STUDIO SULLA
DETERMINAZIONE DI ALCUNI
AZOCOLORANTI NEL CUOIO
Bing Shen
Comprehensive Laboratory of
Jiaxing Entry-exit Inspection &
Quarantine Bureau
1. Scopo


Al momento, per la determinazione di alcuni
coloranti azoici nel cuoio si impiega lo standard
tedesco DIN53316, simile all’ISO/TS17234:2003.
Questo metodo ha un difetto evidente.
Dopo
separazione
riduttiva,
estrazione,
concentrazione e soluzione in solventi appropriati,
la soluzione viene analizzata con strumenti come
cromatografia gassosa (GC), cromatografia liquida
ad alte prestazioni (HPLC) senza alcuna
purificazione.


Dato che vi sono varie impurità nel cuoio, i picchi
cromatografici che ne derivano possono interferire
con l’identificazione e quantificazione.
Inoltre, le impurità contenute nella colonna
ridurrebbero l’efficienza e la durata della colonna
stessa e inquinano il rilevatore.


La presente tesi illustra un metodo migliorato per
la determinazione di alcuni coloranti azoici nel
cuoio sulla base del DIN53316 e che mantiene
sgrassaggio, separazione riduttiva ed estrazione
come nel DIN 53316.
Aggiungendo un passaggio di purificazione, la
maggior parte delle impurità vengono rimosse, il
cromatogramma si semplifica, l’interferenza si
riduce enormemente e la durata della colonna
aumenta.
2. Controlli e procedure
sperimentali


Per il processo di purificazione viene utilizzato
un prodotto chimico sintetico - K8SiW11O39.
Questo composto si combina con ammine
aromatiche in soluzione acida per formare
un composto idrosolubile, rilasciando
contemporaneamente ammine aromatiche
in soluzione basica. Questo serve per
rimuovere le impurità.



Mantiene sgrassaggio, separazione riduttiva ed
estrazione come il DIN53316.
Dopo l’estrazione l’eluito viene raccolto in una
provetta a cui sono state precedentemente aggiunte
5 gocce di soluzione acquosa di K8SiW11O39 (0.05
mol/l) e 5 e gocce di acido cloridrico in soluzione
acquosa (1 mol/l).
L’eluito è concentrato in un evaporatore rotante
sottovuoto. Il resto del t-butilmetiletere viene
evaporato fino all’essiccamento con un leggero
flusso di gas inerte.



Lavare la soluzione acquosa nella provetta con nesano. Rimuovere l’n-esano con un contagocce.
Aggiungere 10 gocce di soluzione acquosa di
idrossido di sodio e (5 mol/l) 1.0 ml di diclorometano,
chiudere la provetta saldamente e agitare con forza.
Dopo la centrifuga lo strato superiore della soluzione
acquosa viene rimosso con un contagocce. Lo strato
organico viene analizzato con GC/MS ed HPLC.
3. Risultati del test




