più delicatamente possibile. Una centrifugazione troppo energica può danneggiare il campione (alterazione delle cellule, emolisi), una centrifugazione troppo poco intensa può lasciare delle cellule nel surnatante e falsare così dei risultati delle analisi. Cosa succede durante la centrifugazione? Come durante la VES (velocità di eritrosedimentazione) la gravitazione trascina le cellule verso il fondo della provetta a causa del loro superiore peso specifico. La centrifugazione amplifica la gravitazione tra cento e mille volte, per cui la separazione viene raggiunta in pochi minuti. 3. Quanti giri al minuto (U/min, rpm, min¯¹) devo impostare sulla centrifuga? a Inserire il raggio (r) in mm e la forza centrifuga relativa necessaria (rcf) nella formula: rpm = rcf r × 1.118 × 1ʹ000 b Inserire il raggio in mm e la rcf nel calcolatore online → www.viollier.ch/rpm-calculator c Nel nomogramma inserire il raggio in mm e la rcf necessaria: 6000 Quali fattori influenzano la centrifugazione? Il campo gravitazionale artificiale che attira le cellule verso il fondo della provetta aumenta all’aumentare del raggio / del diametro e della velocità del rotore (regime). Inoltre il risultato è dipendente dalla durata della centrifugazione. Come regolo il regime della mia centrifuga in maniera corretta? 1. Qual è la forza centrifuga relativa (rcf; numero di g) necessaria? 300 250 130 2. Qual è il raggio (= metà del diametro) della mia centrifuga? 110 a Lettura al rotore o b Consultazione del manuale d’uso o c Misurazione della distanza dal centro dell’asse verticale ed il fondo della provetta 4500 4000 3000 200 190 180 170 160 150 140 Dipendente dal tipo di campione (sangue intero, coagulazione) e dal tipo di provetta / produttore. Quando si usano gli adattatori di riduzione per provette più piccole si riduce il raggio. 5000 7000 6000 5000 4000 100 3500 2000 1 1500 120 Raggio con riduttore 3000 1000 2500 800 700 600 500 2000 400 2 300 90 200 80 150 70 100 60 50 1500 1400 1300 1200 1100 80 70 60 50 40 1000 900 800 30 Raggio senza riduttore 3 40 700 20 15 600 10 500 30 r [mm] rcf rpm Esempio: 1 Sono richiesti 1ʹ300 rcf. 2 Il raggio è 86 mm. Linea attraverso 1 e 2 3 Il regime necessario è di ca. 3ʹ700 rpm! © by Viollier AG / 11.2015 Cosa significa ‘centrifugare in maniera corretta’? STS 0292 Come centrifugo in maniera corretta? 