La purificazione del metodo migliorato può rimuovere
molte impurità.
Il metodo migliorato può ridurre molto l’influenza delle
impurità.
Il rapporto di miglioramento di questo metodo rispetta i
requisiti del DIN53316.
Il metodo migliorato e il DIN53316 si applicano
entrambi agli stessi campioni. Non vi sono differenze
rilevanti nei risultati di qualificazione tra questi due
metodi.
Cromatogramma TIC del
DIN53316 e metodo migliorato
A
b
u
n
a
n
c
2
d
.
6
e
+
e
0
7
2
.
4
e
+
0
7
2
.
2
e
+
0
7
2
e
+
0
7
T
1
.
8
e
+
0
7
1
.
6
e
+
0
7
1
.
4
e
+
0
7
1
.
2
e
+
0
7
1
e
+
0
7
8
0
0
0
0
0
0
6
0
0
0
0
0
0
4
0
0
0
0
0
0
2
0
0
0
0
0
0
e
-
6
T
i m
A
b
u
n
-
.
0
0
8
.
0
0
1
0
.
0
0
1
2
.
0
0
1
4
.
0
0
1
6
d
a
n
c
2
e
+
0
7
1
. 8
e
+
0
7
1
. 6
e
+
0
7
1
. 4
e
+
0
7
1
. 2
e
+
0
7
1
e
+
0
7
0
0
0
0
0
0
6
0
0
0
0
0
0
4
0
0
0
0
0
0
2
0
0
0
0
0
0
0
1
Z
8
1
.
0
0
0
8
5
2
0
D
.
I
N
2
1
.
2
2
0
0
- - >
I C
:
Z
1
0
8
5
G
.
B
2
6
e
0
:
D
4
2
.
0
0
2
4
.
0
0
2
6
.
0
0
2
8
.
0
0
3
0
.
0
0
3
2
.
0
0
e
8
i m
.
C
>
T
T
I
. 0
0
8
. 0
0 1
0
. 0
01
2
. 0
01
4
. 0
01
6
. 0
01
8
. 0
02
0
. 0
. D
1
02
. 5
2
. 0
3
02
4
. 0
02
6
. 0
02
8
. 0
03
0
. 0
03
2
. 0
0
NIST PBM Library Search Result
(risultato ricerche documentate)
A b u n d a n c e
S c a n
5 7 4 7
(2 1 .3 8 9
m in ) :
Z 1 0 8 5 D I N .D
7 4
1 8 0 0 0 0 0
1 6 0 0 0 0 0
8 7
1 4 0 0 0 0 0
O
O
1 2 0 0 0 0 0
1 0 0 0 0 0 0
H e x a d e c a n o ic
a c id ,
m e th y l e s te r
8 0 0 0 0 0
6 0 0 0 0 0
5 5
1 4 3
2 5 5
4 0 0 0 0 0
1 9 9
9 7
2 0 0 0 0 0
1 2 9
1 1 1
1 5 7
2 6 7
1 8 5
2 1 3
1 7 1
2 2 7
2 4 1
2 7 8
0
6 0
m /z -->
8 0
1 0 0
1 2 0
1 4 0
1 6 0
1 8 0
2 0 0
2 2 0
2 4 0
2 6 0
2 8 0
NIST PBM Library Search Result
(risultato ricerche documentate)
A b u n d a n c e
S c a n
5 7 9 4
(2 1 . 5 2 0
m
in ) : Z 1 0 8 5 G
1 8 4
B . D
4 5 0 0 0 0 0
2
NH
4 0 0 0 0 0 0
3 5 0 0 0 0 0
3 0 0 0 0 0 0
2 5 0 0 0 0 0
2 0 0 0 0 0 0
2
NH
1 5 0 0 0 0 0
1 0 0 0 0 0 0
9 2
5 0 0 0 0 0
0
5 1
6 5
6 0
m
/ z -->
7 7
8 0
1 0 3
1 0 0
1 1 71 3 0
1 4 0
1 2 0
1 4 0
1 5 61 6 7
1 9 6 2 1 0
1 6 0
1 8 0
2 0 0
2 2 7
2 2 0
2 4 52 5 62 6 72 7 8
2 4 0
2 6 0
2 8 0
Il rapporto di recupero nel metodo
migliorato
92-67-1
92-87-5
95-69-2
91-59-8
106-47-8
615-05-4
101-77-9
91-94-1
119-90-4
119-93-7
Rate of
recovery
87.9
85.4
84.9
80.4
84.4
30.0
86.5
80.0
89.2
82.1
Requirement
of DIN53316
70%
70%
70%
70%
70%
20%
70%
70%
70%
70%
838-88-0
91.4
70%
120-71-8
86.1
70%
101-14-4
96.3
70%
101-80-4
139-65-1
95-53-4
95-80-7
137-17-7
83.6
92.7
81.9
70.1
81.3
70%
70%
50%
50%
70%
No.
Amine
CAS-No.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
4-aminodiphenyl
benzidine
4-chloro-o –toluidine
2-naphthylamine
p –chloroaniline
2，4-diaminoanisole
4，4′-diaminodiphenylmethane
3，3′–dichlorobenzidine
3，3′–dimethoxybenzidine
3，3′–dimethylbenzidine
3，3′–dimethyl-4，4′
-diaminodiphenylmethane
p –cresidine
4，4′- methylene
-bis-(2-chloroaniline)
4，4′-oxydianiline
4，4′-thiodianiline
o –toluidine
2，4-diaminotoluene
2，4，5-trimethylaniline
11
12
13
14
15
16
17
18
Risultati di qualificazione
DIN53316 e metodo migliorato
Quantification results (mg/kg)
Improved method DIN53316
Sample
Amine
Pig leather (black)
benzidine
80.2
99.3
Pig leather (black)
3,3’–dimethylbenzidine
438
500
Pig leather (brown)
benzidine
416
401
Sheep leather (black)
3,3’–dimethylbenzidine
3,3’–dimethoxybenzidine
381
552
389
582
Sheep leather (brown)
benzidine
638
777
Cattle leather (black)
benzidine
529
516
4. Conclusioni



Il metodo migliorato può rimuovere molte
impurità e semplificare il cromatogramma.
Il metodo migliorato può ridurre
notevolmente le interferenze delle impurità,
migliorare la sensibilità a la risoluzione.
Il metodo migliorato ha scarsa influenza sul
composto di arrivo. Rispetta i requisiti del
DIN53316.