3. Quanti giri al minuto (U/min, rpm, min¯¹) devo impostare sulla centrifuga? d Lettura della tabella: Raggio ( r ) in mm 50 Urina 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 105 110 125 400 2ʹ600 2ʹ500 2ʹ400 2ʹ300 2ʹ200 2ʹ100 2ʹ100 2ʹ000 1ʹ900 1ʹ900 1ʹ800 1ʹ800 1ʹ800 1ʹ700 800 3ʹ700 3ʹ600 3ʹ400 3ʹ200 3ʹ100 3ʹ000 2ʹ900 2ʹ900 2ʹ800 2ʹ700 2ʹ600 2ʹ600 2ʹ500 2ʹ400 1ʹ200 4ʹ600 4ʹ400 4ʹ200 4ʹ000 3ʹ900 3ʹ700 3ʹ600 3ʹ500 3ʹ400 3ʹ300 3ʹ200 3ʹ100 3ʹ100 2ʹ900 Vacutainer® 1ʹ300 4ʹ800 4ʹ500 4ʹ300 4ʹ200 4ʹ000 3ʹ900 3ʹ800 3ʹ700 3ʹ500 3ʹ400 3ʹ400 3ʹ300 3ʹ200 3ʹ000 1ʹ400 5ʹ000 4ʹ700 4ʹ500 4ʹ300 4ʹ200 4ʹ000 3ʹ900 3ʹ800 3ʹ700 3ʹ600 3ʹ500 3ʹ400 3ʹ300 3ʹ200 1ʹ500 5ʹ100 4ʹ900 4ʹ700 4ʹ500 4ʹ300 4ʹ200 4ʹ000 4ʹ000 3ʹ800 3ʹ700 3ʹ600 3ʹ500 3ʹ400 3ʹ300 1ʹ600 5ʹ300 5ʹ000 4ʹ800 4ʹ600 4ʹ500 4ʹ300 4ʹ200 4ʹ100 3ʹ900 3ʹ800 3ʹ700 3ʹ600 3ʹ600 3ʹ400 1ʹ700 5ʹ500 5ʹ200 5ʹ000 4ʹ700 4ʹ600 4ʹ400 4ʹ300 4ʹ200 4ʹ100 3ʹ900 3ʹ800 3ʹ800 3ʹ700 3ʹ500 1ʹ800 5ʹ600 5ʹ400 5ʹ100 4ʹ900 4ʹ700 4ʹ600 4ʹ400 4ʹ300 4ʹ200 4ʹ100 4ʹ000 3ʹ900 3ʹ800 3ʹ600 2ʹ000 5ʹ900 5ʹ600 5ʹ400 5ʹ200 5ʹ000 4ʹ800 4ʹ700 4ʹ600 4ʹ400 4ʹ300 4ʹ200 4ʹ100 4ʹ000 3ʹ800 2ʹ200 6ʹ200 5ʹ900 5ʹ700 5ʹ400 5ʹ200 5ʹ100 4ʹ900 4ʹ800 4ʹ600 4ʹ500 4ʹ400 4ʹ300 4ʹ200 4ʹ000 2ʹ400 6ʹ500 6ʹ200 5ʹ900 5ʹ700 5ʹ500 5ʹ300 5ʹ100 5ʹ000 4ʹ800 4ʹ700 4ʹ600 4ʹ500 4ʹ400 4ʹ100 Monovette® 2ʹ500 6ʹ700 6ʹ400 6ʹ100 5ʹ800 5ʹ600 5ʹ500 5ʹ300 5ʹ100 5ʹ000 4ʹ800 4ʹ700 4ʹ600 4ʹ500 4ʹ200 2ʹ600 6ʹ800 6ʹ400 6ʹ200 5ʹ900 5ʹ700 5ʹ500 5ʹ300 5ʹ200 5ʹ000 4ʹ900 4ʹ800 4ʹ700 4ʹ500 4ʹ300 2ʹ800 7ʹ000 6ʹ700 6ʹ400 6ʹ100 5ʹ900 5ʹ700 5ʹ500 5ʹ400 5ʹ200 5ʹ100 5ʹ000 4ʹ800 4ʹ700 4ʹ500 3ʹ000 7ʹ300 6ʹ900 6ʹ600 6ʹ300 6ʹ100 5ʹ900 5ʹ700 5ʹ600 5ʹ400 5ʹ300 5ʹ100 5ʹ000 4ʹ900 4ʹ600 con riduttore originale senza riduttore bossolo corto max. 6ʹ000 rpm max. 4ʹ000 rpm Hettich EBA 20, EBA 200 Hettich EBA 270 bossolo lungo © by Viollier AG / 11.2015 rcf STS 0292 Impostazione centrifughe Rotore fisso EBA 20, EBA 200 max. 6ʹ000 rpm Raggio del rotore: con riduttore: 67 mm senza riduttore: 86 mm Rotore ad oscillazione libera EBA 270 max. 4ʹ000 rpm Raggio del rotore: bossolo corto: 101 mm bossolo lungo: 126 mm EBA 20, EBA 200 con riduttore EBA 270 senza riduttore bossolo corto bossolo lungo durata Vacutainer® Siero, litio-epar., EDTA 1ʹ300 rcf 4ʹ200 rpm 3ʹ700 rpm 3ʹ400 rpm 3ʹ000 rpm 15 min 400 rcf 2ʹ300 rpm 2ʹ000 rpm 1ʹ800 rpm 1ʹ700 rpm 5 min Siero, EDTA 2ʹ500 rcf 5ʹ800 rpm 5ʹ100 rpm (4ʹ700 rpm)* (4ʹ200 rpm)* 10 min Litio-eparina 2ʹ500 rcf 5ʹ800 rpm 5ʹ100 rpm (4ʹ700 rpm)* (4ʹ200 rpm)* 15 min 400 rcf 2ʹ300 rpm 2ʹ000 rpm 1ʹ800 rpm 1ʹ700 rpm 5 min Urina Monovette® Urina * Non adatto per Monovette®, usare EBA 20 oppure EBA 200 oppure sostituire con Vacutainer® rcf r × 1.118 rpm = giri al minuto × 1ʹ000 rcf = forza centrifuga relativa (numero di g) r = raggio del rotore © by Viollier AG / 11.2015 rpm =
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